牙周炎患者齦溝液中CD147、MMP-8及M-CSFR 水平變化及意義

謝華萍，張雪舟

（1.廣東祈福醫院 口腔科，廣東 廣州 510000；2.南方科技大學醫院 口腔科，廣東 深圳 518000）

0 引言

牙周炎是臨床常見的發生于牙周組織的慢性炎癥，一般由牙菌斑中的細菌侵犯所致，主要表現為牙齒松動、牙齦紅腫等[1]。牙周炎多發于35 歲以上的成人中，由于早期癥狀不明顯而常被忽視，但等到癥狀嚴重時牙齒多被破壞吸收，無法保全，所以早診斷早治療十分關鍵。尋找診斷牙周炎的特異性指標是當前臨床研究的重點。研究顯示，牙周組織細胞可以分泌MMPs（基質金屬蛋白酶），其中MMP-8 作為MMPs 中的一類膠原酶，與牙周炎的形成與發展密切相關[2]。而CD147（細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子）可以激活鄰近成纖細胞使其產生MMPs，同樣與牙周炎的發展存在相關性。此外M-CSFR 作為M-CSF（巨噬細胞集落刺激因子）的受體，也參與了牙周炎的形成。但目前臨床缺少關于牙周炎患者CD147、MMP-8 及M-CSFR水平變化的研究?；诖?，本次選擇了60 例牙周炎患者和40 例健康志愿者進行了對照研究，現總結如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

本次選取廣東祈福醫院2020 年1 月至2020 年10月收治的60 例牙周炎患者作為研究組，選擇同一時期的40 例健康志愿者作為對照組。研究組男33 例，女27 例。年齡30～73 歲，平均（49.78±11.46）歲；對照組男性24 例，女性16 例。年齡31～74 歲，平均（49.58±11.62）歲。該研究已經過醫院倫理委員會審核批準，兩組的一般資料沒有顯著差異（P>0.05），可進行研究。

1.2 入選標準

（1）納入標準：①牙周炎患者均符合牙周病新分類診斷標準[3]：2 顆或2 顆以上不相鄰牙的鄰面臨床附著喪失或有2 顆及以上牙齒的頰側或舌側臨床附著喪失≥3mm 且合并有牙周袋≥3mm。符合其中一條即可；②牙周炎患者均6 個月內未行過牙周治療；③健康志愿者均無牙周病及病史，且3 個月內未行過牙周治療；④納入研究者均不抽煙，不存在嚴重器質性疾病，且6 個月內沒有用過抗生素或免疫制劑；⑤納入研究者均知曉研究內容且自愿簽字同意。

（2）排除標準：①處于妊娠期或哺乳期女性；②存在嚴重器質性疾病或系統性疾病；③近期接受過牙周治療，或使用過抗生素、免疫制劑；④非自愿參與研究或中途退出研究。

1.3 方法

（1）研究分組：選擇我院收治的60 例牙周炎患者作為研究組，選擇同一時期的40 例健康志愿者作為對照組。其中60 例牙周炎患者按照牙周病國際分類標準（2018 版）[4]將其分為輕中度組和重度組，每組各30 例。牙周炎分期標準：Ⅰ期：鄰面最嚴重位點附著喪失：1～2mm，影像學骨喪失：牙根冠方1/3（<15%），最大PD（牙周探診深度）≤4mm，以水平型骨吸收為主；Ⅱ期：鄰面最嚴重位點附著喪失：3～4mm，影像學骨喪失：牙根冠方1/3（15%～33%），最大PD ≤5mm，以水平型骨吸收為主；Ⅲ期：鄰面最嚴重位點附著喪失≥5mm，影像學骨喪失延伸到根中1/3 或根尖1/3，因牙周炎失牙數≤4 顆，最大PD ≥6mm，垂直型骨吸收≥3mm，根分叉病變Ⅱ～Ⅲ度，中度壓槽骨破壞；Ⅳ期：鄰面最嚴重位點附著喪失≥5mm，影像學骨喪失延伸到根中1/3 或根尖1/3，因牙周炎失牙數≥5 顆，在Ⅲ期基礎上伴有咀嚼功能異常、咬合紊亂、重度壓槽骨破壞的等需要綜合治療的癥狀。其中Ⅰ、Ⅱ期為輕中度組，Ⅲ、Ⅳ期為重度組。

（2）齦溝液采集：①選擇頸部無填充體無齲損的牙齒的4 個鄰面位點（包括1 顆第一磨牙和1 顆單根牙的近遠中鄰面位點），用無菌刮匙將牙齦上的菌斑及牙石去除，并隔濕、吹干牙面；②在牙周袋最深處放入濾紙條（2mm×8mm），保留30s 收集齦溝液；③濾紙條取出后放入裝有PBS（1mL）的試管中，在室溫下洗脫40min；④在4℃下，以1000r/min 的速度離心5min 后收集上清液，保存在-20℃中等待檢測。

（3）檢測指標：采用免疫酶聯吸附試驗對納入研究者的齦溝液CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平進行檢測。CD147 試劑盒購自上海臻科生物科技有限公司，MMP-8 試劑盒購自上海潤裕生物科技有限公司，M-CSFR 試劑盒購自上海雙贏生物科技有限公司。檢測操作均按照試劑盒說明進行。

1.4 評價指標

①比較研究組與對照組齦溝液中CD147、MMP-8及M-CSFR 水平；②比較輕中度組和重度組齦溝液中CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平。

1.5 統計學處理

使用統計學軟件SPSS 22.0 對本次研究所涉及的數據進行處理和分析，CD147 水平等計量資料以（）表示，用t進行檢驗，性別等計數資料以[n（%）]表示，用χ2進行檢驗；當數據P<0.05 表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 研究組與對照組齦溝液中CD147、MMP-8及M-CSFR水平比較

研究組齦溝液中CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平均高于對照組，差異有統計學意義（P<0.01），如表1 所示。

表1 研究組與對照組齦溝液CD147、MMP-8及M-CSFR水平比較（）

表1 研究組與對照組齦溝液CD147、MMP-8及M-CSFR水平比較（）

2.2 輕中度組和重度組齦溝液中CD147、MMP-8及M-CSFR水平比較

重度組齦溝液中CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平均高于輕中度組，差異有高度統計學意義（P<0.01），如表2 所示。

表2 輕度組和重度組齦溝液中CD147、MMP-8及M-CSFR水平比較（）

表2 輕度組和重度組齦溝液中CD147、MMP-8及M-CSFR水平比較（）

3 討論

牙周炎是由牙菌斑中微生物引發的牙周支持組織炎癥，牙槽骨吸收等牙周支持組織慢性感染性疾病，如不及時治療會導致牙齒松動甚至喪失，嚴重影響患者的生活質量。而且牙周炎所導致的壓槽骨吸收是不可逆轉的，所以早診斷早治療對于牙周炎患者十分重要。

齦溝液是通過結合上皮及齦溝內壁上皮進入齦溝的結締組織液體，其成分與血清相似。通常情況下，齦溝內會有少許齦溝液聚積，但由于菌斑微生物及其代謝產物的存在，會有滲透梯度的變化。研究發現，齦溝液中的炎性因子聚集與牙周炎的發生及發展息息相關，當牙齦出現炎癥時，齦溝和結締組織會出現水腫，導致齦溝液增加，所以，可以通過檢測齦溝液中的細胞因子評估牙周炎的病情進展[5]。牙周組織在抵抗牙菌斑微生物時會出現炎癥反應，從而產生基質金屬蛋白酶（MMPs）、細胞因子等炎癥介質。MMPs 可以通過降解細胞外基質，破壞牙周支持組織，促進牙槽骨的吸收，加重牙周病變。研究顯示，重度牙周炎患者的血清MMP-8 水平明顯比正常人群高[6]。CD147又稱EMMPRIN（細胞外基質金屬蛋白酶誘導因子），是一種跨膜糖蛋白，可以通過激活鄰近成纖細胞使其產生MMPs。免疫組化檢測發現，CD147 廣泛分布于炎性牙齦的上、下皮下結締組織以及基底層細胞膜中，且分布高于正常牙齦，而且，研究證實CD147 與牙周炎、種植體周圍炎等口腔疾病聯系密切[7]。而M-CSFR作為M-CSF 的受體也參與了牙周炎的形成。骨吸收是牙周炎主要的病理過程，在牙周炎快速發展的過程中產生的致炎因子會使破骨細胞活化從而破壞和吸收牙槽骨，加重牙周炎程度，而M-CSF 由成骨細胞產生，靶向破骨細胞，其可以通過促進破骨細胞生成而參與牙周炎的炎癥過程[8]。

本次研究發現：研究組齦溝液中CD147、MMP-8及M-CSFR 水平均高于對照組，差異有高度統計學意義（P<0.01）。這與柴琳[9]等人的研究結果相似，其研究采用酶聯免疫法檢測了20 例牙周炎患者和20 例健康人的齦溝液CD147 水平，發現牙周炎患者的CD147 水平高于健康人，且CD147 水平隨牙周炎癥狀的減輕而降低。這提示牙周炎患者齦溝液的CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平高于正常人群。同時，研究還發現：重度組齦溝液中CD147、MMP-8及M-CSFR 水平均高于輕中度組，差異有統計學意義（P<0.01）。這與孫欣彤[10]等人的研究結果相似，其研究選擇了50 例慢性牙周炎患者，并按病情分為了中度組（23 例）和重度組（27 例），選擇同期的25 例健康志愿者作為對照組，經過檢測發現牙周炎患者齦溝液MMP-8 水平高于對照組，且齦溝液MMP-8 水平與病情程度成正比。這提示重度牙周炎患者齦溝液中CD147、MMP-8 及M-CSFR 水平高于輕中度患者。其水平與病情程度成正比。

綜上所述，牙周炎患者齦溝液中CD147、MMP-8及M-CSFR 水平隨牙周炎的嚴重程度而上升，可作為檢測牙周炎嚴重程度的指標，為治療提供依據。