我國豬群偽狂犬病病毒變異株感染人的警示

牛中偉，張 軍

（法國詩華動物保健公司，北京 100102）

皰疹病毒是一群有囊膜的DNA病毒，生物學特性相似，歸類為皰疹病毒科。目前總共發現了100多種，分為α、β、γ三大亞科。其中代表性的α皰疹病毒有3種：人的皰疹病毒、雞的馬立克氏病病毒和哺乳動物尤其豬偽狂犬病病毒。

偽狂犬病，顧名思義是一種以疾病癥狀的方式命名的病種，因早期發現該病時主要見于一些終末宿主如貓、狗等伴侶動物表現類似狂犬病的癥狀而得名。我國第一例偽狂犬病病例報道為1947年上海的1只貓。偽狂犬病病毒具有廣泛的哺乳動物宿主，豬是唯一的自然儲毒庫，感染后有的豬癥狀輕微甚至不被發現。其他動物感染后表現奇癢、狂犬病類似癥狀終歸死亡。近年國內豬場偽狂犬病“變異株”流行及人Covid-19疫情背景下，偽狂犬病病毒的人獸共患問題引起國內外廣泛關注。

1 國內豬群偽狂犬病病毒的變異

1950年國內證實偽狂犬病病毒存在以來，家養豬群一直飽受偽狂犬病病毒的困擾。偽狂犬病病毒感染豬群不分日齡、種群：可以造成公豬的不育、母豬的死胎流產等繁殖障礙；也可以感染產房仔豬造成神經癥狀、腹瀉死亡；保育、育肥豬的感染引起呼吸道疾病、細菌繼發感染等，造成嚴重的經濟損失。豬只日齡越小對偽狂犬病病毒越易感，產房仔豬感染死亡率近100%。

1970年為控制國內豬群偽狂犬病，我國引入匈牙利偽狂犬病疫苗Bartha株免疫豬只。偽狂犬病弱毒疫苗Bartha-k61為人工傳代致弱，缺失主要毒力基因gE，使用至今有60年歷史，是同期世界上最優秀的疫苗之一。其良好的安全性及高效的保護幫助很多國家控制了當地豬群偽狂犬病，應用配套區分疫苗、野毒的檢測試劑盒，很多國家也成功在家養豬群凈化了該病。我國自免疫該疫苗以來，很好控制了國內豬群偽狂犬病，到20世紀90年代很少有豬偽狂犬病流行的報道，絕大多數豬場也放松了對豬偽狂犬病的警惕。

偽狂犬病病毒為雙鏈DNA病毒，遺傳相對穩定。雖然公認的偽狂犬病病毒只有一個血清型，但不同分離株毒力有明顯差異，現代分子生物學技術能找出這些毒株的遺傳差異，并研究其與毒力表型的關聯?；谌蚪M測序，人們習慣把歐美及中國的偽狂犬病毒株分成兩類：基因Ⅰ型、基因Ⅱ型。歐美毒株多為基因Ⅰ型，比如我國引入的弱毒疫苗Bartha株；亞洲尤其中國流行基因Ⅱ型，包括20世紀國內豬群偽狂犬病流行期間分離的經典毒株Fa、Ea、Sc等，以及一些以這些豬場分離株為基礎研發的弱毒疫苗HB98、SA215株等?；蛐偷牟煌]有影響疫苗的效果，Bartha-k61幫助我國很好地控制了20世紀豬群偽狂犬病的流行并持續使用至今。

研究者的關注點不同，分類結果也會不同。巴西學者Fonseca依據偽狂犬病病毒gC基因將世界各地的偽狂犬病毒株分為5個基因型，剛好與依據分離地域建立的毒株分類結果相符，表明1902年Aujeszky確診首例偽狂犬病以來，隨著國際貿易、養殖量、規模及密度不斷擴大，偽狂犬病病毒在世界傳播并繼續演變為具有地方特點的毒株。Fonseca同時發現了明顯的病毒重組跡象。所以人們要習慣偽狂犬病病毒具有毒株多樣性，雖然它只有一個血清型！

2011年以后，中國免疫豬群暴發偽狂犬病引起了人們的警覺，尤其華北、中原地區疫情初期很多豬場家養的貓、狗感染偽狂犬病死亡。童光志課題組率先分離了毒株，并進行了測序和毒力研究，證實了其與國內經典毒株毒力和遺傳的差異。雖然早期的毒力實驗動物選擇有所爭議，但后續研究者的跟進報道和重復驗證，讓國內存在毒力增強的偽狂犬病變異株這一提法深入人心，不同課題組陸續分離到了變異株HN1201、ZJ01、TJ等，同時也在緊鑼密鼓地開展相應毒株的疫苗研發。據報2013年國內有9個省區分離到變異株，2016年時分離出變異株的省區就達到了23個?！白儺愔辍钡奶岱ㄊ桥c原經典毒株Fa、Ea、Sc等進行了區分，無論經典還是變異毒株其基因型還是屬于我國地域性的基因Ⅱ型。變異毒株的出現除了引發國內豬群新一輪偽狂犬病流行外，也引起了人們對公共衛生方面的擔憂

2 人感染偽狂犬病病毒的近況及歷史

人Covid-19疫情初期，張文宏教授曾提到華山醫院感染收治的病例：來自江西的某豬場女工因豬糞水入眼引發疾病，表現發熱、頭痛、視力受損，NGS（高通量測序技術）和Real-time PCR確認病原為國內變異株偽狂犬病病毒。華中農業大學、河南省人民醫院及動物疫病控制中心聯合報道了4例偽狂犬病病毒感染引起的人急性腦炎病例，成功分離出PRV hsD-1/2019致病株，完善了Koch's假說證據鏈。

2018年至今國內報道人感染偽狂犬病病毒23例，21例經NGS確認，患者大都是養豬人、屠夫、獸醫、豬肉販等。高福院士也撰文：偽狂犬病是被忽視的人獸共患病嗎？

人是否能感染偽狂犬病病毒一直存在爭議。2001年Skinner對455名疑似患者和高危人群進行偽狂犬病病毒中和抗體調查，結果都為陰性，人工感染高含量病毒也未見任何癥狀。1914年最早報道的2例疑似人感染病例為兩名實驗員，接觸病貓后表現虛弱、咽喉痛、奇癢、不安，抗體檢測和病毒分離失敗；1940年兩名實驗員，1963年4名種豬場工人接觸病狗，1983年兩名游客因照顧病貓感染，以上案例都沒有確診。1986年3名歐洲人接觸患病動物后出現發熱、虛弱、盜汗、疲憊等癥狀，近一年時間才恢復，3人在病后半年至一年內檢測到特異性中和抗體，但沒有做IgG、IgM分型，不足以直接證明被感染。

筆者接聽豬場工人電話咨詢時，也不乏被問到給豬免疫偽狂犬病疫苗時不小心打到自己手上、胳膊上會不會被感染、該如何處理的情況，極少個例出現有胳膊腫脹的，但難以確診因疫苗毒引起，絕大多數工人未做任何處理且未有進一步發展。但短期內變異株偽狂犬病感染人數量激升且確診，不得不讓人擔憂。

3 人感染偽狂犬病病毒的生物學和環境基礎

偽狂犬病病毒通過糖蛋白gD與細胞nectin-1受體結合入侵宿主細胞，人與豬細胞的nectin-1受體結構相似，氨基酸同源性＞90%，存在跨物種傳播的可能。

中國是世界最大的生豬產地，有龐大的從業人員，生產模式多樣。檢測水平提高，尤其NGS的應用讓很多傳染病得以確診，豬病流行與人感染病例“暴發”時間上重疊，加重了人們的疑慮。但相對于龐大的從業人員基數，確診的感染病例還是少數。偽狂犬病的跨種傳播僅局限于個別毒株、特定條件？還是大量的隱性感染未被發現？這需要做深入研究。從業人員屬于密接人群，需重視偽狂犬病感染人的風險并采取防護措施。豬群內偽狂犬病的傳播除了母仔、精液的垂直傳播外，體液分泌如唾液、鼻液，排泄物如尿液、糞便等含有大量病毒污染周圍環境。如在華山醫院確診被感染的江西女工，由豬舍糞水內污染的偽狂犬病病毒濺入眼睛而直接感染。

4 豬群偽狂犬病凈化

Elizabeth通過神經系統感染模式動物的研究，發現偽狂犬病病毒的毒力與感染神經系統的能力呈負相關。強毒株過早地致死宿主并未入侵中樞神經，弱毒如Bartha株等相比強毒即使將宿主致死，也獲得了幾倍的存活時長并占位中樞神經。種間傳播表明毒株已經在選擇壓力下改變，人感染并確診病例數增多是一個危險的信號?？刂撇艋瘋魅驹词歉镜某雎贰?/p>

我國自免疫Bartha株，在1990-2010年間控制了偽狂犬病流行，但盲目樂觀坐失了強制免疫和檢測凈化的機會，許多偽狂犬病變異株流行的地區，當時正減免甚至不免偽狂犬病疫苗，張文宏教授報道的江西病例其所在豬場也沒免疫。高頻次、大劑量偽狂犬病疫苗免疫恢復后，2015年以來變異株的流行明顯降低。但在非洲豬瘟疫情期間，很多豬場定點清除過程中采取的靜默生產，讓偽狂犬病等的免疫陷入混亂；大量三元母豬未經馴化培育入群；為恢復生產多來源背景不明的豬只混群，又讓很多豬場偽狂犬病大量轉陽。現階段，即使免疫，大家對偽狂犬病的期望普遍采取免疫不發病的心態，也增加了其繼續流行的風險。控制豬群偽狂犬病，DIVA免疫凈化是關鍵。疫苗研發依然沒有脫離缺失gE基因的方向，gE抗體的鑒別診斷已經深入人心?？紤]人獸共患的風險及種間傳播，經典疫苗安全有效的情況下應審慎地推進變異株弱毒疫苗的大規模接種，避免人為的選擇壓力和適應。運用現有的、保守、低風險、有效的手段，配以嚴格的凈化控制偽狂犬病是當務之急。

（參考文獻略）