化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、金標(biāo)法檢測乙型肝炎病毒表面抗原比較分析

計(jì)渝蜀

云南省澄江市人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，云南澄江 652500

乙型肝炎病毒屬于多發(fā)性傳染性疾病，主要由乙型肝炎病毒感染引發(fā)， 肝臟病變?yōu)橹饕R床表現(xiàn)，可導(dǎo)致引發(fā)多器官及組織功能受損， 若不進(jìn)行有效干預(yù)，病情可進(jìn)展為肝硬化甚至肝癌，嚴(yán)重影響患者預(yù)后并危及其生命安全。 此外，由于該病具有傳染性等特點(diǎn)，具有傳播途徑廣、控制難度大等特點(diǎn)，已經(jīng)成為世界范圍內(nèi)的公共健康問題。 因此，為了提高乙肝感染控制效果并有效抑制病情進(jìn)展，對乙肝病毒進(jìn)行快速、有效的診斷極有必要。化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、金標(biāo)法等在乙型肝炎病毒表面抗原檢測中均有著一定的應(yīng)用價值[1]。 該次研究對比分析3 種檢測方法 HBsAg 檢測價值，并以 2018 年 5 月—2020 年 4月在該院進(jìn)行檢測的疑似乙型肝炎病毒患者211 例為研究對象，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇在該院進(jìn)行診療的疑似乙型肝炎病毒患者211 例。 男性 112 例、女性 99 例，年齡 24～89 歲，平均年齡（56.45±5.09）歲。 排除標(biāo)準(zhǔn)：合并黃疸、脂血癥或溶血癥者。該次研究患者、患者家屬知情同意，醫(yī)院倫理委員會批準(zhǔn)通過。

1.2 方法

為所有研究對象實(shí)施化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、金標(biāo)法檢測，清晨空腹?fàn)顟B(tài)下抽取靜脈血5 mL并應(yīng)用離心機(jī)離心，離心速度為3 000 r/min，離心5～10 min，然后分別應(yīng)用不同檢測方法檢測血清標(biāo)本。

1.2.1 化學(xué)發(fā)光法 應(yīng)用全自動化學(xué)發(fā)光免疫分析儀（雅培Abbott i 2000SR） 進(jìn)行乙肝五項(xiàng)血清標(biāo)志物檢測，陽性參考標(biāo)準(zhǔn)如下：乙型肝炎病毒核心抗體（HB-cAb）＞0.9 PEIU/mL、乙型肝炎表面抗體（HBsAb）＞5 ng/mL、乙型肝炎 E 抗原（HBeAg）＞0.5 PEIU/mL、乙型肝炎 E 抗體（HBeAb）＞0.2 PEIU/mL、HBsAg＞0.2 ng/mL。

1.2.2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn) 應(yīng)用雙抗體夾心法原理進(jìn)行HBsAg 檢測，嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行各項(xiàng)操作，所用儀器設(shè)備包括酶聯(lián)免疫檢測儀（匯松MB-580）及洗板機(jī)，酶聯(lián)免疫試劑盒（產(chǎn)自珠海麗珠試劑股份有限公司）。

1.2.3 金標(biāo)法 應(yīng)用層析試紙條 （產(chǎn)自英科新創(chuàng) （廈門）科技股份有限公司）進(jìn)行HBsAg 檢測。

1.3 觀察指標(biāo)

①對比化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、金標(biāo)法3 種方法檢測陽性率及陰性率；②以病理診斷為金標(biāo)準(zhǔn)，對比化學(xué)發(fā)光法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)、金標(biāo)法檢測準(zhǔn)確度、靈敏度、特異度及陰性預(yù)測值、陽性預(yù)測值。

1.4 統(tǒng)計(jì)方法

采用SPSS 22.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)，計(jì)數(shù)資料以頻數(shù)和百分率（%）表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)，應(yīng)用秩和檢驗(yàn)等級資料，P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 3 種方法檢測結(jié)果對比

金標(biāo)法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)及化學(xué)發(fā)光法陽性檢出率分別為40.76%、43.13%及44.55%， 陰性檢出率分別為59.24%、56.87%及55.45%，3 種檢測方式陽性檢出率及陰性檢出率對比， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 （P＞0.05）。

2.2 3 種方法檢測價值對比

金標(biāo)法檢測準(zhǔn)確度83.89%、 敏感度77.55%、特異度 89.38%、 陽性預(yù)測值 86.36%、 陰性預(yù)測值82.11%；酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測準(zhǔn)確度91.47%、敏感度88.78%、特異度93.81%、陽性預(yù)測值92.55%、陰性預(yù)測值90.60%； 化學(xué)發(fā)光法檢測準(zhǔn)確度96.21%、敏感度96.94%、特異度96.46%、陽性預(yù)測值95.96%、陰性預(yù)測值97.32%。 酶聯(lián)免疫法檢測敏感度高于金標(biāo)法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），化學(xué)發(fā)光法檢測準(zhǔn)確度、敏感度及陰性預(yù)測值均高于金標(biāo)法，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測法與化學(xué)發(fā)光法檢測準(zhǔn)確度、敏感度等差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）， 但是化學(xué)發(fā)光法各項(xiàng)觀察指標(biāo)均略高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測法。 見表1、表2、表3。

表1 金標(biāo)法檢測價值分析

表2 酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測價值分析

表3 化學(xué)發(fā)光法檢測價值分析

3 討論

乙型肝炎為臨床多發(fā)性傳染性疾病，乙型肝炎病毒傳染率高，體液感染、性傳播、醫(yī)源性感染以及血液感染、母嬰傳播等均可成為傳播途徑，不但影響機(jī)體功能，還會引發(fā)肝硬化、肝癌等多種肝臟疾病，屬于嚴(yán)重的公共衛(wèi)生問題，必須引起足夠的重視[2]。

HBsAg 為乙肝患者血清中首個病毒標(biāo)志物，檢測HBsAg 能夠?yàn)榕R床進(jìn)行病情判斷提供非常重要的依據(jù)[3]。 部分乙肝感染患者血清HBsAg 水平較低，可能由于機(jī)體尚處于乙肝感染早期，體內(nèi)乙肝病毒復(fù)制在血中呈低水平表達(dá)[4]。此外，某些藥物也可能造成乙肝病毒基因發(fā)生突變，使得HBsAg 呈低水平表達(dá)，不同檢測方法檢測能力存在較大差異，因此檢測結(jié)果也存在較大的差異，容易導(dǎo)致誤診或者漏診，影響檢測準(zhǔn)確性，難以為臨床制定針對性病情控制方案提供準(zhǔn)確依據(jù)[5]。

金標(biāo)法具有操作迅速、簡單等特點(diǎn)，可進(jìn)行單份操作，無需應(yīng)用特殊設(shè)備，但是靈敏度相對較差且檢測成本相對較高，導(dǎo)致臨床應(yīng)用受限[6]。酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)具有可重復(fù)、特異度及靈敏度高等特點(diǎn)，在臨床上有著廣泛的應(yīng)用，而且成本相對較低，但是操作過程較為復(fù)雜，干擾因素較多，對操作人員的操作技術(shù)要求較高，加樣等環(huán)節(jié)容易引發(fā)誤差[7]。 此外，受外源性物質(zhì)以及內(nèi)源性物質(zhì)干擾等因素的影響，對檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度也會造成一定的影響[8]。 化學(xué)發(fā)光法為臨床進(jìn)行乙型肝炎標(biāo)志物檢測的金標(biāo)準(zhǔn)，為臨床常規(guī)用免疫分析方法，應(yīng)用快捷、安全、方便且具有可重復(fù)、抗干擾能力強(qiáng)、靈敏度高等特點(diǎn)[9]。但是該檢測方式具有成本高等特點(diǎn)， 基層單位推廣及應(yīng)用難度較大，無法作為常規(guī)檢測方式， 為HBsAg 弱陽性標(biāo)本實(shí)施化學(xué)發(fā)光法檢測能夠使檢測準(zhǔn)確率得到提高[10-11]。

該研究中，金標(biāo)法、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)及化學(xué)發(fā)光法檢測陽性率及陰性率差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，（P＞0.05）。酶聯(lián)免疫檢測敏感度88.78%、特異度93.81%；化學(xué)發(fā)光法檢測敏感度96.94%、 特異度96.46%；酶聯(lián)免疫法檢測敏感度高于金標(biāo)法，化學(xué)發(fā)光法檢測準(zhǔn)確度、敏感度及陰性預(yù)測值均高于金標(biāo)法，但是化學(xué)發(fā)光法各項(xiàng)觀察指標(biāo)均略高于酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)檢測法。 殷蓓琦等學(xué)者的相關(guān)研究[12]中，酶聯(lián)免疫法HBsAg 檢測特異度84%、敏感度80%，化學(xué)發(fā)光法檢測特異度96%、 敏感度96%， 膠體金法檢測特異度80%、敏感度72%，通過對比可知，化學(xué)發(fā)光法檢測特異度及靈敏度均高于其他兩種檢測方式，酶聯(lián)免疫法檢測特異度及靈敏度較膠體金法高，提示3 種檢測方式中化學(xué)發(fā)光法檢測價值最高，和該次結(jié)果一致。

綜上所述， 金標(biāo)法在HBsAg 檢測中的應(yīng)用價值相對較低，可作為初篩檢測方式，化學(xué)發(fā)光法檢測價值略高于酶聯(lián)免疫吸附法，為患者實(shí)施聯(lián)合檢測有助于使診斷準(zhǔn)確率獲得顯著提高，可有效降低假陽性及陽性率，為臨床及早發(fā)現(xiàn)病情并進(jìn)行采取針對性防控手段以及病情控制措施提供重要參考。