ITGAV在結直腸癌中的表達及臨床意義

曾兵，李錦宏，蔡燦鋒，辛海洋，曾軍

整合素是一種細胞黏附分子，屬于細胞膜蛋白 受體，參與調節細胞的黏附、遷移、增殖、凋亡等生物學行為。整合素αv（integrinαv，ITGAV）是其家族成員之一。該蛋白質經過翻譯后切割，產生與二硫鍵連接的重鏈和輕鏈，這些重鏈和輕鏈可與不同的β鏈結合形成不同的異二聚體，其中αv和β3的異二聚體是Vitronectin的受體，在調節細胞外基質和腫瘤微環境中發揮重要作用［1］。本研究旨在探討整合素ITGAV在結直腸癌中的表達及臨床意義。

1 資料與方法

1.1 一般資料

經倫理委員會批準，在患者知情同意的原則下收集廣州醫科大學附屬第六醫院2017年11月至2019年12月外科手術切除并經蘇木素-伊紅（HE）染色、組織病理檢查確診的91例結直腸癌組織和18例癌旁組織。其中男性50例，女性41例。年齡30～88歲，平均年齡（63.10±12.15）歲。美國腫瘤聯合委員會（AJCC）分期Ⅰ～Ⅱ期45例，Ⅲ～Ⅳ期46例。中位隨訪時間22個月。

1.2 ITGAV蛋白表達的檢測

采用免疫組織化學法檢測ITGAV蛋白的表達。一抗為兔抗人ITGAV單抗（1∶500），二抗為通用型二抗。采用免疫反應評分法（IRS）對ITGAV染色結果進行評估，以陽性細胞百分率和染色強度的乘積為IRS總分進行判斷。根據IRS評分將患者分為ITGAV低表達（IRS=0～4）和ITGAV高表達（IRS＞4）兩組。具體參考課題組已發表的文獻進行［2］。

1.3 ITGAV表達與結直腸癌生存預后的關系

從GEO數據庫和TCGA數據庫下載結直腸癌患者的RNA測序數據，其中GSE17536數據集共納入177例結直腸癌患者具有完整隨訪信息，TCGA數據集共納入619例結直腸癌患者具有完整隨訪信息。

1.4 統計學方法

應用SPSS 25.0統計軟件進行分析。計數資料以頻數和率表示，組間比較采用卡方檢驗。等級資料采用非參數檢驗。采用Kaplan-Meier法進行生存分析，Log-rank法進行顯著性檢驗。以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 ITGAV在結直腸癌組織中的表達及定位

ITGAV蛋白主要表達于細胞膜，呈棕黃色至棕褐色著色。91例癌組織均有陽性表達，其中強陽性35例（38.5%），中度陽性26例（28.5%），弱陽性30例（33.0%）。18例癌旁組織中有16例陽性表達，中度陽性3例（16.7%），弱陽性13例（72.2%），2例陰性表達（11.1%）。兩組比較差異有統計學意義，P＜0.05。根據IRS評分將ITGAV在結直腸癌中的表達分為低表達和高表達組，其中高表達組61例，低表達組30例。

2.2 ITGAV的表達與臨床病理因素的關系

ITGAV高表達組中脈管和神經侵犯33例（54.1%），顯著多于低表達組7例（23.3%），P＜0.05；高表達組浸潤深度為T3～T4 57例（93.4%），顯著多于低表達組23例（76.7%），P＜0.05；高表達組淋巴結轉移35例（57.4%），顯著多于低表達組8例（26.7%），P＜0.05；高表達組TNM分期Ⅲ～Ⅳ期37例（0.7%），顯著多于低表達組9例（30.0%），P＜0.05；高表達組遠處轉移12例（19.7%），顯著多于低表達組1例（3.3%），P＜0.05。ITGAV的表達與性別、年齡、腫瘤部位、腫瘤大小及分化程度無明顯相關（P＞0.05）。詳見表1。

2.3 ITGAV與結直腸癌生存預后的關系

GSE17536數據集中結直腸癌177例，ITGAV高表達組85例，低表達組92例。生存分析顯示高表達組患者總生存率顯著低于低表達組，風險比（HR）=2.20，95%置信區間（CI）：1.384～3.481，P=0.0024。TCGA數據庫中結直腸癌619例，高表達組211例，低表達組408例，高表達組患者總生存率顯著低于低表達組，風險比（HR）=1.74，95%置信區間（CI）：1.187～2.536，P=0.002。

3 討論

結直腸癌是最常見的惡性腫瘤之一，2020年我國結直腸癌新發病例約56萬，發病率位居全部惡性腫瘤的第2位；死亡病例約29萬，死亡率位居全部惡性腫瘤的第5位［3］。對于中晚期患者，盡管治療方案不斷優化，其預后仍然不理想，主要原因是腫瘤發生侵襲和轉移。因此目前對于探索結直腸癌侵襲和轉移的分子機制尤為重要。整合素是細胞外基質的主要受體，通過介導細胞與細胞、細胞與細胞外基質之間的黏附，從而調控細胞的生物學行為。整合素在腫瘤細胞中過度表達會激活某些信號通路，促進原發灶癌組織中腫瘤細胞失去細胞之間的黏附發生轉移［4］。最近研究顯示，腫瘤的轉移有賴于轉移前微環境的形成，整合素在其中扮演著重要角色，并且參與了特定器官的遠處轉移［5］。

圖2 ITGAV與結直腸癌生存率的關系

ITGAV作為整合素家族的一員，有文獻報道其與惡性腫瘤的進展密切相關。Loeser等［6］發現ITGAV在食管腺癌中高表達，在非新輔助治療患者中，ITGAV的表達與淋巴結轉移、TNM臨床分期和不良預后顯著相關。李鋒等［7］報道ITGAV在喉鱗癌組織中的表達明顯高于正常組織，并且與淋巴結轉移和血管生成顯著相關。本研究結果顯示，ITGAV在結直腸癌組織中的表達顯著高于癌旁組織，差異有統計學意義，與Chen等研究報道結果一致［8］。臨床病理因素方面，本研究發現IGTAV高表達與脈管神經侵犯、浸潤深度、淋巴結轉移以及TNM分期顯著相關，提示ITGAV的高表達與結直腸癌的侵襲、轉移密切相關。Waisberg等［9］檢測了ITGAV等細胞外基質相關基因mRNA的表達，發現ITGAV高表達與神經侵犯有關，與本研究蛋白表達水平研究結果一致。此外在結直腸癌中，研究還發現miR-217-5p可通過調控PRKCI，BAG3，ITGAV及MAPK1基因的表達促進腫瘤細胞凋亡［10］。本研究納入的結直腸癌患者術后中位隨訪時間為22個月，隨訪時間較短，暫未能進行3年或者5年總生存分析。通過GEO和TCGA數據庫有關結直腸癌ITGAV的表達及臨床隨訪數據進行生存分析，結果顯示ITGAV高表達組患者總生存率顯著低于低表達組，提示ITGAV高表達與結直腸癌預后不良相關。

綜上所述，ITGAV在結直腸癌中高表達與脈管神經侵犯、浸潤深度、淋巴結轉移、遠處轉移等臨床病理因素以及不良預后相關，可能參與了結直腸癌的侵襲轉移，有望成為結直腸癌新的治療靶點。