氣相色譜質譜法測定土壤中苯醚甲環唑、氟環唑和戊菌唑微量殘留

米 莎

（核工業二〇三研究所，陜西 西安710000）

苯醚甲環唑、氟環唑和戊菌唑均為三唑類殺菌劑，其作用機理為影響甾醇類生物合成，使菌體細胞膜功能受到破壞，因具有高效、廣譜、持效期長等特點廣泛應用于果樹、蔬菜等農作物病害防治。苯醚甲環唑、氟環唑和戊菌唑等三唑類殺菌劑屬低毒殺菌劑，在農業施用過程中使用范圍較廣，但大部分農藥會散落到空氣、地表水和土壤等環境中。土壤中的三唑類殺菌劑殘留可通過農作物傳遞到人類，對人體健康造成一定的危害[1]。因此，加強對農作物種植土壤中苯醚甲環唑、氟環唑和戊菌唑等農藥殘留的分析具有一定的現實意義。

苯醚甲環唑、氟環唑和戊菌唑的分析方法一般有氣相色譜法、液相色譜法，液相色譜質譜法和氣相色譜質譜聯用法等，其中氣相色譜質譜聯用法對低含量的目標物定性定量相對比較準確，抗干擾能力較強[2-7]。本實驗采用快速溶劑萃取對土壤樣品進行前處理，通過氣相色譜質譜聯用法測定土壤中苯醚甲環唑、氟環唑和戊菌唑微量殘留，實驗結果準確可靠[8，9]。

1 實驗部分

1.1 儀器與試劑

7890A/5975C型氣相色譜質譜聯用儀（美國安捷倫）；Dionex ASE 300型加速溶劑萃取儀（賽默飛世爾科技公司）；M32型氮吹儀（北京萊伯泰科）；BSA-224型電子天平（德國賽多利斯）。

濃度均為100μg·mL-1的苯醚甲環唑、氟環唑、戊菌唑標準溶液，農業部環境保護科學研究所；丙酮、正己烷，農殘級，德國Merck公司；無水Na2SO4、硅藻土，分析純，上海國藥化學試劑公司。

1.2 儀器條件

色譜條件 載氣為高純He；HP-5MS毛細管色譜柱（30m×0.25mm×0.25μm）；柱流量1.5mL·min-1；進樣口溫度:230℃；不分流進樣，進樣量1μL。柱箱升溫程序：60℃保持1min后，以20℃·min-1升溫速率升到180℃，保持1min，再以15℃·min-1升溫速率升到280℃，保持5min。

質譜條件EI離子源；電離電壓70eV；接口溫度280℃；離子源溫度240℃；掃描方式為多反應監測（MRM）模式；溶劑延遲時間3.0min；3種化合物離子參數見表1。

表1 3種農藥質譜參數Tab.1 Mass spectrum parameters of three pesticides

1.3 溶液配制

以正己烷為稀釋溶劑，將100μg·mL-1的苯醚甲環唑、氟環唑、戊菌唑標準液配制成濃度均為10μg·mL-1的混合標準儲備溶液。移取儲備溶液適量，配制成苯醚甲環唑、氟環唑、戊菌唑質量濃度分別為10.0、30.0、50.0、100、150μg·L-1的標準曲線溶液。

1.4 樣品處理

按照GB17378.3和HJ/T166的要求采集、預處理和保存土壤樣品。稱取5g硅藻土放入萃取池中，再稱取10g土壤樣品和5g無水Na2SO4置研缽中研磨使其混合均勻，置于硅藻土上層。按加速溶劑萃取儀條件進行萃取，系統壓力10.5MPa，萃取溶劑為丙酮∶正己烷（1∶1）溶液，萃取溫度80℃，沖洗體積為萃取池體積60%，循環次數2次，吹掃時間60s，靜態提取時間5min，萃取液氮吹至近干。

用10mL丙酮∶正己烷（1∶1）分3次潤洗濃縮殘渣，潤洗液過經5.0mL丙酮∶正己烷（1∶9）溶液活化的弗羅里矽柱進行凈化。將收集的凈化液置于氮吹儀上氮吹至近干，用正己烷定容至1mL后待測。

2 結果與討論

2.1 萃取方法的選擇

農藥前處理方法的選擇在整個農藥殘留測試過程中至關重要。合適的前處理方式，可使方法獲得較高的準確性及靈敏度。當前農藥萃取主要有以下方法：液液萃取法、超聲萃取法、固相萃取法和加速溶劑萃取法等。液液萃取法需要人工振搖或超聲處理，人工振搖耗時長；超聲萃取操作簡單，但主要適用于含水量高的樣品，如蔬菜水果等；固相萃取需要人工操作，處理效率較低；加速溶劑萃取法運用自動萃取裝置，耗時短、溶劑使用量較少，可大批量處理樣品，且回收率較高。因此，本文選擇加速溶劑萃取法。

2.2 萃取條件的優化

萃取溫度是決定加速溶劑萃取效率的重要因素之一。在空白土壤樣品中加入一定量的苯醚甲環唑、氟環唑、戊菌唑標準液，設置萃取溫度為60、70、80和90℃，按1.4步驟進行前處理回收試驗，考察萃取溫度對萃取回收率的影響，結果見表2。

表2 不同萃取溫度所得回收率Tab.2 Recoveries at different extraction temperatures

由表2可知，萃取溫度為80~90℃時，3種化合物回收率在90%以上且變化不大。

在加速溶劑萃取過程中，萃取時間越長，目標物的萃取效率越高，但超過最佳萃取時間，萃取時間過長反而降低了檢測效率。本文將萃取時間設定為3，5和8min，考察3個時間點3種農藥的萃取效率。結果發現，隨著萃取時間的延長，萃取效率逐漸提高，然而萃取時間為5和8min時回收率變化不大。因此，本文萃取溫度選擇80℃，萃取時間為5min。

2.3 線性范圍及檢出限

按照1.2項下的儀器條件分別進樣1.3項下苯醚甲環唑、氟環唑、戊菌唑系列標準溶液各1μL，以質量濃度為橫坐標，色譜峰面積為縱坐標，繪制標準工作曲線。在空白土壤樣品中加入一定量的苯醚甲環唑、氟環唑、戊菌唑標準溶液，按1.4步驟進行前處理分析，以3倍信號噪聲比（S/N）計算檢出限。苯醚甲環唑、氟環唑、戊菌唑對應的標準曲線方程、相關系數及方法檢出限見表3，典型譜圖見圖1。

圖1 標準樣品質譜圖Fig.1 Mass spectrum of standard sample

表3 3種農藥的標準曲線方程、相關系數和檢出限Tab.3 Standard curve equation,correlation coefficient and detection limit of three pesticides

2.4 加標回收率與精密度測試

稱取不含農藥殘留的土壤樣品10g，加入一定量的苯醚甲環唑、氟環唑、戊菌唑標準液，配制低（10.0μg·L-1），中（40.0μg·L-1），高（100μg·L-1）3個濃度加標樣品，按本方法進行測定，進樣過程中3個濃度點的樣品各進樣6針，考察儀器的精密度測試結果，見表4。

表4 加標回收率與精密度結果（%）Tab.4 Results of standard addition recovery and precision

由表4可見，苯醚甲環唑、氟環唑、戊菌唑加標回收率均在91.0%～103.5%之間，精密度測試結果在1.89%～3.12%之間，符合農藥殘留測試的要求。

2.5 實際樣品的檢測

為驗證該方法的可行性，隨機采集本地區6處不同種植基地的土壤樣品，運用本文建立的方法進行分析測試。結果表明，其中有一批土壤樣品檢出苯醚甲環唑（0.004mg·kg-1），但在檢出限以內，其它2種農藥均未檢出。

3 結論

本文建立了加速溶劑萃取結合氣相色譜質譜法聯用技術檢測土壤中苯醚甲環唑、氟環唑、戊菌唑的測試方法，并對萃取方法及萃取的條件進行了討論。實驗結果表明，加速溶劑萃取法有機試劑使用量少，前處理自動化程度較高，檢測方法靈敏度高，重現性好，測定結果準確可靠，可用于土壤中醚甲環唑、氟環唑、戊菌唑等三唑類殺菌劑的痕量分析。