馬拉色菌感染對尋常型銀屑病患者血清SP、Th1/Th2有關因子的影響及與病情關聯性

曾令斌 陸捷潔 吳偉偉 韓秋月 王愛民

[摘要]目的：探討馬拉色菌感染對尋常型銀屑病（Psoriasis vulgaris，PV）患者血清P物質（Substance P，SP）、Th1/Th2有關因子的影響及與病情關聯性。方法：選取2017年4月-2019年10月筆者科室就診的62例馬拉色菌感染PV患者為感染組，同期62例未感染馬拉色菌PV患者為未感染組。對比兩組患者一般資料、血清SP、Th1/Th2有關因子[白細胞介素-10（Interleukin-10，IL-10）、白細胞介素-4（Interleukin-4，IL-4）、白細胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）、干擾素-γ（Interferon-γ，INF-γ）、腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）]水平，Spearman相關系數分析馬拉色菌感染與患者血清SP、Th1/Th2有關因子表達的關聯性，并比較不同馬拉色菌密度感染患者病情程度，分析馬拉色菌密度與病情程度的相關性。結果：感染組血清SP、Th2有關因子水平高于未感染組，血清Th1有關因子水平低于未感染組（P<0.05）;感染組病情程度為重度患者馬拉色菌密度顯著高于中度、輕度患者（P<0.05）;血清SP、Th2有關因子水平與馬拉色菌感染呈正相關，血清Th1因子水平與馬拉色菌感染呈負相關，馬拉色菌密度與感染組患者病情程度呈正相關（P<0.05）。結論：馬拉色菌感染PV患者存在血清SP、Th1/Th2有關因子異常波動情況，其機制可能是馬拉色菌感染后引起的免疫異常，進一步增加馬拉色菌增殖活性，加重病情，臨床可根據上述因子表達情況制定治療方案。

[關鍵詞]馬拉色菌;尋常型銀屑病;P物質;Th1;Th2;白細胞介素-4;干擾素-γ

[中圖分類號]R758.63? ? [文獻標志碼]A? ? [文章編號]1008-6455（2021）07-0058-04

Effect of Malassezia Infection on Serum SP， Th1/Th2 Related Factors in Patients with Psoriasis Vulgaris and Its Correlation with the Disease

ZENG Ling-bin， LU Jie-jie， WU Wei-wei， HAN Qiu-yue， WANG Ai-min

[Department of Dermatology Ward 1， Hainan Provincial Dermatology Hospital （Hainan Provincial Center for Dermatology and Venereal Disease Control）， Haikou 570000， Hainan，China]

Abstract： Objective? To investigate the effect of Malassezia infection on substance P （SP） and Th1/Th2 related factors in patients with psoriasis vulgaris （PV） and their relationship with disease. Methods? From April 2017 to October 2019， 62 patients with PV infected with Malassezia in our hospital were selected as the infection group， and 62 patients without PV infected with Malassezia were selected as the uninfected group in the same period.Compare the general information of two groups， serum SP， Th1/Th2 related factors [Interleukin-10 （IL-10）， Interleukin-4 （IL-4）， Interleukin-2 （IL-2）， Interferon-γ （INF-γ）， Tumor necrosis factor-α （TNF-α）] levels of the two groups.Spearman correlation coefficient analysis of the correlation between Malassezia infection and the expression of SP， Th1/Th2 related factors in patients' serum，the disease severity of patients with different Malassezia density infections was compared， and the correlation between the density of Malassezia bacteria and the disease severity was analyzed. Results? The levels of serum SP and Th2 related factors in the infected group were higher than those in the uninfected group， and the levels of serum Th1 related factors were lower in the uninfected group （P<0.05）.The severity of the infection group was that the density of malassezia in severe patients was significantly higher than that of moderate and mild patients （P<0.05）.The levels of serum SP and Th2 related factors were positively correlated with Malassezia infection， the serum Th1 factor levels were negatively correlated with Malassezia infection， and the density of Malassezia bacteria was positively correlated with the disease severity of patients in the infection group （P<0.05）. Conclusion? The abnormal fluctuations of serum SP and Th1/Th2 related factors in patients with PV infected by Malassezia may be caused by the immune abnormality after Malassezia infection，it may further increase the proliferation activity of Malassezia and aggravate the disease，clinical treatment can be formulated according to the expression of the above factors.

Key words： malassezia; psoriasis vulgaris; substance P; Th1; Th2; Interleukin-4; Interferon-γ

目前，尋常型銀屑病（Psoriasis vulgaris，PV）發病機制尚未明確，有研究認為，可能與多種炎性因子大量聚集在組織皮損處誘發局部炎癥、免疫損害有關[1-2]。此外，還有研究顯示，真菌可作為超抗原或交叉抗原介導PV發生、發展過程，常見真菌為馬拉色菌[3]。馬拉色菌是寄生在正常人體皮膚的一種嗜脂性酵母菌，若宿主皮膚微環境異常改變或防御功能減弱，馬拉色菌可大量繁殖并誘發多種皮膚疾病，其致病機制源自菌體分解細胞脂質引起細胞形態學改變、凋亡，且可通過影響機體Th細胞亞群分化誘發免疫損害，加重皮膚疾病[4-5]。本研究通過探究馬拉色菌感染對PV患者血清P物質（Substance P，SP）、Th1/Th2有關因子的影響及與病情關聯性，旨在為臨床病情評估、完善治療方案提供參考。現報道如下。

1? 資料和方法

1.1 一般資料：選取2017年4月-2019年10月筆者醫院就診的62例馬拉色菌感染PV患者為感染組，同期62例未感染馬拉色菌PV患者為未感染組。納入標準：①符合PV診斷標準[6];②經真菌鏡檢明確是否存在馬拉色菌感染，感染組馬拉色菌密度“+”及以上;③患者知情研究并簽署同意書。排除標準：①近2個月內接受相關治療者;②伴嚴重營養不良者;③伴惡性腫瘤或其他系統性疾病者;④伴其他皮膚疾病者。本研究經筆者醫院醫學倫理委員會審批通過。

1.2 方法：兩組均檢測血清SP、Th1/Th2有關因子水平。

1.2.1 血清SP檢測：以真空非抗凝管采集空腹肘靜脈血2ml，離心15min（半徑8cm，轉速3 000r/min），取血清，置液氮保存，待測。武漢默沙克生物科技有限公司化學發光免疫分析法試劑盒測SP水平。

1.2.2 同法檢測血清SP、Th1/Th2有關因子[白細胞介素-10（Interleukin-10，IL-10）、白細胞介素-4（Interleukin-4，IL-4）、白細胞介素-2（Interleukin-2，IL-2）、干擾素-γ（Interferon-γ，INF-γ）、腫瘤壞死因子-α（Tumor necrosis factor-α，TNF-α）]水平。操作步驟同血清SP檢測，均由資深專科醫師參考試劑盒說明書規范完成。

1.3 觀察指標：①對比兩組一般資料，采取自制一般資料調查問卷，包括年齡、性別、體質量、病程、合并癥、疾病分期、病情程度、銀屑病皮損面積和嚴重程度指數（PASI）。PASI評分：重度PASI評分>12分;中度PASI評分6～11分;輕度PASI評分<6分;②對比兩組血清SP、Th1/Th2有關因子（IL-10、IL-4、IL-2、INF-γ、TNF-α）水平;③分析馬拉色菌感染與患者血清SP、Th1/Th2有關因子表達關系;④對比不同病情程度患者馬拉色菌密度。馬拉色菌密度檢測：用1cm寬透明膠帶在皮損處取材，以相同力度將膠帶緊貼皮膚5s，此后將膠帶均勻貼附于滴有真菌熒光染色液的載玻片上，熒光顯微鏡（日本奧林巴斯BX51TF）觀察馬拉色菌，計數，于孢子密集區讀取5個高倍鏡視野菌量，取均數，≤5個記“-”;6～15個記“+”;16～30個記“++”;>30個記“+++”;⑤分析馬拉色菌密度與患者病情程度相關性。

1.4 統計學分析：采用SPSS 22.0統計分析軟件，計數資料以率表示，兩組間比較采用χ2檢驗;相關性以Spearman分析，符合正態分布的計量資料以（x?±s）表示，兩組間比較采用t檢驗。P<0.05為差異有統計學意義。

2? 結果

2.1 兩組一般資料：兩組年齡、體質量、病程、性別、合并癥及疾病分期相比，差異無統計學意義（P>0.05）;感染組病情程度、PASI評分高于未感染組（P<0.05）

2.2 兩組血清SP、Th1/Th2有關因子水平：感染組血清SP、Th2有關因子水平高于未感染組，血清Th1有關因子水平低于未感染組（P<0.05）。

2.3 馬拉色菌感染與患者血清SP、Th1/Th2有關因子表達關系：Spearman相關性分析，血清SP、Th2有關因子水平與馬拉色菌感染呈正相關，血清Th1因子水平與馬拉色菌感染呈負相關（P<0.05）。

2.4 不同病情程度患者馬拉色菌密度：感染組重度患者馬拉色菌密度顯著高于中度、輕度患者（P<0.05）

2.5 馬拉色菌密度與患者病情程度相關性：經Spearman相關性分析顯示，馬拉色菌密度與感染組患者病情程度呈正相關（r=0.578，P<0.001）。

3? 討論

PV是臨床常見易復發性皮膚疾病，幾乎不可治愈，發病機制尚未明確，可能與感染、免疫等多種因素有關[7-8]。近年研究顯示，T細胞介導自身免疫異常與PV發病、發展關系密切[9]。

3.1 馬拉色菌感染與機體免疫關系：微生物感染是機體免疫異常的重要誘因，正常寄生真菌誘導PV逐漸引起臨床重視[10]。研究發現，急性發作期PV患者普遍存在馬拉色菌特異性抗體陽性情況[11]。本研究結果顯示，馬拉色菌感染患者病情程度、PASI評分高于未感染患者（P<0.05）。基于上述研究推測，馬拉色菌感染可能通過介導免疫損害加重PV患者易感性。馬拉色菌入侵機體初期可通過刺激非特異性免疫細胞生成細胞因子激活Th細胞增殖、分化，造成Th1/Th2平衡紊亂，繼而影響機體免疫功能[12-13]。本研究發現，PV患者普遍存在血清Th1、Th2有關因子異常表達情況，且感染組波動更顯著（P<0.05）。Th1主要介導細胞免疫，所生成細胞因子包括TNF-α、INF-γ、IL-2等。INF-γ是體內具有雙向調節功能的重要免疫調節因子，可抵御真菌、細菌及病毒感染，抑制腫瘤細胞生成[14];IL-2為趨化因子家族成員，由活化T細胞生成，能刺激活化免疫細胞，增強機體抗微生物感染能力[15]。Th2所分泌IL-10、IL-4細胞因子，負責介導機體體液免疫過程，能下調抗原遞呈細胞、Th1細胞活性[16]。IL-10是同型二聚體細胞因子之一，功能主要體現在抑制Th1細胞活性、抗炎等方面，同時能阻斷IFN-γ、TNF-α分泌過程;IL-4在適應性及體液免疫中扮演關鍵角色。正常情況，Th1/Th2處于動態平衡，一旦平衡打破，則表現機體免疫紊亂。所構建豚鼠馬拉色菌感染模型中IL-10、IL-4表達顯著降低，TNF-α、INF-γ、IL-2表達顯著升高，說明馬拉色菌定植感染可導致機體產生系統性免疫反應[17]。本研究結果顯示，感染組血清Th2有關因子水平高于未感染組，血清Th1有關因子水平低于未感染組，且表達水平與馬拉色菌感染關系密切（P<0.05）。分析大面積或嚴重馬拉色菌感染可降低皮膚屏障功能及防御能力，不僅表現于局部皮膚，且能通過介導角質層損害、脂質分解作用下誘導Th1/Th2漂移。

3.2 馬拉色菌感染與血清SP關系：SP是一種神經肽，能通過刺激角質生成、促進細胞增殖等過程，調節機體免疫反應、誘發皮膚瘙癢，PV患者臨床體征、癥狀均與炎癥因子大量聚集有關，本研究已證實，且部分患者自覺不同程度瘙癢。國外有研究顯示，PV患者外周血及皮損組織中SP含量顯著升高[18]。本研究顯示，感染組血清SP高于未感染組（P<0.05），說明馬拉色菌感染可進一步誘導SP表達。分析機制可能是馬拉色菌感染侵害下含SP神經被破壞，外周血釋放增加，引起Koebner現象;機體防御性反應兒茶酚胺代謝紊亂，促使SP生成增加。本研究結果還顯示，馬拉色菌感染與患者血清SP表達呈正相關（P<0.05），說明馬拉色菌感染能進一步介導SP表達，與上述機制分析一致。

3.3 馬拉色菌感染與PV病情程度關系：本研究結果還顯示，隨馬拉色菌密度升高，PV患者病情呈加重趨勢（P<0.05）。吳紅梅等[19]研究指出，中重度女性患者面部馬拉色菌密度多于輕度患者，但軀干上部、男性軀干及面部馬拉色菌密度與病情程度無關。有研究顯示，重度PV患者頭頸部皮損區馬拉色菌密度是健康者、中輕度患者的2～5倍[20]。本研究進一步分析，馬拉色菌密度與感染組患者病情程度呈正相關（P<0.05）。與個別報道不一致，分析PV病情程度不僅取決于皮表馬拉色菌密度、皮損性質，還受入侵體內馬拉色菌量及各種細胞因子表達影響，需后期擴大樣本容量，多因素分析馬拉色菌密度與PV病情程度的關系。

綜上可知，馬拉色菌感染PV患者存在血清SP、Th1/Th2有關因子異常波動情況，其機制可能是馬拉色菌感染后引起免疫異常，進一步增加馬拉色菌增殖活性，加重了病情，臨床可根據上述因子表達情況制定治療方案。

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[收稿日期]2020-04-26

本文引用格式：曾令斌，陸捷潔，吳偉偉，等.馬拉色菌感染對尋常型銀屑病患者血清SP、Th1/Th2有關因子的影響及與病情關聯性[J].中國美容醫學，2021，30（7）：58-61.