發(fā)芽糙米提取物抗氧化性及活性成分分析

劉曉飛，侯艷，馬京求，戚月娜，趙小紅，張娜

（哈爾濱商業(yè)大學食品工程學院，黑龍江哈爾濱150028）

糙米在水分充足、光照適當?shù)沫h(huán)境下，便可萌芽。萌芽使糙米內(nèi)部大量的酶被喚醒釋放，并在萌芽過程中營養(yǎng)素由結(jié)合態(tài)變?yōu)橛坞x態(tài)[1]，萌芽后的糙米包含的營養(yǎng)成分較萌芽前有所提高[2]，還會產(chǎn)生大量的γ-氨基丁酸[3]，γ-氨基丁酸可以緩解動脈硬化以及改善肝功能等[4]。同時，發(fā)芽糙米內(nèi)部還具有多種抗氧化活性物質(zhì)，如多酚類物質(zhì)、黃酮類物質(zhì)、多糖、糖蛋白[5]等。目前，水、有機溶劑以及有機溶劑與水等的混合體系被廣泛應用于提取多酚等抗氧化物質(zhì)[6]，因此可選擇水、甲醇、乙醇、丙酮等溶劑提取多酚類物質(zhì)，這些溶劑亦可有效提取黃酮類物質(zhì)。李婧雯等[7]采用不同極性的6種溶劑對蒲公英進行提取，水提取物中多糖含量最高，乙醇的提取物中總黃酮和總酚含量是最高的，甲醇的提取物中皂苷含量最高。崔泰花等[8]采用不同極性的8種溶劑對桔梗進行提取，結(jié)果顯示總酚在蒸餾水提取物中含量最高，石油醚的提取物中總黃酮、麥角甾醇含量是最高的，乙醇的提取物中去芹糖桔梗皂苷D含量是最高的，桔梗皂苷D僅在蒸餾水提取物中檢出。

本試驗分別以蒸餾水、甲醇、無水乙醇、丙酮、石油醚制備發(fā)芽糙米提取物，采用DPPH自由基清除率、羥基自由基清除率、超氧陰離子自由基清除率和鐵離子還原能力為指標進行抗氧化活性評價，并測定各發(fā)芽糙米提取物中總酚、總黃酮、γ-氨基丁酸、糖蛋白和多糖含量，并考察其對抗氧化活性的影響。對發(fā)芽糙米活性功能評估及開發(fā)應用提供理論基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

糙米：黑龍江省農(nóng)業(yè)科學院；甲醇、無水乙醇、丙酮、石油醚、抗壞血酸、氫氧化鈉、濃硫酸、硝酸鋁、無水碳酸鈉（分析純）：南京生物化學試劑研究中心。

1.2 儀器與設(shè)備

M288479高速萬能粉碎機：北京東方德教育科技有限公司；SHZ-B水浴恒溫振蕩器：天津市泰斯特儀器儀表有限公司；TGL-16G-B臺式高速離心機：閩南星科科學儀器廠；RE-301旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器：上海保玲儀器設(shè)備有限公司；721E紫外可見分光光度計：上海光譜儀器有限公司。

1.3 方法

1.3.1 待測樣品的提取

1.3.1.1 糙米發(fā)芽

選用胚完好且完整的糙米，用0.1 mol/L次氯酸鈉溶液浸泡1 h，用冷卻的開水清洗3次，4℃避光的條件下，將糙米浸泡在無菌水中12 h。取出糙米后放置在潮濕的環(huán)境中在20℃條件下培養(yǎng)過夜。去除掉沒有發(fā)芽的糙米后置于干燥箱內(nèi)干燥[9]。

1.3.1.2 發(fā)芽糙米提取物的制備

將干燥好的發(fā)芽糙米粉碎，過80目篩。精確稱量5.0 g發(fā)芽糙米粉5份，按照1∶20(g/mL)料液比分別與蒸餾水、甲醇、無水乙醇、丙酮和石油醚混合，65℃水浴振蕩90 min，4 200 r/min離心10 min，沉淀物按相同條件再提取1次，合并上清液、過濾、相應溶劑定容、蒸發(fā)濃縮，得到最終提取物。將經(jīng)不同極性溶劑提取的發(fā)芽糙米提取物分別稀釋 0、2.5、5.0、7.5、10.0 倍，備用。

1.3.2 DPPH自由基清除率測定

取不同稀釋倍數(shù)的各提取物0.5 mL，添加0.1 mmol/L DPPH溶液（取0.039 4 g DPPH溶于1 L無水乙醇中）2.5 mL，室溫25℃放置于避光處。空白對照為無水乙醇，陽性對照為抗壞血酸[10]。517 nm處測吸光度值。計算公式如下。

式中：E1為DPPH自由基清除率，%；A0為空白組吸光度值；A1為待測樣品吸光度值。

1.3.3 超氧陰離子自由基清除率測定

取不同稀釋倍數(shù)的各提取物0.1 mL，添加0.1 mol/L pH 8.2 的三羥甲基氨基甲烷（tromethamine，Tris）緩沖溶液2.8 mL，混勻。25℃水浴10 min，加入3 mmol/L沒食子酚溶液0.1 mL，每30 s于325 nm波長處測定一次吸光度值，連續(xù)測定5 min，記錄數(shù)據(jù)，繪制其回歸方程，空白對照為蒸餾水，陽性對照為抗壞血酸[11]。計算公式如下。

式中：E2為超氧陰離子自由基清除率，%；Va為蒸餾水斜率；Vb為樣品斜率。

1.3.4 羥基自由基清除率測定

0.75 mmol/L的鄰二氮菲無水乙醇溶液1.0 mL，依次添加pH 7.4 0.2 mol/L磷酸緩沖液2.0 mL、不同稀釋倍數(shù)各提取物1 mL，充分振蕩。再添加1.0 mL 0.75 mmol/L硫酸亞鐵溶液，振蕩均勻，最后添加1.0 mL 1%的過氧化氫溶液。37℃水浴1 h，510 nm測吸光度值，空白對照為蒸餾水，陽性對照為抗壞血酸[12]。計算公式如下。

式中：E3為羥基自由基清除率，%；A為蒸餾水替代樣品的吸光度；B為樣品反應后的吸光度；C為蒸餾水代替H2O2的吸光度。

1.3.5 鐵離子還原能力測定

取不同稀釋倍數(shù)的各提取物2.0 mL，添加0.2 mol/L pH 6.6磷酸緩沖溶液2.0 mL，1%鐵氰化鉀溶液2.0 mL。50℃水浴20 min，添加2.0 mL 10%三氯乙酸溶液，振蕩，3 000 r/min離心5 min，取上清液2.0 mL，依次加入0.1%的三氯化鐵溶液0.4 mL，蒸餾水2 mL，50℃水浴10 min；當溶液由黃變藍時，700 nm處對其吸光度值進行測定，空白對照為蒸餾水，陽性對照為抗壞血酸[13]。

1.3.6 總酚含量的測定

采用Folin-Ciocalteu法測定各提取物中的總酚含量[14]。精準稱取沒食子酸標準樣品10.0 mg，用50%甲醇配成2.5 mg/mL標準液。準確吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL標準液于試管，50%甲醇定容至1.0 mL。吸取不同濃度的標準液各0.1 mL，加入50%的Folin-Ciocalteu試劑1.0 mL，充分振蕩1.0 min后加入0.2 g/L的碳酸鈉溶液2.0 mL，再添加蒸餾水至5.0 mL，充分混勻后在避光室溫25℃條件下放置2.0 h，于760 nm測其吸光度值。記錄數(shù)據(jù)，繪制標準曲線。得到?jīng)]食子酸標準曲線的回歸方程為y=1.458 4x+0.021 3，R2=0.997 7。

取不同稀釋倍數(shù)的各提取物0.1 mL，按照上述方法測定其吸光度值，以沒食子酸為當量計算各提取物中總酚含量。

1.3.7 總黃酮含量的測定

采用亞硝酸鈉-硝酸鋁法測定各提取物中的總黃酮含量[15]。精準稱量蘆丁標準樣品17.5 mg，用50%甲醇配制成2.5 mg/mL標準液。準確吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL標準液移入試管，添加5%亞硝酸鈉溶液0.15 mL、再添加10%硝酸鋁溶液0.15 mL，分別靜置6 min，加入2 mL 4%氫氧化鈉溶液，添加蒸餾水至5.0 mL，待測液混勻后放置3 min，于508 nm處測定吸光度值。記錄數(shù)據(jù)，繪制標準曲線。得到蘆丁標準曲線的回歸方程為y=12.051x-0.007 1，R2=0.997 7。

取不同稀釋倍數(shù)的不同極性溶劑提取液0.5 mL，按照上述方法測定其吸光度，以蘆丁為當量計算各提取物中總黃酮含量。

1.3.8 γ-氨基丁酸含量的測定

采用比色法測定各提取物中的γ-氨基丁酸含量[16]。準確配制 0.04、0.10、0.25、0.50、1.00 mg/mL 的 γ-氨基丁酸標準溶液，加入0.1 mol/L四硼酸鈉緩沖液0.8 mL，6%重蒸苯酚液2.0 mL，混勻后添加1.0 mL 7.5%的次氯酸鈉溶液，充分振蕩。沸水浴10 min，隨即冰浴5 min，待溶液顯現(xiàn)藍綠色，隨即添加2.0 mL 60%乙醇溶液，于645 nm處測定其吸光度值。記錄數(shù)據(jù)，繪制標準曲線。得到γ-氨基丁酸的標準曲線的回歸方程為 y=0.907 7x-0.011，R2=0.999 2。

取不同稀釋倍數(shù)的各提取物1.0 mL，按照上述方法測定吸光度，計算各提取物中γ-氨基丁酸含量。

1.3.9 糖蛋白含量的測定

采用考馬斯亮藍檢測法分析各提取物中的糖蛋白含量。配制1.0 mg/mL的牛血清白蛋白標準溶液，分別吸取 5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0、11.0 mL 用蒸餾水定容至100 mL，吸取稀釋液各1.0 mL，添加5.0 mL考馬斯亮藍溶液，振蕩后靜置2 min，在595 nm測其吸光度，空白對照為蒸餾水。記錄數(shù)據(jù)，繪制標準曲線。得到牛血清白蛋白標準曲線的回歸方程為y=0.077 9x+0.083 1，R2=0.992 4。

取不同稀釋倍數(shù)的不同極性溶劑提取液1.0 mL，按上述方法測其吸光度，計算各提取物中糖蛋白含量。

1.3.10 多糖含量的測定

采用苯酚-硫酸檢測法分析各提取物中的多糖含量。精確配制1.0 mg/mL葡萄糖溶液100 mL，精確吸取10 mL，蒸餾水定容到250 mL，即為葡萄糖標準液，分別移取 0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6、1.8 mL，用蒸餾水定容到2.0mL，添加1.0mL6%苯酚溶液、5.0mL濃硫酸。充分振蕩，25℃冷卻20 min，490 nm測其吸光度，空白對照為蒸餾水。記錄數(shù)據(jù)，繪制標準曲線。得到葡萄糖標準曲線的回歸方程為y=0.328 0x-0.018 5，R2=0.994 4。

取不同稀釋倍數(shù)的各提取物1.0 mL，按照上述方法測其吸光度，計算各提取物中多糖含量。

2 結(jié)果與分析

2.1 DPPH自由基清除能力

不同極性溶劑發(fā)芽糙米提取物的DPPH自由基清除率如圖1所示。

圖1 不同極性溶劑提取物對DPPH自由基清除率的影響Fig.1 Effects of different polar solvent extracts on DPPH free radical scavenging rate

由圖1可知，不同極性溶劑發(fā)芽糙米提取物對DPPH自由基的清除率均小于抗壞血酸，但相差不大。隨著提取物稀釋倍數(shù)的增大，溶液內(nèi)的抗氧化活性物質(zhì)含量越少，因此所有提取物對DPPH自由基清除能力均變?nèi)酢Ｕw上各提取物對DPPH自由基的清除能力大小依次為蒸餾水>丙酮>無水乙醇>甲醇>石油醚。李現(xiàn)日等[17]發(fā)現(xiàn)：當金花葵花提取物的濃度相同時，不同的極性溶劑提取物DPPH自由基清除能力順序依次為正丁醇＞無水乙醇＞石油醚＞水。這幾種溶劑的極性強弱為水>甲醇>無水乙醇>丙酮>正丁醇>石油醚，由此可知提取溶劑的極性對提取物的DPPH自由基清除能力并無太大的影響。而Sepahpour等[18]研究姜黃、咖喱葉和火炬姜檸檬草發(fā)現(xiàn)，蒸餾水提取物的抗氧化能力低于其它極性溶劑提取物，這與本試驗結(jié)果差異較大，可能是蒸餾水更適于發(fā)芽糙米中抗氧化物質(zhì)的提取。

2.2 超氧陰離子自由基清除能力

不同極性溶劑發(fā)芽糙米提取物對超氧陰離子自由基清除率的影響如圖2所示。

圖2 不同極性溶劑提取物對超氧陰離子自由基清除率的影響Fig.2 Effects of different of polar solvent extracts on superoxide anion radical scavenging rate

由圖2可知，不同極性溶劑發(fā)芽糙米提取物對超氧陰離子自由基的清除率均低于抗壞血酸，且相差較大。其中蒸餾水提取物與無水乙醇提取物的清除率隨提取物稀釋倍數(shù)的增加呈陡峭性下降趨勢，而甲醇提取物的清除效果一直比其它極性溶劑提取物差，且隨提取物稀釋倍數(shù)的增大呈平緩型下降趨勢。隨著提取物稀釋倍數(shù)的增大，所有提取物超氧陰離子自由基清除率均下降。此現(xiàn)象的出現(xiàn)，可能是由于極性溶劑濃度對發(fā)芽糙米中抗氧化物質(zhì)的提取量有影響。整體上各提取物超氧陰離子自由基清除能力強弱順序為無水乙醇>丙酮>石油醚>蒸餾水>甲醇。郭剛軍等[19]發(fā)現(xiàn)不同溶劑普洱茶的提取物對超氧陰離子自由基清除的能力強弱依次為抗壞血酸>水>正丁醇>氯仿>乙醇，而幾種溶劑的極性強弱為水>甲醇>乙醇>丙酮>正丁醇>氯仿>石油醚，可見提取溶劑的極性對提取物清除超氧陰離子自由基的能力無太大影響。而與本試驗結(jié)果的差別可能是由于被提取物不同，且提取出的抗氧化活性物質(zhì)的種類及含量不同。

2.3 羥基自由基清除能力

不同極性溶劑發(fā)芽糙米提取物對羥基自由基清除能力的影響如圖3所示。

圖3 不同極性溶劑提取物對羥自由基清除率的影響Fig.3 Effects of different polar solvent extracts on hydroxyl radical scavenging rate

由圖3可知，不同極性溶劑發(fā)芽糙米提取物對羥基清除率均小于抗壞血酸，且相差較大。其中蒸餾水提取物的清除率隨提取物稀釋倍數(shù)增大呈陡峭性下降趨勢，而其它溶劑提取物的清除率隨提取物稀釋倍數(shù)增大而呈平緩性下降趨勢。甲醇提取物的清除率與丙酮提取物相差不大，但均小于其它提取物。隨著提取物稀釋倍數(shù)的增大，所有提取物的羥基自由基清除效果均變?nèi)酰梢姼魈崛∥锏牧u基自由基清除率受溶液濃度影響較大。同時，由于極性不同的溶劑從發(fā)芽糙米中提取出的抗氧化物質(zhì)數(shù)量也有區(qū)別，自由基的清除率也可能受此影響。各提取物對羥基自由基的清除率依次為蒸餾水>石油醚>無水乙醇>甲醇>丙酮。云成悅等[20]發(fā)現(xiàn)不同極性溶劑頭花蓼多酚的提取物對羥基自由基清除率的大小為水>石油醚>氯仿>正丁醇>乙酸乙酯，而溶劑的極性強弱為水>甲醇>乙醇>丙酮>正丁醇>乙酸乙酯>氯仿>石油醚，可知提取溶劑的極性對發(fā)芽糙米提取物的羥基自由基清除能力并無太大影響。而本試驗結(jié)果順序與之并不一致，可能是因為不同的物質(zhì)本身所含有的抗氧化活性物質(zhì)的種類以及含量不同。

2.4 鐵離子還原能力

不同極性溶劑發(fā)芽糙米提取物對鐵離子還原能力的影響如圖4所示。

由圖4可知，不同極性溶劑發(fā)芽糙米提取物對鐵離子的還原能力均弱于抗壞血酸，且相差較大。蒸餾水提取物與甲醇提取物對鐵離子的還原能力隨提取物稀釋倍數(shù)的增加呈平緩性下降趨勢，其余提取物下降幅度更為平緩。因此各提取物對鐵離子的還原能力受溶液溶度的影響極大。Mehral等[21]也有類似的發(fā)現(xiàn)。無水乙醇提取物與丙酮提取物的鐵離子還原能力相差不大，但隨著提取溶液稀釋倍數(shù)的增加，丙酮提取物受濃度的影響比無水乙醇提取物大。整體上不同極性溶劑的發(fā)芽糙米提取物還原鐵離子能力的強弱依次為蒸餾水>甲醇>無水乙>丙酮>石油醚。曹清華等[22]發(fā)現(xiàn)經(jīng)不同極性溶劑提取的白術(shù)提取物鐵離子還原能力排序依次為抗壞血酸>乙酸乙酯>正丁醇>石油醚>水，溶劑的極性順序為水>甲醇>乙醇>丙酮>正丁醇>乙酸乙酯>石油醚，由此可以發(fā)現(xiàn)溶液的極性對發(fā)芽糙米提取物的鐵離子還原能力并無太大的影響。而本試驗結(jié)果順序與之不一致，可能是提取方式不一致，也可能是不同物質(zhì)本身所含的抗氧化活性物質(zhì)有所不同。

圖4 不同極性溶劑提取物對鐵離子還原能力的影響Fig.4 Effects of different of polar solvent extracts on iron ion reduction ability

2.5 不同溶劑提取物中活性物質(zhì)分析

2.5.1 蒸餾水提取物中活性物質(zhì)分析

蒸餾水提取物中各活性物質(zhì)含量如圖5所示。

圖5 蒸餾水提取物中各物質(zhì)含量Fig.5 Contents of each substance in distilled water extract

從圖5可以得到，發(fā)芽糙米蒸餾水提取物中各物質(zhì)含量大小的排序為糖蛋白＞多糖＞γ-氨基丁酸＞總黃酮＞總酚。可以發(fā)現(xiàn)蒸餾水適合用于發(fā)芽糙米內(nèi)部糖蛋白的提取。結(jié)合圖1、圖3、圖4結(jié)果，與其它極性溶劑提取物相比，蒸餾水提取物具有較高的DPPH自由基清除能力、羥基自由基清除能力和鐵離子還原能力。可推測蒸餾水提取物中的糖蛋白與多糖起著主要的抗氧化作用，而γ-氨基丁酸、總酚和總黃酮起到的作用則較小。涂宗財?shù)萚23]采用不同極性的溶劑提取紅薯葉中的總酚，發(fā)現(xiàn)水提液具有最高的總酚得率。董怡等[24]研究溪黃草根的不同極性溶劑提取物中的總酚含量，發(fā)現(xiàn)總酚含量最高的為60%乙醇的提取物，而總酚含量最低的為水的提取物。由此可以發(fā)現(xiàn)，不同植物經(jīng)不同極性溶劑提取的提取物中總酚含量最高的不都是水提取物，造成此現(xiàn)象的原因可能是不同植物本身的性質(zhì)有較大的差別。

2.5.2 甲醇提取物中活性物質(zhì)分析

甲醇提取物中各活性物質(zhì)含量如圖6所示。

圖6 甲醇提取物中各物質(zhì)含量Fig.6 Contents of each substance in methanol extract

由圖6可知，發(fā)芽糙米甲醇提取物中各物質(zhì)的含量大小排序為多糖＞糖蛋白＞總黃酮＞γ-氨基丁酸＞總酚。由前面試驗結(jié)果可知，甲醇提取物對鐵離子的還原能力僅次于蒸餾水提取物，在甲醇提取物中對鐵離子還原起主要作用的物質(zhì)是多糖，其次是糖蛋白、γ-氨基丁酸、總黃酮以及總酚。劉曉飛等[25]發(fā)現(xiàn)發(fā)芽糙米內(nèi)部的多糖具有良好的抗氧化效果和總還原能力。由此可知，多糖具有較好的抗氧化效果。而大量研究表明[26]總酚和總黃酮是抗氧化活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，多酚及總黃酮含量較多的樣品顯示出更好的抗氧化能力。由于甲醇提取物中總酚及總黃酮的含量較少，所以未在甲醇提取物的抗氧化能力上起到作用。由圖6還可以發(fā)現(xiàn)甲醇適合發(fā)芽糙米中多糖的提取，可以從發(fā)芽糙米中提取多糖，作為天然的抗氧化劑用來延緩人體的衰老或者是其它的不良癥狀。

2.5.3 無水乙醇提取物中活性物質(zhì)分析

無水乙醇提取物中各活性物質(zhì)含量如圖7所示。

由圖7可以得到，發(fā)芽糙米無水乙醇提取物中各物質(zhì)含量大小的排序為糖蛋白＞多糖＞γ-氨基丁酸＞總黃酮＞總酚。可以發(fā)現(xiàn)無水乙醇適合發(fā)芽糙米中糖蛋白的提取。由前面試驗結(jié)果可知，與其它提取物相比，無水乙醇提取物對超氧陰離子自由基具有最強的清除作用，提取物中的糖蛋白在超氧陰離子自由基的清除中起主要作用，多糖起次要作用，γ-氨基丁酸、總黃酮和總酚起到的作用較小。而韓璐等[27]發(fā)現(xiàn)焙烤發(fā)芽糙米中的黃酮具有較強的鐵離子還原能力。Paula等[28]發(fā)現(xiàn)物質(zhì)提取的產(chǎn)率取決于所用的溶劑，隨極性、pH值、溫度、提取時間和樣品的組成而變化。所以造成上述現(xiàn)象出現(xiàn)的原因可能是提取時間以及提取溫度等使發(fā)芽糙米中總黃酮的含量發(fā)生了改變，從而導致提取到的總黃酮含量較低。

圖7 無水乙醇提取物中各物質(zhì)含量Fig.7 Content of each substance in anhydrous ethanol extract

2.5.4 丙酮提取物中活性物質(zhì)分析

丙酮提取物中各活性物質(zhì)的含量如圖8所示。

圖8 丙酮提取物中各物質(zhì)含量Fig.8 Content of each substance in acetone extract

由圖8可以得到，發(fā)芽糙米的丙酮提取物中各物質(zhì)含量大小的排序為多糖＞γ-氨基丁酸＞糖蛋白＞總黃酮＞總酚。可知在丙酮提取物中起最主要抗氧化作用的物質(zhì)是多糖，其次是γ-氨基丁酸，而糖蛋白、總黃酮和總酚起到的作用較小。丙酮提取物是除無水乙醇提取物外對超氧陰離子自由基具有較強清除能力的提取物，可推測多糖對超氧陰離子自由基具有較好的清除效果。同時還可以發(fā)現(xiàn)丙酮也較適宜于發(fā)芽糙米中多糖的提取。而卓瑪次力[29]發(fā)現(xiàn)青稞發(fā)芽糙米中的γ-氨基丁酸具有極強的DPPH自由基清除能力。由此可以得出γ-氨基丁酸不僅對超氧陰離子自由基具有較好的清除能力，對DPPH自由基也具有較好的清除作用。

2.5.5 石油醚提取物中活性物質(zhì)分析

石油醚提取物中各活性物質(zhì)的含量如圖9所示。

圖9 石油醚提取物中各物質(zhì)含量Fig.9 Content of various substances in petroleum ether extract

由圖9可以得到，發(fā)芽糙米石油醚提取物中各物質(zhì)含量大小的排序為糖蛋白＞多糖＞γ-氨基丁酸＞總酚＞總黃酮。因此在石油醚提取物中起最主要抗氧化作用的物質(zhì)是糖蛋白，其次是多糖，而γ-氨基丁酸、總黃酮和總酚起到的作用較小。石油醚提取物是除蒸餾水提取物外對羥基自由基具有較強清除效果的提取物，所以糖蛋白對羥基自由基具有較好的清除能力。同時還可以發(fā)現(xiàn)石油醚也較適宜于發(fā)芽糙米中糖蛋白的提取。劉曉飛等[5]發(fā)現(xiàn)發(fā)芽糙米內(nèi)的糖蛋白對DPPH自由基、羥基自由基的清除作用與抗壞血酸基本沒有差異，但超氧陰離子自由基清除能力和總還原能力弱于抗壞血酸。二者之間結(jié)果有所差異，這可能是由于發(fā)芽糙米中糖蛋白的提取方法存在差異，也可能是由于溶液極性的不同影響其抗氧化活性。

3 結(jié)論

本研究的結(jié)果表明，不同的極性溶劑發(fā)芽糙米提取物均具有一定的抗氧化活性，且呈一定的量效關(guān)系，但溶液的極性對提取物的抗氧化作用無太大的影響，更重要的是不同極性溶劑提取物的抗氧化能力的大小順序也會隨評價方法的不同而呈現(xiàn)出差異。發(fā)芽糙米的蒸餾水提取物對DPPH自由基清除率、羥基自由基清除率和鐵離子還原能力較高，而無水乙醇提取物對超氧陰離子自由基清除能力較高。

本研究也測定了發(fā)芽糙米不同極性溶劑提取物中總酚、總黃酮、γ-氨基丁酸、糖蛋白和多糖的含量，分析了各種物質(zhì)的含量對其抗氧化能力產(chǎn)生的影響。結(jié)果表明發(fā)芽糙米的蒸餾水提取物、無水乙醇提取物和石油醚提取物中的糖蛋白含量最高，發(fā)芽糙米的甲醇提取物和丙酮提取物中多糖含量最高，除石油醚提取物中為黃酮含量最低之外，其余的不同極性溶劑的發(fā)芽糙米提取物中含量最低的均為總酚。所以發(fā)芽糙米不同溶劑提取物中多糖和糖蛋白對自由基清除活性和鐵離子還原能力均具有較大的影響。