病原微生物快速檢測的臨床研究進展概述

鄭青

（欽州市靈山縣人民醫院，廣西 欽州，535400）

近幾年，隨著環境污染程度的明顯加重，導致我國感染性疾病的患病率日漸增加，給患者機體健康以及生存質量帶來極大危害。經分析發現，鼠疫耶爾森菌、霍亂弧菌等病原微生物再次繁殖后，增加感染性疾病發生的風險，隨后病原微生物的種類明顯增加，耐藥性隨之升高，進一步提升臨床診治的困難程度[1]。另外我國范圍內的流動人口逐漸擴增，明顯提升傳染性疾病發生的風險。針對此，臨床應盡早選擇合適的病原微生物檢驗方式，以此達到早期診斷、治療的目的，同時還可有效減少感染性疾病的擴散傳播[2-3]。現綜述如下：

1 病原微生物檢驗的意義

病原微生物測定的本質是檢驗微生物中特異性酶，但不同種類微生物的酶系統存在較大差異，且對多重物質分解的功能也不相同，因此選擇不同底物所產生的代謝產區可間接測定微生物酶，以此發揮檢驗微生物的效果[4]。研究表明[5]，沙門氏菌能夠分泌辛酯酶，其他腸桿菌科的細菌均不存在這一現象。因此，遵循此特征可選擇快速檢驗辛酯酶法測定沙門氏菌，期間底物選擇4-甲基傘形酮辛酯，利用沙門氏菌酶進行降解，可產生4MU，同時選擇紫外燈檢查藍色熒光。由此看出，此方式具備簡便易行的優勢，可在紫外燈下觀察底物，明顯縮短檢驗時長，其敏感性、特異性均達到90%以上，值得推廣[6-7]。

2 血清免疫學檢驗

臨床為了獲得對應的抗原抗體反應，應將對應的標記物與抗體相結合，并利用標記物熒光或者酶有色性反應、高電子密度、放射性，經過電鏡或者光鏡開展定位、定量、定性研究。目前臨床免疫分析方法較多，包含化學發光免疫分析法、放射性免疫分析法、熒光免疫分析法、酶免疫分析法、間接性酶聯免疫吸附法等，均被廣泛運用于臨床[8-9]。其中（1）酶聯免疫吸附法：主要遵循抗原抗體免疫反應與酶高效催化作用的原則發生有機結合反應，同時經酶催化底物產生一系列化學反應，促進溶液顏色改變，提示存在抗原抗體特異性反應。隨后醫療技術不斷進步發展，酶聯免疫吸附法的敏感性、特異性明顯升高，在多種病原微生物檢驗上具有重要意義[10]。（2）熒光抗體技術：熒光抗體技術通常遵循抗原抗體的高特異性反應，選擇熒光素作為抗原標記物，并利用熒光顯微鏡觀察，結果發現熒光特異性抗原抗體的復合物、抗原抗體的具體部位。但熒光抗體技術仍具備較多缺陷，例如操作程序復雜、染色標本無法長時間保存、特殊器械較昂貴等[11]。其中快速檢驗病原菌的方式包含直接與間接檢驗，前者表示在樣品上直接獲得特異性熒光抗血清，經洗滌后放在熒光顯微鏡下觀察；而后者是指在樣品上添加對應的細菌特異性抗體，產生作用后開展洗滌操作，添加熒光標記第二抗體[12-13]。

3 分子生物學檢驗及傳感器

近些年，分子生物學以及分子遺傳學不斷改進，人們對微生物的認識從外部結構逐漸發展至內部基因結構，因此微生物檢驗也從生化免疫發展至基因水平上。另外生物傳感器也隨之被提出，其作為新型檢驗技術，主要是將傳感器技術與分子診斷技術相聯合，在分子識別器件以及換能器上效果顯著。待測物質、轉換器件、識別器件主要利用化學、生物以及物理之間的相互作用，加上傳感器具備操作簡便、準確性高等特點，在相關領域獲得一定價值。但其仍存在較多不足，例如容易受到外界干擾、敏感性較低等，還需臨床作進一步的研究。

4 小結

綜上所述，病原微生物的檢驗方式較多，均存在一定優缺點，因此臨床為了彌補其缺陷，可選擇聯合多種檢驗方式的途徑，可有效提升檢驗結果的敏感性與特異性。另外在挑選檢驗方式時，應充分考慮相關條件，重點在于提升敏感性、減低假陽性上。近幾年，醫療水平以及計算機技術不斷提升，病原微生物檢驗技術隨之完善，并逐漸向自動化以及簡便快速上發展，且分子生物學技術也被提出，經過自動化儀器，實現高效、低廉、安全的檢驗技術。