外周血細胞免疫指標在帶狀皰疹患者中的檢測價值探析

曾廣旦

（深圳市寶安區寶安中醫院集團 檢驗科，廣東 深圳 518101）

0 引言

帶狀皰疹（herpes zoster,HZ）由水痘-帶狀皰疹病毒（varicella-zostervirus,VZV）引起，病毒進入脊髓后根神經節中，導致由該神經支配區皮膚出現皮疹、水皰等癥狀[1]。通常從皰液、痂皮等標本中病毒分離培養診斷結合臨床癥狀確診，診斷準確率高但耗時長、對設備及技術人員要求較高，具有一定局限性。對于不典型帶狀皰疹，如眼帶狀皰疹、帶狀皰疹腦膜炎需要依靠實驗室指標檢測。有研究表明免疫力低下的人群HZ 發病率較免疫功能正常人高[2]。本研究旨在探討外周血細胞免疫指標在HZ 患者中檢測價值，現報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2015 年6 月至2019 年12 月我院收治的60 例疑似HZ 患者臨床資料。根據病毒分離培養結果分為陽性組（n=32）和陰性組（n=28）。陽性組中，男18 例，女14 例；年齡26～65 歲，平均（45.28±9.17）歲；病程2～5d，平均（3.25±0.67）d；皰疹部位：頭面部2 例，頸部5 例，胸部10 例，腰部15 例。納入標準：符合HZ 診斷標準[4]；發病時間明確，發病后7d 內就診；未接受過抗病毒藥物治療。陰性組中，男17 例，女11 例；年齡27～66歲，平均（46.51±9.28）歲；病程2～6d，平均（3.37±0.71）d。納入標準：陽性組患者符合HZ相關診斷標準[3]；兩組患者均無風濕免疫性疾病史；檢測前尚未開展相關治療措施；檢測前均簽署知情同意書。兩組患者排除標準：合并有重大器官功能不全；配合度差；妊娠或哺乳期婦女。

1.2 檢測方法

所有患者入院后進行病毒分離培養，將受損皮膚面膜置于病毒運輸介質中，溫度為4℃，收集標本后于48h 內送檢后根據病毒生長狀況進行分組。兩組患者均于清晨空腹抽取外周靜脈血5mL 后加入肝素抗凝，應用流式細胞儀（美國Beckman-Coulter公司，型號：EPICS-XL Ⅱ型）分析，采集細胞數大于10000，采用Listmode 系統軟件分析數據，測定出外周血CD4+、CD8+及CD4+/CD8+占比。當3 項指標任意一項異常則診斷為HZ 陽性，當3 項指標檢測結果均為正常范圍則診斷為HZ 陰性。

1.3 統計學方法

采用軟件SPSS 20.0 進行數據處理，計量資料先實施Shapiro-Wilk 正態性檢驗，均確認近似服從正態分布，以平均數±標準差（）表示，組間比較行獨立樣本t檢驗，計數資料以[例(百分數)]形式表示，采用χ2檢驗，無特殊說明均以P<0.05代表差異有統計學意義；相關性分析采用Spearman相關性模型；采用統計學軟件Medcalc 18.2 將各血清學指標及聯合概率錄入，繪制對應受試者工作特征（ROC）曲線，讀取曲線下面積（AUC）、置信區間（95%CI）、靈敏度、特異度、截斷值等參數信息。

2 結果

2.1 外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較

陽性組外周血CD4+、CD4+/CD8+水平顯著低于陰性組（P<0.05）；陽性組外周血CD8+水平顯著高于陰性組（P<0.05），見表1。

表1 兩組患者外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平對比（）

表1 兩組患者外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平對比（）

2.2 檢測價值比較

如圖所示，外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平診斷HZ 的ROC 曲線所示，上述指標均有一定的診斷效能（AUC 均>0.5），Youden 指數對應cut-off 值分別為37.41%、25.20%、1.47。詳見圖1、表2。

圖1 各指標診斷HZ 的ROC 曲線

表2 ROC 曲線參數

2.3 外周血細胞免疫指標檢測效能

外周血細胞免疫指標診斷HZ 靈敏度為93.75%（30/32），特異度為67.56%（19/28），準確率為81.67%（49/60），陽性預測值為76.92%（30/39），陰性預測值為90.48%（19/21），Kappa 值為0.626，見表3。

表3 外周血細胞免疫指標檢測與病毒分離培養結果比較（例）

3 討論

HZ 受病毒感染后，常發于身體單側表現為聚集性水皰并且伴隨有神經痛。常規診斷HZ 采用病毒分離培養方法，培養需耗費一定的時間，HZ病情進展快，早期診斷并且及時進行藥物治療對于病情控制及預后恢復意義重大。因此，急需尋求一種及診斷效率及準確率高的檢測方法。

VZV 感染機體后會在神經元內潛伏一段時間后由相關因素誘發后導致機體免疫力下降進而激活VZV，損害末梢神導致相應皮膚部位病變[5]。T 淋巴細胞是機體細胞免疫系統中關鍵細胞群，能分泌功能各異的細胞因子，包括激活和促進炎癥反應因子和抑制類因子，CD4+為輔助性T 淋巴細胞，CD8+為抑制性T 淋巴細胞，兩者通過淋巴管、外周血和組織液進行循環，進而發揮細胞免疫調節等功能，在機體抗病毒中起重要作用[6]。HZ 患者T 淋巴細胞亞群CD4+指標比正常人低、CD8+指標水平高于正常人。有研究表明，外周血CD4+、CD8+水平異常患者感染HZ 風險較大[7-9]。對入組患者進行病毒分離培養，根據培養結果分為陽性組和陰性組，通過數據定量分析并繪制ROC 曲線，評價不同組別外周血細胞免疫指標表達水平，對比后發現陽性組外周血CD4+水平低于陰性組，CD8+指標水平高于陰性組。CD4+檢測ROC曲線AUC 為0.785，截斷值為37.41%，提示外周血CD4+對于診斷HZ 有一定效能，其水平小于37.41%時表明患者有較大概率患有HZ。CD8+診斷HZROC 曲線AUC 為0.778，其水平大于25.20%時提示患HZ 可能性較大。HZ 發病是細胞免疫狀態出現紊亂的結果，早期檢測患者外周血中CD4+、CD8+水平能夠反映患者細胞免疫功能狀態，有利于判定HZ 患者病情及預后，為綜合治療提供實驗依據。

正常狀態下機體內T 淋巴細胞相互作用共同調節機體免疫。當淋巴細胞壓群發生功能異常時，機體免疫系統產生紊亂，病毒更易侵入機體。當VZV感染潛伏于機體內能夠激活機體Th1 型細胞免疫反應，機體處于應激反應狀態并發生炎癥反應，從而抑制自身免疫功能，為潛伏于體內的病毒激活提供條件。CD4+/CD8+能夠有效反映機體免疫功能狀態[10]。本研究結果顯示，HZ 陽性組患者CD4+/CD8+比值較陰性組低，兩組比值檢測準確率和靈敏度均高于單項。ROC 曲線AUC 為0.880，截斷值為1.47，提示HZ 患者機體免疫系統紊亂更為明顯，當CD4+/CD8+值小于1.47 時高度懷疑患者患有HZ。CD4+/CD8+檢測靈敏度為100%，均高于CD4+檢測的82.14%CD8+檢測的60.71%，提示將兩種外周血免疫細胞指標比值進行檢測在鑒別HZ 中效果更為顯著[11-12]。本研究還發現，以“金標準”作為參考，采用外周血細胞免疫指標檢測診斷HZ 靈敏度為93.75%，特異度為67.56%，準確率為81.67%，Kappa 值為0.626，與病毒細菌分離培養結果呈現一致性較高。表明外周血細胞免疫指標可作為另一種診斷參考方式，相比于病毒細菌分離培養耗時長、對人員專業度要求高等缺點，具有簡便高效優點，為臨床診斷提供新思路。

綜上所述，外周血CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平在診斷HZ 中均具有較高診斷效能，能夠為臨床上及早確診病情提供重要依據，操作較為簡便，對后續治療方針制定具有重大意義。