PCT、TNF-α和Th17在肝移植術后患者中的表達及對肝移植術后感染的預測價值

吳雅婷，師 婷，張 錦，高 娣

隨著器官移植技術的進步，肝移植手術已逐漸成為終末期肝病患者的有效治療手段[1]。然而，有相關研究發現，肝移植手術患者術前和術后補體和免疫球蛋白等水平較低，且術中大量輸注血制品和過量使用麻醉劑，術后各種導管留置和呼吸機使用等，導致術后感染概率較大[2]。因此，如何降低肝移植術后感染情況，保證患者治療效果是目前臨床研究熱點。

肝移植術后感染可使患者各種實驗室指標發生變化[3]。降鈣素原(procalcitonin，PCT)作為診斷細菌感染的敏感指標，廣泛應用于臨床，在多種感染性疾病中呈高表達狀態[4]。腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α，TNF-α)是人體內最常見的炎性因子。有文獻報道TNF-α可促進自由基及炎性介質等釋放，加重感染情況[5]。輔助性T淋巴細胞17(T helper cell 17，Th17)是近年新發現的一種CD4+細胞亞群，可特異性產生白細胞介素，在自身免疫性疾病和機體防御反應中具有重要的意義[6]。本研究探討PCT、TNF-α和Th17在肝移植術后患者中的表達及對肝移植術后感染的預測價值，現報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2017年1月—2019年5月在空軍軍醫大學第一附屬醫院西京醫院行肝移植手術且符合納入及排除標準的肝移植術后120例作為研究組，男81例，女39例；年齡34～65(51.41±5.71)歲；原發性肝癌合并肝硬化59例，肝硬化失代償32例，原發性肝癌18例，先天性膽道疾病6例，轉移性肝癌5例。另選取同期在該院進行體檢的健康體檢者98例作為對照組，男53例，女45例；年齡35～66(51.69±5.75)歲。根據是否發生術后感染[7]將肝移植術后120例分為感染組(69例)和未感染組(51例)兩組。各組一般資料比較差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經醫院醫學倫理委員會批準同意執行。

1.2納入及排除標準 納入標準：①所有患者均順利完成肝移植手術；②臨床資料完整；③患者和(或)其家屬簽署相關知情同意書。排除標準：①合并肝腎功能嚴重不全及惡性腫瘤者；②合并精神疾病無法配合本研究開展者。

1.3研究方法 研究組術后均給予免疫抑制等對癥支持治療。收集所有入選者臨床資料，比較研究組與對照組及感染組與未感染組PCT、TNF-α和Th17水平，應用多因素Logistic回歸分析探討肝移植術后感染的影響因素，應用受試者工作特征(ROC)曲線分析PCT、TNF-α、Th17及3項聯合檢測對肝移植術后感染的預測價值。

1.4檢測方法和判斷標準 研究組于肝移植術后次日，對照組于體檢當日清晨抽取空腹靜脈血5 ml，使用乙二胺四乙酸抗凝處理后，3000 r/min離心10 min，取上清液備用。應用德國羅氏公司生產的E601電化學發光自動免疫分析儀檢測PCT水平；采用酶聯免疫吸附試驗檢測TNF-α水平，試劑盒購自欣博盛生物科技有限公司；采用美國BD公司生產的流式細胞儀檢測Th17水平。所有操作均嚴格按照儀器或試劑盒配套說明書由專業人員進行。

PCT判定標準[4]：PCT<0.5 ng/ml為正常，PCT≥0.5 ng/ml為升高。TNF-α判定標準[5]：TNF-α<30 pg/ml為正常，TNF-α≥30 pg/ml為升高。Th17判定標準[6]：Th17<1%為正常，Th17≥1%為升高。

術后長期使用抗菌藥物標準[8]：采用世界衛生組織推薦的限定日劑量(DDD)、藥物利用頻度(DDDs)和藥物利用指數(DUI)作為評價用藥是否合理的依據，本研究DDD值以《新編藥物學》[9]及藥品說明書規定的日劑量為準，DDDs=總用藥量/DDD，DUI=DDDs/總用藥天數，DUI≤1為用藥量基本合理。

2 結果

2.1研究組和對照組PCT、TNF-α和Th17水平比較 研究組PCT、TNF-α和Th17水平高于對照組，差異有統計學意義(P<0.01)，見表1。

表1 肝移植術后患者和健康體檢者兩組PCT、TNF-α和Th17水平比較

2.2感染組與未感染組PCT、TNF-α和Th17水平比較 感染組PCT、TNF-α和Th17水平高于未感染組，差異有統計學意義(P<0.01)，見表2。

表2 肝移植術后感染與未感染兩組PCT、TNF-α和Th17水平比較

2.3肝移植術后感染影響因素分析 多因素Logistic回歸分析結果顯示，術后長期使用抗菌藥物、深靜脈導管留置時間≥9 d和PCT、TNF-α、Th17水平升高為影響肝移植術后感染的獨立危險因素(P<0.05或P<0.01)，見表3。

表3 肝移植術后感染影響因素分析

2.4PCT、TNF-α、Th17及3項聯合檢測對肝移植術后感染預測價值 ROC曲線分析結果顯示，PCT、TNF-α、Th17及3項聯合檢測對肝移植術后感染預測價值的約登指數分別為0.626、0.638、0.624、0.788；曲線下面積分別為0.789、0.777、0.729和0.912，其中以PCT、TNF-α和Th17 3項聯合檢測的曲線下面積最大，見圖1和表4。

表4 PCT、TNF-α、Th17及3項聯合檢測對肝移植術后感染預測價值的ROC曲線分析結果

圖1 PCT、TNF-α、Th17及3項聯合檢測對肝移植術后感染預測價值的ROC曲線

3 討論

有研究報道，手術創傷和免疫抑制劑使用會削弱肝移植患者免疫系統，導致肝移植術后感染風險顯著增加[10-13]。另有相關研究發現，細菌感染是導致肝移植術后死亡的主要原因之一[14-17]。因此，尋找快捷、可靠的術后感染診斷方法對肝移植患者具有重要意義。

PCT是一種無激素活性降鈣素前體，正常情況下主要于甲狀腺及肺部神經內分泌細胞表達并裂解成降鈣素，一旦機體遭受細菌感染，PCT水平可快速上升，且其升高程度與感染呈正相關[18]。有相關研究顯示，PCT水平變化與細菌感染密切相關，感染嚴重時PCT迅速升高，感染控制時PCT明顯下降，其不受機體免疫抑制狀態的影響[19]。Harputluoglu等[20]研究發現，PCT對感染診斷具有特異度高和敏感度好等優勢。Ossami Saidy等[21]對肝移植術后感染進行研究發現，肝移植術后感染患者PCT水平顯著高于未感染患者及正常人群，提示PCT對肝移植術后感染具有一定診斷價值。本研究結果顯示，研究組PCT水平高于對照組，感染組PCT水平高于未感染組，差異有統計學意義，與上述Ossami Saidy等[21]的研究結果基本一致。本研究多因素Logistic回歸分析結果顯示，PCT水平升高為影響肝移植術后感染的獨立危險因素，進一步證明PCT水平變化與肝移植術后感染密切相關，可作為評估肝移植術后感染的指標。

TNF-α是由單核細胞和巨噬細胞分泌的一種炎性介質。有研究證實TNF-α可誘導前列腺素E2、膠原酶的分泌和滑膜細胞的合成，促進炎癥反應發生[22]。Dohna Schwake等[23]研究發現TNF-α可誘導上皮及內皮細胞使腎臟固有細胞異常增殖，造成炎性因子表達升高，直接損傷系膜細胞；且其還具有促纖維化作用。本研究結果顯示,研究組TNF-α水平高于對照組，感染組TNF-α水平高于未感染組，差異有統計學意義；多因素Logistic回歸分析結果顯示，TNF-α水平升高為影響肝移植術后感染的獨立危險因素。說明TNF-α水平升高與肝移植術后感染有密切關系。

Th17是由輔助性T淋巴細胞0在白細胞介素-6和白細胞介素-23的刺激下分化而成的輔助性T淋巴細胞，主要分泌白細胞介素-17、白細胞介素-21和白細胞介素-23等促炎因子，在自身免疫調節中起著重要作用。有文獻報道，Th17在多發性硬化、類風濕性關節炎和過敏性疾病等自身免疫性疾病中表達增加[24]。近年，有學者研究發現，輔助性T淋巴細胞1是參與移植急性排斥反應的主要免疫細胞，Th17通過招募中性粒細胞促進炎癥反應[25]。同時，有學者在動物實驗中發現，Th17可誘導炎性細胞釋放炎性因子，加重血管病變，導致受檢者免疫系統損傷[26]。本研究結果顯示，研究組Th17水平高于對照組，感染組Th17水平高于未感染組，差異有統計學意義；多因素Logistic回歸分析結果顯示，Th17水平升高為影響肝移植術后感染的獨立危險因素。說明Th17與肝移植術后感染密切相關，肝移植術后感染患者Th17水平升高，但關于其具體機制現尚未明確，還需進一步深入研究。

此外，本研究ROC曲線分析結果顯示，PCT、TNF-α、Th17及3項聯合檢測對肝移植術后感染預測價值的曲線下面積分別為0.789、0.777、0.729和0.912，其中以PCT、TNF-α和Th17 3項聯合檢測的曲線下面積最大。提示臨床可通過PCT、TNF-α和Th17 3項聯合檢測提高對肝移植術后感染的預測價值。

綜上所述，PCT、TNF-α和Th17在肝移植術后和肝移植術后感染患者中呈異常狀態。術后長期使用抗菌藥物、深靜脈導管留置時間≥9 d和PCT、TNF-α、Th17水平升高為影響肝移植術后感染的獨立危險因素。PCT、TNF-α和Th17 3項聯合檢測對肝移植術后感染有一定預測價值。