“兩精四現場”工作法在水產養殖用藥減量行動的實踐與思考

羅福廣，王志強，文衍紅，黃杰

(柳州市漁業技術推廣站，廣西 柳州545006)

長期以來，水產養殖病害防治一直處于診斷技術不規范、檢測設備落后的局面，加上病害種類繁多和綜合因素(環境、宿主、病原)復雜，“是什么病、用什么藥、怎么用藥”經常困惑著水產養殖從業者。近年來，國家在基礎水生動物疫病防控體系建設上加大了力度，大多數水產技術推廣部門建立了水生動物病害防治實驗室，依托實驗室專業的檢測設備和規范的檢測方法，可有效解決是什么病、由什么病原引起、對什么藥物敏感、多少劑量適宜等問題，為制定病防措施和精準使用藥物提供科學參考。然而，在實驗室檢測方法正確和操作者技術嫻熟的前提下，還是不可避免出現誤診、漏診現象。目前一些水產養殖發達地區或大型水產企業在其養殖基地配備了一些簡易實驗室，操作嫻熟的技術員能夠在病害發生現場采集到準確的病害樣品和信息，極大地提高了病害診斷效率和用藥準確率，但是對于水產養殖相對落后、養殖場小而分散、養殖場技術員專業素質較低的地區難以實現對病害有效數據的采集，造成實驗室專業設備與檢測工作實效性脫節。

在上述工作背景下，筆者結合廣西柳州市及周邊地區水產養殖特點與實際情況，總結了作為試點單位自2018年以來開展水產養殖“用藥減量行動”實踐經驗，提出了適合基層水產技術推廣部門的“兩精四現場”工作法，及時準確地采集了病害數據，為實驗室精準檢測和下一步科學指導本地區水產養殖企業病害防控提供工作保障。

所謂“兩精四現場”，指的是通過現場“詢問、測水、鏡檢、采樣”的工作方法，初步采集獲得準確有效的綜合信息、數據、致病病原等，結合實驗室專業檢測，從而達到“精確診斷、精準用藥”的目的。其中，“兩精”為指導思想，“四現場”為具體操作方法。“兩精四現場”工作法適用于各級水產養殖推廣機構開展日常水生動物疾病診斷，并提出科學合理的診治策略，減少了錯用、亂用、濫用，以及反復過量使用藥物，最終形成水產養殖用藥減量或不用藥的新格局，實現漁業可持續健康發展。

一、準備工作

生物顯微鏡(可充電)、便攜式水質快速檢測儀或水質快速分析試劑盒、采水器、解剖盤及相關器械、細菌培養平板、接種針(環)、酒精燈、采樣桶、采樣瓶、載玻片、蓋玻片、封口膜、革蘭氏染色試劑盒、吉姆薩染液、記號筆、一次性吸管、75%酒精棉球、打火機等現場數據采集相關設備和耗材。設備耗材的數量根據采樣量的多少適當準備。

二、工作步驟

1.現場詢問仔細詢問記錄養殖品種、密度、苗種來源、餌料來源、病情現狀、病樣特征、曾用藥或周邊用藥、周邊養殖環境等，了解病情基本情況，結合下一步檢測結果再綜合診斷。現場詢問對病情的初步預判具有極為重要的指導作用，有經驗的技術員可以通過比較以往該養殖場的病害發生規律與發生特點的相似性來做出初步診斷。例如某養殖場同一個養殖時期暴發某種病征相同的疾病時，即可初步確定病害發生的種類，以便在下一步檢測工作開展過程中及時做出前期處理，降低病害造成的損失。此外，現場詢問對一些突發事件也具有重要的指導意義，例如可能是某種藥物中毒死亡或水質污染死亡的，可以根據詢問得知曾用藥或周邊用藥、周邊水質污染情況以及死亡特點等來輔助判斷。

2.現場測水(圖1)有條件的單位，可使用便攜式水質快速檢測儀獲得病害發生現場的即時數據，其他單位可采用商品化的水質快速分析試劑盒進行現場采水測定，記錄當時常規漁業水質數據基本情況。即時測水能夠快速判斷當時水體的情況，如果是因為水質異常而造成的病害死亡，可當即采取措施緩解。例如因水體缺氧造成的魚死亡，可以立即采取化學或物理增氧來改善；因亞硝酸鹽氮或氨氮超標造成的魚死亡，可以通過改底、逐步換水、潑灑微生物制劑等辦法來改善。發生病害的水體同時水質異常的，先要改善水質，下一步再進行針對性的防治措施。由于養殖水體指標一天之內數值有較大變化，加上水樣經過長期運輸也會發生變化，送樣到實驗室檢測水質結果往往不大準確，易引起誤判。現場快速檢測的方法雖然沒有實驗室檢測那么精確，但是能夠了解當時水體指標大致的區間范圍，以滿足初步判斷水質因素是否為引起病害發生或加劇病情發展的主要因素。此外現場測水還具有很高的靈活性，可以在多點位測量，如上風口、下風口、水源、食場等，在制定病害防治策略時可更全面的考慮。

圖1 現場測水

3.現場鏡檢(圖2)采集5～10尾具典型病征瀕死魚，取病灶組織或體液鏡檢，根據鏡檢結果做出初步診斷。由于絕大多數寄生蟲可以通過肉眼或普通生物顯微鏡檢測出來，因此對寄生蟲病的確診較為迅速。瀕死的魚在鏡檢時更容易檢出寄生蟲，應及時鏡檢。而在送樣到實驗室檢測的過程中，由于病魚驚嚇刺激后易死亡或送樣時間過長后水質發生變化、未使用原塘水暫養等因素，許多寄生蟲因魚體和水體劇烈變化而脫離寄主或者死亡(例如車輪蟲和斜管蟲等)，從而影響檢測結果引起誤判。

圖2 現場鏡檢

此外，現場鏡檢還可以輔助判斷一些較大型、不易分離的致病菌株如諾卡氏菌、分枝桿菌和各種真菌類致病菌，以及采集瀕死魚的血液制作血涂片觀察血相等，因此現場鏡檢能夠最大限度地反映病情程度，及時確診病害發生的種類，從而提高診斷準確率。

4.現場采樣在現場采集典型病征瀕死魚樣后立即現場解剖，在盡可能干凈無風的區域完成病灶處細菌接種至培養平板的操作(圖3)。在新鮮病灶采集到的病原菌更容易在接種劃線處生長形成優勢菌落，可以通過12～24小時培養再純化獲得。而長時間低溫運送鮮活病樣或冷凍樣品過程中，病灶易受水體或體內其他非致病易生長菌類污染，從而增加下一步檢測、驗證工作量以及引起誤判。現場接菌采樣法是我們經過反復實踐和驗證并行之有效的病原菌采集法，能夠有效提高致病菌的檢出效率，為下一步細菌藥敏檢測、細菌鑒定、細菌體外藥效檢測提供保障。

圖3 現場采樣及接種

三、小結

《農業農村部水產養殖用藥減量行動方案》指出，水產技術推廣部門是“推廣機構＋科研院所＋推廣點＋養殖戶”技術服務體系中的主導單位，必須要強化履行關鍵農業技術試驗示范等公益性職責的能力，提升服務效能。因此，如何充分利用好現有實驗室專業檢測設備和技術條件，實現“精準診斷、精確用藥”，提升水生動物病害防控指導服務能力，是各級水產技術推廣部門落實行動部署的主要手段之一。“兩精四現場”工作法契合了水產技術推廣部門的工作實際，將實驗室檢測功能延伸到病害發生現場，通過優化工作方法極大提高了水生動物疾病診斷的準確率和臨床用藥效果，避免了亂用、濫用和反復用藥，同時結合發展生態養殖、使用優質苗種、強化疫病監測、規范生產管理和科學指導用藥等技術措施，進一步達到用藥減量或不用藥的目的。