血p-Tau181、Aβ1-42與老年阿爾茨海默病病人認知關(guān)系的研究

尹倩然 郝敬波 盧海龍 呂麗麗 周曉兵 楊榮禮

作者單位：221000 江蘇省徐州市，徐州醫(yī)科大學附屬醫(yī)院老年科

AD是老年人癡呆的主要種類。癡呆的治療目前尚無特效藥物，早發(fā)現(xiàn)、早干預從而減慢癡呆進程具有重要臨床意義。研究表明，AD病人腦脊液中磷酸化Tau181(p-Tau181)；β淀粉樣蛋白1-42(Aβ1-42)水平明顯高于正常病人，且上述2項指標的水平可以用來區(qū)分AD和其他形式的癡呆[1-2]。但是，腦脊液檢查是一種有創(chuàng)檢查，大多數(shù)病人不愿意配合。本研究旨在分析血漿中p-Tau181、Aβ1-42濃度和AD病人認知之間的關(guān)系，供臨床參考，報道如下。

1 資料與方法

1.1 病例資料 選取2019年1月至2020年1月在徐州醫(yī)科大學附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科和老年科住院的≥60歲老年病人123例，分為3組。無AD且無輕度認知功能障礙(MCI)的病人(對照組)33例，男20例，女13例，平均年齡(72.27±6.80)歲；AD組45例，男30例，女15例，平均年齡(74.51±9.82)歲；MCI組45例，男31例，女14例，平均年齡(71.17±10.89)歲。3組病人性別、年齡、教育程度等一般資料比較差異無統(tǒng)計學意義 (P>0．05)。見表1。本研究已通過醫(yī)院倫理委員會審查。

1.2 納入標準 (1)所有病人年齡均>60歲。(2)AD組符合美國國立神經(jīng)語言障礙卒中研究所和AD及相關(guān)疾病學會 (NINCDS-ADRDA)制定的AD診斷標準。均已完善頭顱CT或MRI及神經(jīng)影像學檢查。(3)MCI病人：根據(jù)2006年歐洲阿爾茨海默病協(xié)會制定的MCI定義，結(jié)合MMSE量表，且病人Hachinski缺血評分<4分。(4)正常組均無神經(jīng)精神疾病病史，無癡呆及中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病表現(xiàn)，常規(guī)實驗室檢查均處于正常范圍，并經(jīng)MMSE量表和臨床癡呆評定量表(CDR)證實。

1.3 排除標準 (1)嚴重的心肺疾??；(2)惡性腫瘤；(3)腦血管病、帕金森病、正常顱壓腦積水、腦瘤、脫髓鞘疾病、精神疾病等、糖尿病控制不良(HbA1c>8.0)、心肌梗死(過去6個月內(nèi));(4)老年抑郁量表(GDS-S)>9分或改良Rankin量表(GRS)>3分。

1.4 方法

1.4.1 試驗方法：所有分組病人進行MMSE量表及CDR量表評估。所有病人采用有惰性分離膠或促凝劑的黃蓋采血管采集血液，抽血后放置15 min使之凝固，再離心分離血清，4 ℃保持待測。采用全自動酶標儀(帝肯奧地利有限責任公司)，ELISA法測定p-Tau181、Aβ1-42的含量，試劑盒由深圳市安群生物工程有限公司提供。以校準品濃度取對數(shù)作橫坐標，OD值取對數(shù)作縱坐標，進行直線擬合，繪制標準曲線。通過待測樣本的 OD值在標準曲線上查出其對應(yīng)濃度值。

1.4.2 觀察指標：記錄3組病人的MMSE和CDR評分，并檢測3組病人血漿p-Tau181、Aβ1-42水平。

2 結(jié)果

2.1 各組觀察指標比較 MCI組和AD組CDR評分明顯高于對照組，MMSE評分顯著低于對照組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。AD組及MCI組血漿p-Tau181和Aβ1-42水平明顯高于對照組，且AD 組上述指標水平高于MCI組，差異均有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 3組一般資料及檢測結(jié)果比較

2.2 血漿生物標記物濃度與MMSE評分之間的關(guān)系 血漿p-Tau181和Aβ1-42與MMSE評分之間均呈顯著負相關(guān)(r=-0.898，-0.523，P均<0.01)。

3 討論

我國作為人口大國，老年人在我國人口占比中越來越大，作為發(fā)病率較高的老年癡呆，給社會和家庭都帶來了經(jīng)濟和照顧的壓力。很多老年癡呆患者發(fā)病過程比較隱匿，癥狀不典型，診斷比較困難。發(fā)現(xiàn)把癡呆血漿生物標志物檢測作為老年癡呆的篩查手段具有重要意義。

我們研究發(fā)現(xiàn)血漿Aβ1-42水平與老年病人認知障礙的嚴重程度呈顯著負相關(guān)。本研究結(jié)果表明，血漿水平Aβ1-42能有助于確定認知損害的嚴重程度。大腦中的淀粉樣斑塊是AD的病理特征之一，血漿中的Aβ1-42水平可用于評估大腦中淀粉樣斑塊的形成[3-4]。PET顯示，血漿Aβ1-42水平與額葉、頂葉、顳葉和丘腦前葉的淀粉樣斑塊面積中度相關(guān)[5]。Aβ的高積累會增加大腦的毒性，并可能導致嚴重的認知障礙或下降[6]。有部分研究者發(fā)現(xiàn)AD組MMSE評分與總Aβ水平之間的相關(guān)性[7]，還有一些研究已經(jīng)通過IMR檢測方法對MCI及AD病人的血漿生物標記物進行了探索，并得出結(jié)論：血漿Aβ1-42是一種有用的AD生物標記物[8]，這些發(fā)現(xiàn)與我們的發(fā)現(xiàn)相同。但是有部分研究發(fā)現(xiàn)，Aβ1-42只是與AD有一定負相關(guān)趨勢，不是有用的AD生物學標記物[9]，可能是使用不同的生物分析方法試劑，或者是不同Aβ聚集或Aβ與其他蛋白質(zhì)結(jié)合的分析能力，導致了研究結(jié)果之間的差異。

在本研究中，老年AD病人血漿p-Tau181水平較正常病人升高，并且與MMSE評分呈現(xiàn)顯著負相關(guān)。Tau蛋白纏結(jié)在大腦中的積聚是AD另外一個病理特征，t-Tau主要起穩(wěn)定軸突微管的作用。在AD病人中，Tau蛋白在腦中大量表達，導致腦脊液和血漿中t-Tau濃度的變化。這種變化通常伴隨著神經(jīng)損傷和疾病后期的腦萎縮[10]。研究表明，灰質(zhì)、海馬和杏仁核體積的減少有助于t-Tau血漿水平的升高。腦萎縮與認知功能障礙有關(guān)，因此血漿t-Tau濃度隨著認知能力下降的進展而增加。生物學上，Tau蛋白的高磷酸化可直接導致AD病人的神經(jīng)元或軸突死亡，因此，p-Tau也被認為是AD早期檢測的潛在生物標記物[11]。研究表明AD病人腦脊液中p-Tau水平明顯高于正常病人。腦脊液中p-Tau的水平也可以用來區(qū)分AD和其他形式的癡呆[1-2]。測定腦脊液中p-Tau水平可提高AD診斷的敏感性和特異性，提高診斷的準確性。此外，最近的發(fā)展促進了對血液樣本中p-Tau水平的評估，表明血漿p-Tau水平可用于監(jiān)測AD病人的神經(jīng)變性。事實上，一項研究指出，p-Tau181水平可用于早期AD病人疾病嚴重程度的分類[11]。

我們的結(jié)果支持這樣的觀點：血漿中的生物標記物水平p-Tau181和Aβ1-42蛋白的組合可用于區(qū)分AD的前驅(qū)期和癡呆期，血漿p-Tau181、Aβ1-42水平可用于分析早期AD病人的嚴重程度。

總之，MCI和AD病人的血漿p-Tau181、Aβ1-42與MMSE評分相關(guān)。血漿p-Tau181、Aβ1-42水平可用于評估老年MCI及AD病人認知障礙的嚴重程度及其變化。本研究局限于有認知測試結(jié)果的臨床病人，我們沒有獲得腦脊液樣本或淀粉樣蛋白或Tau-PET掃描，以研究認知變化與其他生物標記物(如腦脊液標記物和成像)之間的相關(guān)性，下一步加強這方面研究。