閆 華 ,付 麗,朱錫璇,張國軍,朱 黎
(1.國家蜂產業技術體系武漢綜合試驗站,湖北 武漢 430345;2.武漢市葆春蜂王漿有限責任公司,湖北 武漢 430345;3.湖北神農架林區農業執法支隊,湖北神農架442400;4.吉首大學,湖南 吉首 416000)
蜂王漿是由工蜂咽下腺和上顎腺分泌,用于哺育蜂王幼蟲和1~3 日齡的工蜂幼蟲的白色或淡黃色乳狀液體[1]。作為一種較高級的營養保健品,蜂王漿的成分復雜,水分為60%~70%,碳水化合物為10%~16%,蛋白質含量為12%~15%,脂類物質為3%~6.0%,小分子物質包括維生素、礦物質、游離氨基酸等為2%~3%[2]。
蜂王漿對人體有著很高的營養保健價值,能夠提高人體免疫力,對心血管疾病也有一定的作用,能夠預防衰老和阿爾茨海默癥,還有一定的美容功效等[3]。10- 羥基-ɑ- 癸烯酸(10-HDA)是蜂王漿中的標志性物質,約占蜂王漿總質量的1.4%~2.3%。由于10-HDA (王漿酸) 具有增強免疫力、降血脂、抗輻射等多重功效,近年來,它已成為衡量蜂王漿食用價值的重要指標[4]。長期的科學研究及實踐經驗證明,蜂王漿的品質與保健功效受王漿的儲存條件和儲存時間的影響[5-6]。因此本公司的蜂王漿對10-HDA 和蜂王漿儲存新鮮度有著很高的要求。 文章主要針對蜂王漿中的10-HDA 含量的變化進行檢測和跟蹤。
本實驗以武漢市葆春蜂王漿有限責任公司2016~2019 年蜂農送來的蜂王漿樣本為實驗材料。
液相色譜儀SeriesⅢ、吹風機RCY9212型、減壓干燥箱DZF-6020、超聲波清洗機SK3300H、電子天平AG135。實驗所用的主要實驗試劑見表1。

表1 本實驗所用的主要試劑
將蜂王漿樣品解凍至室溫后用玻璃棒攪勻,取約0.5 g,置于已稱定的50 mL容量瓶中,加入0.03 moL/L 鹽酸1 mL 和水2 mL,攪拌均勻后加入無水乙醇30 mL,邊加入邊輕輕搖動,再精密加入內標液10 mL(每毫升含內標物約0.65 mg),用無水乙醇稀釋至刻度,立即置超聲波浴中超聲15 min,在3 000 r/min 下離心10 min 后,放入4℃冰箱冷藏備用。
用4.6 mm×250 mm 的不銹鋼柱,填充無定形硅膠C18 鍵合相做色譜柱,檢測波長為210 nm,柱溫35℃,流速為1 mL/min。精密吸取濃度為0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mg/mL的10-HDA 標準溶液2 滋L 注入色譜儀,用峰面積比值計算應呈線性,求出校正因子F。吸取試樣溶液4 滋L注入色譜儀,按“內標法” 定量。
蜂王漿中10-HDA 計算公式如下:

式中:X2—— 蜂王漿中10-HDA 的含量,%;
F —— 校正因子;
Ai—— 試樣中被測組分峰面積;
As—— 試樣中內標物峰面積;
ms—— 內標物質量,單位為(g);
mi—— 試樣質量,單位為(g)。
葆春蜂王漿公司每年收購的蜂王漿有多批次,所以在計算蜂王漿中10-HDA 的含量時,取每月所有批次蜂王漿中10-HDA 含量的平均值進行分析。
4 年來葆春公司收購的蜂王漿原料中10-HDA 含量的平均值呈增長的趨勢,2019年的10-HDA 含量平均值由2016 的1.76%上升到了1.83%。詳見圖1。2019 年送到公司的蜂王漿樣品的10-HDA 含量普遍比往年高。

圖1 每年10- HDA平均含量圖
對與葆春公司合作的湖北不同地區生產蜂王漿檢測結果進行分析。由圖2 可以看出2016-2019 年不同地區蜂王漿的10-HDA 含量存在著較大的差異。湖北省鐘祥市2019 年10-HDA 含量最高,京山縣2016~2019 年的10-HDA 含量呈上升的趨勢,鄂州市的蜂王漿中,2016 年至2018 年10-HDA 含量呈下降趨勢,2019 年恢復到了較高水平。黃梅縣的10-HDA 含量基本持平,2019 年10-HDA 含量明顯下降。2019 年蜂王漿中含有10-HDA含量普遍偏高的情況下,黃梅縣的蜂王漿中10-HDA 的含量在2019 年不升反降,黃梅縣蜂農今年的王漿生產量是去年的兩倍,充分證明是因黃梅縣該年生產蜂王漿增加漿條和王臺基的數量造成。

圖2 不同地區每年10- HDA平均含量
從圖3 可以看出鄂州市提供的王漿樣本的10-HDA 含量最高,近幾年平均達到1.86%,其次是鐘祥市達到1.78%,最后是京山縣,有1.76%。鄂州市一直是優質王漿的生產地,他們生產高10-HDA 含量的蜂王漿,在市場上也獲得了較高的價格。

圖3 2016- 2019 年不同地區10- HDA平均含量
(1) 蜂種是決定生產蜂王漿品質的最主要因素,高產種王生產不出10-HDA 含量高的蜂王漿,即使其他條件再好也無法達到優質品;蜜王生產的蜂王漿中10-HDA 含量最高,其次是蜜漿王,漿王生產蜂王漿10-HDA 含量最低[7], 年群產最高達到15 kg 以上,10-HDA 的含量僅為0.6%~0.9%。蜂農們生產蜂王漿使用的王種一般為蜜漿王和漿王。鄂州市蜂農使用的王種正是蜜漿王且為定地飼養。
(2) 蜜粉源充足是生產蜂王漿的重要條件,10-HDA 的含量與特定的蜜源條件有極大的關系[8]。如果蜜粉源不足靠飼喂糖和天然花粉替代品,不能生產優質蜂王漿。不同地區不同年份由于蜜粉源條件不同,生產的蜂王漿中10-HDA 含量略有差別。
(3) 蜂王漿中10-HDA 含量的多少與生產蜂王漿時漿條的數量成正比,漿條越多蜂王漿的產量越高,但10-HDA 的含量必定下降。這就是葆春公司對蜂王漿生產蜂場及示范蜂場一再要求控制好漿條數量的原因。
(4) 種王、蜜源、漿條數量相同時,蜂群強弱是影響蜂王漿10-HDA 含量的因素。
筆者4 年來通過對國家蜂產業技術體系武漢綜合試驗站和葆春公司示范試驗蜂場生產的蜂王漿的10-HDA 含量進行了長期的跟蹤檢測,認為要想生產優質蜂王漿,以上四個條件缺一不可,因此武漢綜合試驗站及葆春公司對蜂王漿生產蜂農及示范蜂場主每年都從以上四點進行高質量王漿生產培訓。
蜂王漿除了10-HDA 含量高之外,新鮮度也是保證蜂王漿高品質的重要因素。低溫保鮮能夠很好的保護蜂王漿中的維生素C 及蛋白質不被氧化[6],儲藏溫度升高也會導致蜂王漿中糠醛類物質含量增加[9],低溫環境儲藏且降低解凍次數能夠保證蜂王漿的抑菌效果[10]。保證蜂王漿新鮮度的基本方法就是控制溫度,而控制好溫度就能確保蜂王漿的維生素C、蛋白質不被氧化,糠醛類物質含量不會升高,抑菌效果不會下降,因此蜂王漿的新鮮度是保證蜂王漿品質的重要因素。這正是葆春公司每年對蜂農的蜂王漿進行嚴格的新鮮度檢測的原因。
