宮頸癌患者血清腫瘤標(biāo)志物與內(nèi)分泌激素的相關(guān)性及臨床分析

趙敬，張文帆，楊金豪，陸婷婷，鄭佳琪，周霖，王蓉

(1.天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院婦產(chǎn)科，天津 300052；2天津醫(yī)科大學(xué)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院，天津 300203)

宮頸癌(cervical cancer，CC)是我國女性癌癥死亡的主要原因之一[1]，嚴(yán)重威脅女性的健康[2]。腫瘤標(biāo)志物檢測因高效、便捷、創(chuàng)傷小，在宮頸癌的早期診斷、病理類型識別、療效判斷、預(yù)后評估等臨床應(yīng)用過程中具有重要的作用[3]。然而，血清相關(guān)腫瘤標(biāo)志物對宮頸癌診斷的靈敏度較低，與其他因素聯(lián)合檢測仍是目前研究的重點(diǎn)[4]。

多項(xiàng)研究發(fā)現(xiàn)，雌激素E2可增加組織對人乳頭瘤病毒(human papillomaviruses, HPV)的易感性，進(jìn)而導(dǎo)致癌變的發(fā)生[5-6]。另有學(xué)者發(fā)現(xiàn)，聯(lián)合檢測E2與血清腫瘤標(biāo)志物有助于對肺癌患者的診療效果進(jìn)行評估[7]，但聯(lián)合內(nèi)分泌激素與血清腫瘤標(biāo)志物檢測在宮頸癌患者診斷中的報(bào)道少見，且結(jié)果不完全一致。因此，本研究旨在檢測宮頸癌與宮頸上皮內(nèi)瘤變患者血清腫瘤標(biāo)志物及其內(nèi)分泌激素的表達(dá)水平差異，并分析二者的相關(guān)性，以期為宮頸癌的鑒別診斷提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1研究對象 收集2017年1月至7月于天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院婦產(chǎn)科就診且經(jīng)臨床診斷為宮頸癌及宮頸上皮內(nèi)瘤變患者137例，年齡22～76歲, 中位年齡52歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)因?qū)m頸異常(存在宮頸糜爛、肥大、潰瘍、乳頭樣增生及接觸性出血等癥狀)就診;(2)經(jīng)臨床及病理組織學(xué)檢查確診;(3)術(shù)前未接受放、化療；(4)臨床與病理資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)既往伴有其他癌癥;(2)有口服免疫抑制劑藥物史;(3)處于妊娠期。共納入符合上述標(biāo)準(zhǔn)的宮頸上皮內(nèi)瘤變患者58例，宮頸癌患者79例。

1.2標(biāo)本采集 采集各研究對象入院后或就診時的空腹肘靜脈血5 mL，置于含分離膠-促凝劑的真空采血生化管中,3 500 r/min離心5 min,分離上層血清，樣本置于-20 ℃保存。

1.3化學(xué)發(fā)光微粒子免疫法檢測 采用化學(xué)發(fā)光微粒子免疫檢測法，按照ARCHIRECTi2000化學(xué)發(fā)光儀及配套的甲胎蛋白(AFP)、癌胚抗原(CEA)、糖類抗原125和199(CA125 & CA199)、鱗狀細(xì)胞癌抗原(SCC)、人附睪蛋白4(HE4)測定試劑盒說明書檢測各組血清腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)水平。按照ARCHIRECTi2000化學(xué)發(fā)光儀及配套的促卵泡生成素(FSH)、促黃體生成素(LH)、E2、孕酮(P)、睪酮(T)測定試劑盒說明書檢測各組內(nèi)分泌激素的表達(dá)水平。儀器、試劑、校準(zhǔn)品和質(zhì)控品均購自美國雅培公司。各指標(biāo)檢測嚴(yán)格按照實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程的相關(guān)要求執(zhí)行，實(shí)驗(yàn)結(jié)果根據(jù)各項(xiàng)目參考范圍與Westgard質(zhì)控規(guī)則綜合分析[8]。

2 結(jié)果

2.12組患者血清腫瘤標(biāo)志物和內(nèi)分泌激素各指標(biāo)水平的比較 與宮頸上皮內(nèi)瘤變組比較，宮頸癌組患者血清腫瘤標(biāo)志物CEA、SCC、HE4及內(nèi)分泌激素FSH、LH的表達(dá)水平均顯著升高(P均<0.05)。而E2的表達(dá)水平顯著降低(P<0.05)。見表1。

表1 2組患者血清腫瘤標(biāo)志物和內(nèi)分泌激素水平的比較[M(P25,P75)]

2.2ROC曲線評估各血清腫瘤標(biāo)志物和內(nèi)分泌激素鑒別診斷宮頸癌的價(jià)值 以宮頸上皮內(nèi)瘤變組作為對照組，宮頸癌組作為疾病組，以敏感性為縱坐標(biāo)、1-特異性為橫坐標(biāo)繪制ROC曲線(圖1)。根據(jù)最大約登指數(shù)計(jì)算表1中存在顯著差異性指標(biāo)SCC、CEA、HE4、E2、LH、FSH的cut-off值，并比較各指標(biāo)單獨(dú)或聯(lián)合檢測鑒別診斷宮頸癌的敏感性和特異性，其中血清腫瘤標(biāo)志物SCC、CEA的特異性較高(分別為96.4%,94.8%)，但敏感性較低(分別為38.2%，25.3%)，而內(nèi)分泌激素E2的敏感性較高(77.2%)，SCC與E2、CEA與E2聯(lián)合檢測鑒別診斷宮頸癌的敏感性增加至87.3%和82.3%, 而SCC與E2聯(lián)合檢測的準(zhǔn)確性最高(71.5%)。見表2。

圖1 各指標(biāo)單獨(dú)及聯(lián)合檢測對宮頸癌鑒別診斷的ROC曲線

表2 ROC曲線評估各血清腫瘤標(biāo)志物和內(nèi)分泌激素對宮頸癌的鑒別診斷價(jià)值(%)

2.3各血清腫瘤標(biāo)志物與內(nèi)分泌激素的相關(guān)性分析結(jié)果 對在表1中在2組患者之間存在顯著性差異的6個指標(biāo)(CEA、SCC、HE4和E2、LH、FSH)進(jìn)行相關(guān)性分析，結(jié)果表明，血清腫瘤標(biāo)志物SCC與內(nèi)分泌激素間均無相關(guān)性；CEA與E2呈負(fù)相關(guān)(r=-0.245,P<0.01)，而與LH、FSH呈正相關(guān)(r分別為0.284和0.302,P<0.01)；HE4與E2負(fù)相關(guān)(r=-0.263,P<0.01)，而與LH、FSH呈正相關(guān)(r分別為0.331和0.346,P<0.01)。

2.4宮頸癌發(fā)生危險(xiǎn)因素的Logistic分析結(jié)果 將宮頸癌患者和宮頸上皮內(nèi)瘤變患者作為二分類因變量，納入CEA、SCC、HE4、E2、LH和FSH等具有顯著性差異水平的指標(biāo)作為自變量，利用二分類 Logistic 回歸分析結(jié)果表明，E2和SCC是宮頸癌發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)因素。見表3。

表3 各血清腫瘤標(biāo)志物與內(nèi)分泌激素的Logistic 回歸分析結(jié)果

3 討論

研究表明，宮頸癌的發(fā)展過程較為緩慢，經(jīng)過早期治療的宮頸癌患者的5年生存率高達(dá)85%～90%, 但晚期宮頸癌患者的5年生存率僅為10%～20%[9]。目前血清腫瘤標(biāo)志物檢測已廣泛用于宮頸癌的臨床診斷、療效及預(yù)后評估等診療環(huán)節(jié)中[10]。SCC是目前臨床上篩查宮頸癌的首選腫瘤標(biāo)志物，而CEA屬于廣譜性的腫瘤標(biāo)志物,在宮頸腺癌患者血清中的表達(dá)水平明顯增加[11]。正常情況下，上述腫瘤標(biāo)志物呈低表達(dá)，當(dāng)機(jī)體中存在腫瘤細(xì)胞并呈異常增殖時，其表達(dá)水平可顯著升高[12]。本研究結(jié)果表明，宮頸癌組血清SCC、CEA、HE4的表達(dá)水平顯著高于宮頸上皮內(nèi)瘤變組(P<0.05)，表明SCC、CEA、HE4對宮頸癌的鑒別診斷具有一定的臨床應(yīng)用價(jià)值。

既往研究表明，單一血清腫瘤標(biāo)志物檢查的準(zhǔn)確性難以保證。呂冰等[13]認(rèn)為HPV感染亞型可顯著影響血清SCC、CEA等腫瘤標(biāo)志物的表達(dá)。為提高腫瘤檢出的準(zhǔn)確性，腫瘤標(biāo)志物與其他指標(biāo)的聯(lián)合檢測仍是當(dāng)今研究的重點(diǎn)，DNA甲基化、HPV及液基薄層細(xì)胞(TCT)聯(lián)合檢測亦出現(xiàn)越來越多的報(bào)道[14]。研究表明，E2的異常改變在宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展過程中發(fā)揮重要作用[15]。在病理?xiàng)l件下，E2是子宮內(nèi)腫瘤血管生成的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因子。有學(xué)者證實(shí)，口服避孕藥、多胎生產(chǎn)等都是宮頸癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素[16]。楊建萍等[6]亦認(rèn)為，E2與HPV感染在宮頸癌的發(fā)生過程中可能具有協(xié)同作用。本研究結(jié)果顯示，內(nèi)分泌激素的多項(xiàng)指標(biāo)在宮頸上皮內(nèi)瘤變和宮頸癌人群中的差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。

多項(xiàng)研究表明，E2與腫瘤標(biāo)志物的聯(lián)合檢測有助于肺癌患者的診斷及預(yù)后[17-18]。本研究亦發(fā)現(xiàn)，SCC、CEA單獨(dú)用于宮頸癌鑒別診斷時，兩者的敏感性均較低(分別為38.2%，25.3%)，而聯(lián)合SCC與E2或聯(lián)合CEA與E2用于宮頸癌鑒別診斷的敏感性明顯增加(87.3%，82.3%)，其中SCC與E2聯(lián)合聯(lián)測的準(zhǔn)確性最高(71.5%)，可有效彌補(bǔ)單一腫瘤標(biāo)志物檢出敏感性較低的缺陷，對防止宮頸癌患者的誤診、漏診具有一定的價(jià)值。此外，危險(xiǎn)因素分析結(jié)果亦提示，E2是癌癥發(fā)生的風(fēng)險(xiǎn)因子，因此，臨床上對宮頸上皮內(nèi)瘤變期患者的鑒別診斷及治療需密切關(guān)注其E2水平的變化。

目前，為提高婦科腫瘤患者術(shù)后的生活質(zhì)量，激素替代治療受到了越來越多的關(guān)注，但激素替代治療使用的安全性及相對危險(xiǎn)度仍有較大爭議[19]。Schneider等[20]認(rèn)為，激素替代治療不會增加宮頸癌的患病風(fēng)險(xiǎn)；而Lacey等[21]證實(shí)，單獨(dú)使用E2替代治療可提高癌變的風(fēng)險(xiǎn)。本研究結(jié)果顯示，E2的表達(dá)水平與CEA、HE4存在相關(guān)性，可監(jiān)測激素治療后CEA、HE4表達(dá)水平的改變，為激素治療后療效監(jiān)測提供參考依據(jù)。此外，本研究還證實(shí)E2與SCC之間不存在相關(guān)性，而SCC是宮頸癌發(fā)生的危險(xiǎn)因素(P=0.008)。因此，可通過檢測SCC的表達(dá)水平，監(jiān)測激素替代治療后宮頸癌患者復(fù)發(fā)的可能性。

綜上所述,本研究證實(shí)，部分血清腫瘤標(biāo)志物與內(nèi)分泌激素在宮頸癌和宮頸上皮內(nèi)瘤變患者中的表達(dá)水平存在顯著差異，二者聯(lián)合分析可顯著提高對宮頸癌的鑒別診斷價(jià)值，并對患者治療及預(yù)后進(jìn)行精準(zhǔn)評估。