黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚形態發育研究

陳彥伶，楊煥超，李青芝，劉 釗，涂全宇，趙華一，李 華

(四川省農業科學院水產研究所/水生態工程技術研究中心，四川 成都 611731)

黃河裸裂尻(Schizopygopsispylzovi)，隸屬鯉科、裂腹魚亞科、裸裂尻魚屬，俗名為魚景魚，小嘴湟魚和小嘴巴魚，天然分布于我國蘭州以上黃河水系的干流、支流以及附屬水系，為黃河上游主要的經濟魚類，是我國特有物種，同時也是我國重要的水產后備種質基因庫的重要組成部分[1-3]。國內學者對黃河裸裂尻的相關研究主要在其人工繁殖[4]、遺傳生物學[5-8]、胚胎發育[9]等方面，對于黃河裸裂尻仔魚早期形態發育方面未見文獻報道。

本研究對黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚的發育特點進行了較為系統的研究，以期豐富黃河裸裂尻仔魚發育期的基礎研究，為黃河裸裂尻苗種培育提供基礎資料。

1 材料與方法

1.1 實驗用仔魚來源與飼養管理

實驗用仔魚來自崇州雞冠山基地養殖的黃河裸裂尻親魚人工催產所得的受精卵，運送到四川省農業科學院水產研究所成都基地孵化獲得。養殖用水為曝氣后的地下井水，溶解氧為8.3～11.8mg/L(平均10.1mg)，pH值為6.52～7.89。

實驗期間用孵化框60cm(長)×40cm(寬)×30cm(高)放置在平列槽內，水深保持在15cm左右。仔魚8日齡開始投喂，開口餌料采用蛋黃用紗布過濾的濾液，每天投喂4次。實驗過程中采用底排換水,每天排污1次,養殖期間水溫保持在(18.0±1.0)℃。

1.2 研究方法與數據處理

仔魚出膜當日記為0日齡，每天隨機抽取10尾，用Leica DM2500體視顯微鏡觀察10尾樣本的外部形態變化，用zen軟件采集圖像，測量全長、體高和頭長、肛后長的各形態學指標，精確到0.01mm。

實驗數據均表示為平均值±標準差。采用spaa 22軟件和EXCEL 2010分析處理數據，使用Photoshop 2015進行圖片處理。

2 結果與分析

2.1 黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚發育的形態特征

初孵仔魚，全長10.19±0.32mm，頭長1.58±0.05mm，魚體透明，身體纖細，鰭褶較窄，頭部與卵黃囊尚未分離,與身體縱軸成90°，勾向卵黃囊彎曲，呈弧形，卵黃囊前段為圓球狀，后部呈棒狀，囊內隱約可見血管；眼無黑色素沉積，耳囊清晰，位于眼后方。初孵仔魚側臥于水底，尚無游泳能力。

出膜后第1d，全長10.70±0.49mm，頭部稍微離開卵黃囊。胸鰭原基出現，半月形。心臟在卵黃囊前下方，心房、心室清晰，心臟收縮舒張有力頭部與卵黃囊分離，卵黃囊前段呈圓形，內血管明顯增多，有血液流動，口凹開始形成，向兩邊凸顯呈三角形，眼囊輪廓清晰，視網膜有黑色素沉積，眼囊前方有橢圓形嗅囊。魚苗多靜息在水底，側臥，偶有掙扎性游動。

出膜后第2d，全長11.92±0.63mm，仔魚頭部前端上抬與身體保持平直,肉眼觀眼睛為淡灰色,肌節之間的血液循環明顯，卵黃囊整體成長條形，仔魚能靠尾部擺動以螺旋軌跡迅速游串。

出膜后第3d，全長12.70±0.62mm，下頜開始閉合,眼黑色,頭背部出現少量黑色素,鰓蓋開始張合。眼球虹膜上的“銀光層”出現并迅速增多，胸鰭進一步增大呈扇形,運動能力進一步增強；卵黃囊前段仍為球狀,后部呈棒狀，仔魚活力加強，受驚后在水底快速亂竄。

出膜后第4d,全長13.29±0.43mm，仔魚口張合次數約40次/min左右,4對鰓弓的鰓絲均進一步發育,卵黃囊進一縮小，尾鰭鰭條開始出現，頭部、軀體上部以及肌節和卵黃囊之間大量分布點狀黑色素斑。

出膜后第6d，仔魚全長14.55±0.49mm。鰓蓋開始節律性的張閉，魚鰾出現，鰾清晰可見，體積較小、單腔，尾鰭角質化。鰾室上以及肌節和卵黃囊之間黑色素斑濃密,鰓蓋張合次數約90次/min。

出膜后第8d，全長15.20±0.41mm。鰾一室,略圓,解剖鏡下呈黑色亮斑。仔魚平游并分散于各個水層，腸管黃色，沿著卵黃囊上的體腔向尾部延伸，開始攝食，此后進入混合營養期，尾鰭下葉呈圓弧狀。

出膜后第10d，全長15.54±0.40mm。尾椎明顯上翹,尾柄骨初步形成。卵黃囊在鰾室下方的前半部分呈前大后小的錐形，后半部分呈細線狀。

出膜后第11d，全長16.11±0.49mm，卵黃基本吸收殆盡,消化道內普遍有食物出現,仔魚主要依靠外源性營養，仔魚開始平游攝食。

出膜后第12d，全長17.06±0.42mm，消化道內有大量食物出現,仔魚完全依靠外源性營養。尾鰭開始分葉，鰭條20枚并開始第一次分節。

2.2 黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚生長發育變化

黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚日齡與體長、全長、體高、肛后長進行回歸分析，其生長變化趨勢呈現函數關系(圖2)。早期仔魚的全長(LT)與日齡(D)呈二項式關系，生長方程為LT=10.195+0.851D-0.027D2(R2=0.941,n=100),其中：LT表示仔魚全長，D表示出膜時間，n表示樣本數；早期仔魚體長(ST)與日齡(D)呈立方關系，關系式為ST=9.551+1.130D-0.101D2+0.004D3(R2=0.953,n=100)，ST表示仔魚體長；早期仔魚的頭長(HT)與日齡(D)呈立方關系，生長方程為HL=1.550+0.227D-0.027D2+0.001D3(R2=0.953,n=100)；早期仔魚的肛后長(PT)與日齡(D)呈二項式關系，生長方程為PT=2.724+0.378D-0.016D2(R2=0.982,n=100)。

圖1 黃河裸裂尻卵黃囊期仔魚日齡與全長、體長、頭長和肛后長的回歸曲線圖

表1 黃河裸裂尻與其他裂腹魚亞科早期仔魚發育特點的比較

3 討論

3.1 黃河裸裂尻與其他裂腹魚亞科魚類的仔魚發育差異分析

將黃河裸裂尻仔魚分別與其它裂腹魚亞科的卵黃囊仔魚時期發育的特點進行比較，見表1[10-20]。黃河裸裂尻初孵仔魚出膜后全長與裂腹魚亞科中的其他種類對比，大于厚唇裂腹魚、光唇裂腹魚和伊犁裂腹魚，與長絲裂腹魚、重口裂腹魚和拉薩裂腹魚相近，小于軟刺裸裂尻、短須裂腹魚，推測黃河裸裂尻初孵仔魚在裂腹魚亞科中屬于中等類型，裂腹魚亞科仔魚早期各器官組織差異較小、發育過程相似。黃河裸裂尻仔魚出膜后11d后卵黃囊消耗殆盡，與軟刺裸裂尻時間接近，短于拉薩裂腹魚、厚唇裂腹魚和重口裂腹魚。

3.2 黃河裸裂尻早期發育與環境適應性

本研究發現黃河裸裂尻魚卵黃囊在5日齡前被快速吸收，卵黃囊形態由圓球狀變為棒狀，吸收趨勢與大渡軟刺裸裂尻魚[10]；仔魚的口、眼、鰓、尾鰭等功能性器官在孵化后前5日進行快速分化發育，卵黃物質同步的快速利用于仔魚胚后發育。孵化后第8d腸道貫通，進入混合營養階段，開始攝取少量人工餌料，在孵化后第11d卵黃吸收完全，仔魚活動水平和攝食強度增加，生長迅速，頻次增多。及時投喂開口餌料，讓仔魚從內源性向外源性轉換的過渡時期，可避免仔魚“不可逆點”的出現，減少仔魚早期死亡[21]。黃河裸裂尻魚生活的環境一般分布海拔較高，喜愛生活在清澈的冷水環境之中，以植物為主要食物，如藻類和一些生活在水中的植物碎屑為食物，同時也以一些生活在水中的昆蟲為食[8]。黃河裸裂尻仔魚為了適應水溫和其他環境條件,黃河裸裂尻魚通過長期進化，為了更好地適應餌料生物匱乏的環境，降低仔魚在短時間內攝食不到外源營養而死亡的風險，從而提高仔魚的成活率，形成了自己特有的早期發育生物學特點。但關于黃河裸裂尻仔魚卵黃囊確切機制有待于進一步研究，根據本次實驗觀察，進入混合營養期的仔魚，卵黃囊未完全吸收，卵黃囊被大量吸收，呈細條狀此時段，仔魚生長緩慢；隨著仔魚攝取外源性營養能力增強，生長速度加快。根據黃河裸裂尻仔魚早期發育特點，選擇在開口初期投喂充足的開口餌料,使其能順利渡過開口期，過渡到外源營養期，提高魚苗的成活率。出膜后黃河裸裂尻仔魚為了更好地適應貧營養型水體，卵黃囊存在時間較長，降低了仔魚因攝取不到外源營養而死亡的風險。因此，黃河裸裂尻早期仔魚發育過程有較長的混合營養期，以適應性其生境。