QuEChERS結合液相色譜-串聯質譜法快速測定雞肉中喹諾酮類殘留

呂警

摘要：采用QuEChERS方法提取和凈化雞肉樣品，建立測定8種獸藥殘留的液相色譜-串聯質譜（LC-MS/MS）檢測方法。樣品經乙腈和緩沖鹽包SBEQ-CA8802-B提取，提取液經凈化管凈化后取上清液，旋轉蒸發儀減壓蒸干，溶解過膜，在電噴霧離子源多反應監測（MRM）模式下進行測定，基質外標法定量。結果表明，8種喹諾酮類藥物的線性范圍為1～100μg/kg，線性相關系數r均大于0.996，定量檢出限為0.05～0.10μg/kg，10 ?g/kg添加范圍的平均回收率為89.7%～97.7%，相對標準偏差為3.87%～11.7%。該方法操作簡單、凈化效果好、靈敏度高，能夠快速有效地檢測雞肉中的喹諾酮藥物殘留。

關鍵詞：雞肉;喹諾酮殘留;液相色譜-串聯質譜法;外標法定量

喹諾酮類藥物又稱吡喹酮酸類化合物，具有良好的抗菌性，適用于家畜養殖行業。調查發現，在日常使用中，一些家畜易出現多種類型的不良反應，最嚴重的是胃腸道疾病。目前，檢測雞肉中喹諾酮類藥物最常見的方式是微生物法、酶聯免疫法和放射免疫法，最具有普遍應用價值的是液相色譜法和液相色譜-質譜聯用法。本文用QuEChERS結合液相色譜-串聯質譜法對雞肉中喹諾酮類殘留的檢測工作進行了詳細探究，為相關行業人士提供參考。

1. 材料與方法

1.1 試劑與儀器

Milli-Q 高純水;氧氟沙星;洛美沙星等;液相色譜-質譜聯用儀等。

1.2 樣品前處理

上述提取液按先后順序依次加入到凈化管中，渦旋混合5min，5000-10000r/min離心5min。取出凈化管中所有上清液，40℃減壓蒸發至近干。加入1mL甲醇-水溶液（1∶1）溶解，渦旋混合1min，過0.22?m濾膜，供液相色譜-質譜聯用儀測定。

1.3 儀器條件

1.3.1 液相色譜條件

沃特世ACQUITY UPLC BEH C18色譜柱（2.1mm×50mm，1.7μm），進樣量10μL，柱溫35℃，流速為0.3mL/min，流動相A為0.1%甲酸水溶液，B為甲醇。梯度洗脫程序見表1。

1.3.2 質譜條件

ESI離子源;正離子掃描;毛細管電壓3.2kV;離子源溫度110℃;去溶劑氣溫度400℃;去溶劑氣流量（氮氣）650L/h;氣簾氣流量50L/h;多重反應監測模式掃描（MRM）。

2. 結果與分析

2.1 質譜分析條件的優化

參與本次檢測活動的工作人員，前后開展了多次檢測流程，期間完全按照行業操作標準實時處理，最終獲取了8種喹諾酮類獸藥的最優質譜條件。具體見表2。

2.2 基質效應

雞肉的基質物質較復雜，對其進行質譜研究時，浸提物分組對電噴霧離子化效果和檢測信號有增強作用。相關工作人員在確定檢測樣品時，主要借助陰性部分，結合基質溶液配制標準，妥善做好標準溶液制定工作，減少或消除基質反應。

2.3 線性范圍與檢出限

由表3可知，在1-100μg/kg濃度范圍內，8種喹諾酮藥物呈良好的線性關系，相關系數r均大于0.996。以定量離子3倍的信噪比響應值對應的濃度為檢出限，10倍的信噪比響應值對應的濃度為定量限。

2.4 回收率與精密度

取雞肉空白基質配制的10?g/kg的混合標準溶液，重復進樣6次，計算回收率和標準相對偏差，結果見表4。8種喹諾酮藥物的回收率為89.7%-97.7%，相對標準偏差為3.87%-11.70%。

結論

本文將QuEChERS方法與液相色譜-串聯質譜聯用法相結合，測定雞肉中8種喹諾酮藥物殘留。與其他方法相比，該方法大大縮短了前處理周期，節約了檢測成本，而且這種方法操作簡便、快速、準確，可有效消除基質中蛋白質的干擾，提高了喹諾酮藥物測定的靈敏度、分析效率和確證能力等，不僅為喹諾酮類藥物的測定提供了技術支持，也適用于日常樣品的檢測分析。