炎癥反應與子癇前期發病的關系

郭惠萍，沈麗丹

張家港市第一人民醫院產科，江蘇張家港215600

子癇前期是妊娠期婦女特有的一種綜合征，其發生率為3%～5%，以水腫、高血壓和蛋白尿為主要特征，對妊娠結局影響較大［1］。子癇前期在妊娠早期一般是由胎盤發育不良導致的，在妊娠中后期多是由系統性炎癥反應引起的［2］。已有研究證實，在子癇前期發生、發展過程中炎癥因子發揮了重要作用，C反應蛋白（CRP）、IL-6等炎癥因子與子癇前期的臨床表現密切相關［3］。本研究觀察了子癇前期孕婦血清CRP、IL-6水平以及胎盤組織炎癥細胞浸潤情況，并探討了炎癥反應與子癇前期發病的關系?，F報告如下。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2020年9月—2021年5月在張家港市第一人民醫院產科接受剖宮產分娩的子癇前期孕婦30例（觀察組），年齡18～35歲，BMI 25～32 kg/m2，孕周33～39周。所有孕婦符合《婦產科學》（第8版）中子癇前期的診斷標準［4］。排除合并急慢性感染、慢性高血壓、糖尿病、自身免疫性疾病者［5］以及早產或胎膜早破者。同期選擇在張家港市第一人民醫院產科接受剖宮產分娩的正常孕婦30例（對照組），年齡20～36歲，BMI 25～31 kg/m2，孕周34～38周。兩組年齡、BMI、孕周具有可比性。本研究經張家港市第一人民醫院醫學倫理委員會批準，所有研究對象知情同意并簽屬知情同意書。

1.2 血清CRP、IL-6檢測 所有研究對象剖宮產前，采集清晨空腹肘靜脈血10 mL，置于含枸櫞酸鈉的抗凝管中，3 000 r/min離心15 min，留取上層血清。采用免疫比濁法檢測血清CRP，采用化學發光法檢測血清IL-6。

1.3 胎盤組織病理學檢測 剖宮產后留取新鮮胎盤組織，避開胎盤出血區、鈣化區、壞死區，在靠近母體面和臍帶區各取一塊胎盤組織，體積約1 cm×1 cm×1 cm。10%甲醛固定過夜，常規石蠟包埋，4μm厚連續切片，HE染色，中性樹膠封固。顯微鏡下觀察胎盤組織中性粒細胞浸潤情況，并進行中性粒細胞計數。另取新鮮胎盤組織，采用ELISA法檢測中性粒細胞趨化因子IL-8、IL-1β。

1.4 子宮蛻膜組織CD14+、CD14+CD16+巨噬細胞檢測 取胎盤附著處子宮蛻膜組織，洗凈后剪碎，置于試管中，依次加入CD14-FITC、CD16-PE各10μL，再提取單個核細胞層懸液50μL，混勻后靜置30 min，加入PBS 400μL?；鞈液?，采用流式細胞儀檢測CD14+、CD14+CD16+巨噬細胞比例。

1.5 統計學方法 采用SPSS21.0統計軟件。符合正態分布的計量資料以±s表示，結果比較采用獨立樣本t檢驗。相關性分析采用Pearson直線相關分析法。P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組血清CRP、IL-6水平比較 觀察組與對照組血清CRP水平分別為（8.7±2.4）、（5.1±1.6）mg/L，血清IL-6水平分別為（2.9±0.9）、（1.1±0.3）pg/mL。觀察組血清CRP、IL-6水平均高于對照組（t分別為4.303、2.776，P均<0.05）。

2.2 兩組胎盤組織中性粒細胞浸潤情況以及相關因子水平比較 顯微鏡下觀察，觀察組滋養細胞增生，蛻膜細小動脈內膜纖維性增厚，管腔狹窄，管壁纖維樣壞死及炎癥浸潤，發生急性動脈粥樣變化，可見中性粒細胞、淋巴細胞浸潤以及胎盤出血性梗死。對照組滋養細胞正常，胎盤無出血性梗死。見圖1。兩組胎盤組織中性粒細胞計數及IL-1β、IL-8水平比較見表1。

圖1 兩組胎盤組織中病理變化（HE染色）

表1 兩組胎盤組織中性粒細胞計數及IL-1β、IL-8水平比較（±s）

表1 兩組胎盤組織中性粒細胞計數及IL-1β、IL-8水平比較（±s）

組別觀察組對照組tP n 30 30中性粒細胞計數（×109/L）7.39±2.18 6.67±1.49 3.746<0.01 IL-1β（pg/mL）0.160±0.004 0.100±0.003 7.692<0.01 IL-8（ng/mL）0.51±0.13 0.33±0.07 4.621<0.01

2.3 子癇前期孕婦血清炎癥因子與胎盤組織中性粒細胞浸潤的關系 Pearson直線相關分析顯示，子癇前期孕婦血清CRP、IL-6水平與胎盤組織中性粒細胞計數呈正相關關系（r分別為0.928、0.883，P均<0.01）。

2.4 兩組子宮蛻膜組織CD14+、CD14+CD16+巨噬細胞比例比較 觀察組與對照組子宮脫膜組織CD14+巨噬細胞比例分別為（35.49±5.59）%、（22.26±4.87）%，CD14+CD16+巨噬細胞比例分別為（8.84±3.76）%、（7.86±2.26）%。觀察組子宮脫膜組織CD14+巨噬細胞比例高于對照組（t=7.962，P<0.05），而兩組子宮脫膜組織CD14+CD16+巨噬細胞比例比較差異無統計學意義（t=-1.883，P>0.05）。

3 討論

子癇前期是妊娠期常見的并發癥之一［5］。目前，盡管增加了對孕婦產前并發癥的檢測和早期干預，子癇前期孕婦的病死率已經顯著降低，但子癇前期導致孕婦分娩后遺癥的發生率仍有增加趨勢［6］。研究表明，既往發生子癇前期孕婦未來發生腦血管疾病和癡呆的風險有所增加［7］。因此，加大對孕婦子癇前期的早期診斷和前期干預，最大限度地改善子癇前期孕婦癥狀，對最終改變孕婦和胎兒的臨床結局十分必要。合胞體是凋亡或活化的滋養細胞脫落的異源納米微囊泡，富含可溶性血管內皮生長因子受體1和內皮糖蛋白，在正常孕婦肺和血漿中的數量顯著增加。合胞體滋養細胞微囊泡和外泌體可引起炎癥反應［8］。體外研究顯示，合胞體滋養細胞微囊泡激活外周血單核細胞可導致促炎癥細胞因子釋放增多；當微囊泡暴露于孕婦外周血單核細胞時，促炎癥細胞因子釋放增多。從某種意義上來說，子癇前期是一種過度炎癥反應，誘發因素為抗炎癥細胞因子和促炎癥細胞因子失衡。研究表明，子癇前期的發生及其臨床表現與一些炎癥細胞因子水平變化密切相關［9］。CRP是固有免疫系統的重要組成成分，為非特異性抑炎因子。當機體發生感染時，受TNF-α、IL-6等炎癥因子刺激，血清CRP水平會在1～2天達到高峰；當感染消退時，血清CRP水平會降至正常［10］。研究發現，與正常孕婦相比，子癇前期孕婦血清IL-10、CRP水平顯著升高，證實子癇前期的發病有免疫反應的參與，其中炎癥細胞因子起到至關重要的作用。與非孕婦比較，孕晚期正常孕婦Th1細胞數量及Th1/Th2降低，而孕晚期子癇前期孕婦Th1細胞數量及Th1/Th2升高［11］。本研究結果顯示，子癇前期孕婦血清CRP、IL-6水平高于對照組，且胎盤組織炎癥細胞浸潤更明顯，表明炎癥因子IL-6、CRP在子癇前期的發病中扮演重要角色。

近年來，被確定為子癇前期檢測指標的血清標志物較多，如血漿胎盤蛋白13、可溶性酪氨酸激酶1、胎盤生長因子等，但這些標志物預測子癇前期的效能有待進一步驗證。中性粒細胞/單核細胞和淋巴細胞/單核細胞是反映全身炎癥反應程度和免疫平衡的有效指標，可用于多種疾病的早期診斷、預后評估和療效評價［12］。由于胎盤細胞（基質細胞和滋養細胞）過度產生的炎癥因子可以激活中性粒細胞和單核細胞，這兩種細胞的生物學功能具有多樣性，在子癇前期發病過程中其多樣性表現更為顯著［13］。本研究結果顯示，觀察組胎盤組織IL-1β、IL-8表達均高于對照組，表明炎癥因子IL-1β、IL-8亦參與子癇前期的發病過程。

在妊娠期間，母體先天性免疫系統顯著激活，主要體現在外周血單核細胞數量增加。巨噬細胞來源于血液中的單核細胞，并執行重要的免疫功能，如吞噬、抗原呈遞、細胞因子分泌以及免疫應答編配［14］。在妊娠期間，巨噬細胞調節滋養細胞凋亡，在著床、胎盤形成和分娩中發揮關鍵作用。然而，子癇前期孕婦的母胎界面巨噬細胞數量是否發生變化仍存在爭議。先兆子癇的特征是螺旋動脈生理轉化失敗和滋養層淺層浸潤、母體內皮細胞功能障礙和炎癥反應。有研究認為，巨噬細胞誘導的細胞凋亡限制了子癇前期孕婦血管內滋養細胞侵襲。母胎界面的蛻膜內巨噬細胞于母體對胎兒抗原的耐受性以及宿主對子宮內感染的防御都極為重要［15］。分娩與急性炎癥反應以及巨噬細胞向子宮內膜和子宮頸的流入和活化有關，結果表明這些細胞在整個妊娠和分娩過程中具有重要作用。單核細胞新的分類方法基于CD14、CD16表達［16-17］。本研究標記巨噬細胞采用CD14、CD16，觀察組子宮蛻膜組織CD14+巨噬細胞比例增多，呈現出單核細胞向巨噬細胞轉化，表明巨噬細胞能夠發揮促炎作用。既往研究表明，若巨噬細胞呈現CD16+，必然伴隨CD14+［18］。本研究觀察組子宮脫膜組織CD14+巨噬細胞比例高于對照組，但兩組子宮脫膜組織CD14+CD16+巨噬細胞比例比較差異無統計學意義，與以往研究［18］結果不符，其原因有待于進一步探索。

綜上所述，子癇前期孕婦血清CRP、IL-6水平以及胎盤組織中性粒細胞、巨噬細胞水平明顯升高；無論全身炎癥反應還是胎盤局部炎癥反應在子癇前期孕婦中普遍存在。因此，炎癥反應與子癇前期發病密切相關。