ALA- PDT 聯合干擾素α- 2b 栓劑治療宮頸持續高危型HPV 感染的療效探討

丁珍珍，魯形丹，干亞丹

浙江省余姚市人民醫院皮膚科，浙江余姚 315400

宮頸癌是臨床較為常見的婦科惡性腫瘤之一，發病率高呈逐年上升趨勢，并呈年輕化趨勢[1]。 有資料顯示[2]， 宮頸人乳頭瘤病毒 （human papilloma virus,HPV）持續感染，尤其是高危型HPV 感染是導致宮頸癌及其癌前病變的必要條件。盡管目前預防性疫苗已取得突破性進展，但它的使用存在局限性，只能預防未曾感染的女性，且只能預約HPV6、11、16、18,等常見類型， 不能清除已感染的HPV， 也不能治療已有HPV 相關的病損和惡性腫瘤。 對于治療性疫苗目前還處于研發狀態。因此臨床上急需尋找一種安全有效的可以清除宮頸局部高危型HPV 的治療方法， 從而減少和預防宮頸癌的發生。 該研究目的在于觀察2017 年1 月—2019 年6 月在該院應用5-氨基酮戊酸光動力療法聯合干擾素栓劑治療宮頸持續感染高危型HPV 的患者，探索其有效率，探索兩者之間是否具有協同作用，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

90 例宮頸HR-HPV 感染的患者均來自該院皮膚科門診，經HPVDNA 雜交捕獲試驗確診，且HR-HPV感染時間已持續1 年以上。該研究經醫院倫理委員會批準，同時征得患者同意并簽署知情同意書。 排除標準：①5-氨基酮戊酸過敏或光過敏者，干擾素過敏者；②妊娠或哺乳期婦女； ③合并淋病或其他宮頸炎、陰道炎、急性盆腔炎者；④宮頸鱗狀上皮內瘤變(CIN)和宮頸癌患者；⑤嚴重自身免疫性疾病、HIV 感染、糖尿病、系統應用糖皮質激素者；⑥半年內經激光微波等物理治療者將入選的患者。

按年齡匹配隨機分為3 組，光動力組30 例患者，年齡20～59 歲，平均年齡（29.1±3.5）歲；干擾素組30例患者，年齡21～60 歲，平均年齡（28.7±4.0）歲；聯合組30 例，年齡23～59 歲，平均年齡（26.7±3.6）歲。 3 組在年齡上差異無統計學意義(P＞0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 主要藥物與機器 外用光敏劑5-氨基酮戊酸散 (ALA，118 mg/瓶) 。 光動力半導體激光治療機LD600-C： 波長范圍為633～635 nm， 照射20 min/部位，點狀光斑和柱狀光纖最大功率度：500 mw／cm2，起始能量260 mw/cm2。 干擾素α-2b 栓劑。

1.2.2 宮頸HPV 檢測 使用賽樂奇HPV 專用刷完全插入宮頸口，同方向旋3～5 圈，將采集的標本刷頭放置入保存液試管小瓶內并蓋緊瓶蓋，送至公司檢測。

1.2.3 治療方法 光動力組患者月經干凈后第3 天進行治療，取膀胱截石位，清潔外陰后置陰道窺器，用聚維酮碘依次消毒陰道、宮頸及宮頸管表面后，據宮頸面積制備薄層棉片, 予滅菌注射用水新鮮配置20%ALA 溶液，將稀釋的ALA 溶液滴于薄層棉片上,將帶藥棉片濕敷宮頸表面,頸管內塞帶藥小棉球,3~4 h 后予半導體激光照射。照射時將特制彌散激光光纖直接插入宮頸,并固定于宮頸上,使紅光可照射宮頸管和宮頸表面病變,光斑直徑0.4 cm,紅光波長635 nm,能量密度100 J/cm2,功率100 W。 兩次治療間隔7 d,共治療3 次。干擾素組患者每次月經干凈后第3 天開始干擾素α-2b 栓放置陰道后穹隆置， 隔日1 次，10 次為1 個療程，連用3 個月。聯合組患者于月經干凈后第3天，先進行光動力治療3 個療程，方法同光動力組，待下一個月經周期月經干凈后第3 天， 予以干擾素α-2b 栓治療，方法同干擾素組。 囑患者治療期間禁止性生活，療程結束后隨訪期內性生活使用避孕套。

1.3 觀察指標

隨訪和療效判斷3 組患者均在治療結束后3、6、9 個月月經干凈后第3 天進行HPV-DNA 檢測。 觀察3 組患者的HPV 轉陰率及不良反應，結果分為轉陰、未轉陰兩個級別。

1.4 統計方法

采用SPSS 22.0 統計學軟件進行數據分析，計數資料以頻數和百分比（%）表示，組間比較進行χ2檢驗。 P<0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

療程結束后3 個月光動力組有8 例轉陰（26.7%），干擾素組有5 例陰轉（16.7%），聯合組有11例陰轉（36.7%）； 第6 個月時光動力組有16 例轉陰（53.3%），干擾素組有12 例陰轉（40.0%），聯合組有22 例陰轉（73.3%）；第9 個月時光動力組有19 例轉陰（63.3%），干擾素組有17 例陰轉（56.7%），聯合組有26 例陰轉（86.7%）。結果提示聯合組的轉陰率明顯高于光動力組和干擾素組，且其轉陰時間也短于對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；光動力組轉陰率亦高于干擾素組，其轉陰時間也短于干擾素組，差異有統計學意義(P<0.05)。

不良反應，3 組患者均未出現局部的感染、 宮頸管部位出血、縮窄、外陰陰道瘙癢等不適。僅有少部分患者在行光動力治療后出現不同程度的陰道分泌物增加，經3~4 d 自行消失。

3 討論

人類乳頭瘤病毒是一種環狀雙鏈DNA 病毒，HPV 感染人的角質形成細胞后， 尤其高危型HPV 常以整合狀態將HPV 基因片段插入宿主細胞DNA 中，使得機體很難將其清除[3]。宮頸持續HPV 病毒感染的患者宮頸局部黏膜的免疫功能低下無法建立有效的免疫反應，使得病毒感染持續存在。 大量研究已證實持續HR-HPV 感染是宮頸癌發生的必要條件。

目前臨床上有采用各種干擾素制劑、抗HPV 蛋白敷料、微波治療、某些中草藥制劑等用于治療宮頸高危型HPV 感染，但臨床療效不盡人意。 目前臨床治療觀察中應用最多的是利用干擾素針劑或凝膠治療HPV感染，但其研究結果不盡相同。 干擾素能改善宮頸局部免疫環境但不能直接清除病毒本身。 且有研究[4]表明HPV 病毒對干擾素治療后的反應受到多種HPV蛋白表達的影響， 存在于細胞中完整HPV 病毒的基因對于干擾素的抑制作用相對敏感，但來源于低分化的宮頸不典型增生或宮頸癌細胞中的HPV 對干擾素治療作用會產生耐受性。這可能是導致單獨使用干擾素治療宮頸高危型HPV 感染療效不佳的原因。

近年來， 5-氨基酮戊酸光動力療法 （ALA-PDT治療）被廣泛應用于治療外陰、宮頸、尿道口、肛周等尖銳濕疣臨床療效肯定，且復發率低[5]。 ALA-PDT 是一種具有高度選擇性或稱靶向性的藥械結合治療方法。 5-氨基酮戊酸是一種天然的親水性小分子化合物，是血紅素合成途徑的前體物。 當給予大量外源性ALA 后，其增生旺盛細胞選擇性吸收，經過一系列酶促反應在線粒體內生成大量光敏性物質原卟啉IX(PpIX)， 經一定波長光源照射后組織內產生單態氧、氧自由基等氧活性物質以殺傷病變細胞，而對正常細胞無明顯損傷。 且其敷藥面積和光照面積大可達到“面清除”效果；還能治療傳統方法不易達到的腔道深部病灶；治療過程中無明顯痛苦、毒副作用少及可重復治療等特點和優勢，因此對于具有特殊解剖結構的宮頸有明顯的優勢。 ALA-PDT 治療不僅可以治療宮頸表面還能覆蓋至宮頸管內外口。 繆飛等[6]對5-氨基酮戊酸光動力治療宮頸高危型HPV 感染研究發現其治療后9 個月有效可達到72.5%。 由于宮頸高危型HPV 持續感染對于宮頸的不典型增生， 宮頸癌的發生影響重大，在臨床上希望能達到100%的治療，即使達不到痊愈，轉陰率越高越好。 目前對于5-氨基酮戊酸光動力療法聯合重組人干擾素治療外陰及宮頸尖銳濕疣的研究證實其療效明顯優于兩者單獨使用。

該研究通過觀察光動力組、干擾素組及聯合組3種方法治療宮頸持續HR-HPV 感染的療效觀察。 研究結果發現聯合組的治療效果最佳， 在3 個月、6 個月、9 個月檢測的HR-HPV 轉陰率分別為36.7%，73.3%、86.7%， 均顯著高于單種方法的轉陰率 （P＜0.05），其轉陰時間也遠遠短于單種方法。 同時該研究還發現干擾素組在3 個月、6 個月、9 個月的HRHPV 轉陰率分別為16.7%、40.0%、56.7%， 光動力組在3 個 月、6 個 月、9 個 月HR-HPV 轉 陰 率 分 別 為26.7%、53.3%、63.3%，干擾素組轉陰率低于光動力治療組，提示單獨使用光動力療法治療效果也優于單獨使用干擾素α-2b 栓劑療法。

李璐等[7]研究中發現單獨使用光動力治療HRHPV 有效率可高達93.02%，且其轉移率時間短，其局部的炎癥因子水平低于單獨使用干擾素組。陶有仙等[8]研究發現干擾素組在3，6，9 個月的HR-HPV 轉陰率分別為27.5%，44.4%，53.6%，光動力組在3、6、9 個月HR-HPV 轉陰率分別為52.8%、71.4%、80.6%，研究提示單獨使用光動力療法治療效果優于單獨使用干擾素α-2b 凝膠療法。 其結果提示與該研究基本相一致。張晶等[9]研究結果提示光動力聯合干擾素凝膠α-2b 治療宮頸HR-HPV 持續感染在3、6、9 個月轉陰率分別為54.83%、83.87%、93.54%， 與該研究結果基本一致。 不同于上述研究，該研究選用干擾素α-2b 栓，經陰道給藥，在使用上更為方便，依從性更好。

綜上所述，5-氨基酮戊酸光動力聯合重組人干擾素α-2b 栓劑療法治療宮頸持續高危型HPV 感染具有較好的臨床療效，能顯著提高HPV 轉陰率，轉陰時間短，且無明顯不良反應。