李艷平 嚴玉霖 黃建新 陳富珍 程鵬飛 王喬花*
(1,大理農林職業技術學院 671003;2,云南農業大學 650201)
豬圓環病毒2 型(PCV2) 是導致斷奶仔豬多系統衰竭綜合征的重要病原之一,該病原可感染不同發育階段豬群,但對仔豬危害更為嚴重,可導致病畜出現淋巴結腫大、呼吸困難等癥狀,引起豬群發生免疫抑制病[1]。豬藍耳病(PRRSV)是由豬繁殖與綜合征病毒感染引起的以呼吸系統和繁殖系統病狀為主癥的豬傳染病,對養豬行業危害極大[2],該病傳播速度快,仔豬發病率可達100%,死亡率可達35%以上,母豬流產可達35%,中大豬感染率、死亡率較高[3]。豬瘟(CSF)是由豬瘟病毒(CSFV)引起的一種以高熱稽留和廣泛性出血為主要特征的高度傳染性疾病,為國家一類動物疫病,嚴重危害我國養豬業[4]。該病原感染豬群后可引發嚴重的臨床癥狀,其中包括體溫升高、皮膚發紺、腹瀉或便秘,且懷孕母豬可出現繁殖障礙性疾病(如流產、死胎等),特征性病理變化則包括脾臟腫大等[5]。疫苗免疫可以減少臨床發病和病理損傷,減少病豬排毒90%以上,改善生產性能、降低發病率、死亡率[6]。近年來,我國養豬業普遍應用PRRSV、PCV2 疫苗免疫,對緩解臨床癥狀、控制疫病的疫情不失為主要應對措施之一。而接種PCV2、PRRSV 疫苗是否會對豬瘟疫苗免疫效果產生影響還存在較多爭議。因此,本研究在現有的免疫程序基礎上,擬在某規模化豬場開展PCV2 和PRRSV 疫苗對母豬豬瘟免疫效果的綜合評估,以及對仔豬母源抗體水平的影響,研究結果對優化豬場免疫程序提供理論數據,對防控豬場的3 種免疫抑制性疾病提供技術支持,具有一定的現實意義。
高致病性豬藍耳病(TJM-F92 株) 弱毒疫苗、豬圓環2 型疫苗、豬瘟活疫苗,青島易邦生物工程有限公司產品。本試驗以大理周邊某規模化豬場為研究對象,選擇月齡相近的60 頭母豬及60 頭仔豬作為試驗樣本。將60 頭母豬分成4 組,每組15 頭,分別為對照組(豬瘟疫苗),PCV2 組(豬瘟+圓環疫苗),PRRS 組(豬瘟+藍耳疫苗)和PCV2+PRRS 組(豬瘟+圓環+藍耳疫苗),60 頭仔豬分組方法同上。60 頭母豬按表1免疫程序進行免疫后按時間采集血液,豬全血樣品3~5ml,3000 r/min 離心10 min,分離出血清,并標注試驗編號后利用ELISA 抗體檢測試劑盒檢測血清中的抗體。

表1 免疫程序設計
在母豬分娩時記錄母豬總產仔數、產活仔數、產健仔數及出生窩重,測定母豬生產性能。
60 頭仔豬按分組在1、7、10、14、21、28 日齡時分別采集血樣檢測母源抗體水平。
2.1.1 PCV2、PRRS 疫苗對CSFV 疫苗抗體陽性率的影響
根據豬瘟ELISA 試劑盒說明書標準對抗體結果進行陽性率評定。由表2 可知,第一次采血時,4 個組豬瘟抗體陽性率均為0%,表明該豬場此前未接種過豬瘟疫苗及未被野毒感染,說明試驗動物所產生的抗體均為疫苗免疫效果。第二次采血,即PCV2 疫苗、PRRS 疫苗及CSFV 疫苗均接種后,對照組及PCV2 組抗體陽性率均為100%,PCV2+PRRS 組抗體陽性率略低為93%,而PRRS 組抗體陽性率最低,為86%。

表2 PCV2、PRRS 疫苗對CSFV 疫苗抗體陽性率的影響
2.1.2 PCV2、PRRS 疫苗對CSFV 疫苗抗體水平的影響
由表3 可知,各組間抗體水平差異不顯著(>0.05),但相較于對照組,PRRS 組抗體水平最低,以及PCV2+PRRS 組抗體水平也略低,因此,推測免疫PRRS 疫苗對豬瘟免疫效果有影響。

表3 PCV2、PRRS 疫苗對CSFV 疫苗抗體水平(OD 值)的影響

表4 PCV2、PRRS 疫苗對母豬生產性能的影響
2.3.1 仔豬豬瘟母源抗體陽性率
從表5 看,仔豬抗體陽性率相較于對照組,除PCV2 組陽性率為100%外,其他兩試驗組抗體陽性率均低于100%。

表5 仔豬母源抗體陽性率
2.3.2 仔豬豬瘟母源抗體檢測結果
分別檢測了1、7、10、14、21、28 日齡仔豬的母源抗體水平,從檢測結果看,母源抗體呈現出逐漸消退的規律。由于0日齡還未吮吸母乳,所以母源抗體應為0,1 日齡母源抗體水平達到最高,往后逐漸降低。在21 日齡時,由于仔豬斷奶的原因,母源抗體水平下降迅速,但在28 日齡時,母源豬瘟抗體對仔豬還有保護,少部分在35 日齡也還有保護。由附圖可知,PRRS 組及PCV2+PRRS 組相較于對照組和PCV2 組,母源抗體水平整體略低。

附圖 仔豬母源抗體水平
近年來,我國普遍應用疫苗作為預防和控制疫病的主要措施,PCV2 疫苗、PRRS 疫苗和CSFV 疫苗的免疫已被列入豬場的常規免疫計劃,而PRRS 疫苗和PCV2 疫苗是否會對豬瘟抗體產生干擾還需進一步驗證[3]。有研究表明,由PCV2 病毒感染引起的免疫抑制病,如呼吸道病綜合征等會明顯降低豬瘟疫苗的特異性抗體產生,甚至造成豬瘟疫苗免疫失敗,出現免疫空白等現象,大大增加了臨床上豬瘟病毒感染的概率[7]。本次試驗發現,單獨接種PCV2 疫苗對豬瘟疫苗免疫效果無明顯影響,而接種PRRS 疫苗及PCV2 疫苗+PRRS 疫苗對母豬豬瘟抗體水平及陽性率均有一定的影響。從母豬生產性能分析,各組差異不明顯。仔豬母源抗體水平分析發現,單獨接種PRRS 疫苗及接種PCV2 疫苗+PRRS 疫苗的試驗組其抗體水平均有一定程度的下降。結合本次試驗結果認為,PRRS 疫苗對豬瘟疫苗免疫有一定的干擾作用。候艷麗等[8]通過從體液免疫和細胞免疫2 個方面分析豬藍耳病陽性場豬藍耳病弱毒疫苗對豬瘟疫苗免疫應答的影響,結果發現,豬藍耳陽性場豬藍耳弱毒疫苗并不干擾豬瘟疫苗的免疫反應,與本試驗結果有差異,存在的原因可能是由于疫苗、接種時間及豬場抗體情況有差異,還有待驗證。而朱華賢[3]等認為,PRRS 弱毒活疫苗對豬瘟疫苗免疫有較大的干擾作用,這與本試驗結果基本相同。提示在養豬生產過程中,應對豬群PRRS 抗體進行及時監測,一旦發現感染,合理調整豬瘟免疫程序,以及在使用PRRS 疫苗和其他疫病疫苗時要嚴格控制免疫接種間隔,以免造成重大的經濟損失。除此之外,仔豬首免日齡也非常重要,有研究表明,母源抗體的存在也是導致仔豬豬瘟疫苗免疫效果不好的一個重要因素,因此,確定正確的首免日齡至關重要。結合試驗結果,應于28~35 日齡對仔豬進行首免,可獲得比較合格的免疫保護率。