蜂王漿中藥物殘留及其檢驗(yàn)方法

王 琦，劉玉玲，蘭鳳明，王 志

（吉林省養(yǎng)蜂科學(xué)研究所，吉林 吉林 132108）

蜂王漿是主要蜂產(chǎn)品之一，是蜜蜂養(yǎng)殖業(yè)中的重要經(jīng)濟(jì)來源。它經(jīng)巢內(nèi)哺育蜂頭部的咽下腺和上顎腺分泌[1]，呈漿狀，顏色為乳白色、淡黃色或橙色，用于哺育蜂王和工蜂幼蟲[2]。從19 世紀(jì)末開始，人們便開始對蜂王漿的主要成分進(jìn)行了研究[3]。隨著科技的發(fā)展，人們對蜂王漿的了解也逐漸加深。學(xué)者經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)，蜂王漿中大部分由水組成，可占其總量的62.5%～70%，少部分為干物質(zhì)。干物質(zhì)含量雖少，但卻富含氨基酸、蛋白質(zhì)、維生素、礦物質(zhì)等多種營養(yǎng)物質(zhì)，還具有一定的生物學(xué)活性[4]。因此，蜂王漿也開始作為綠色保健食品進(jìn)入了人們的視野。

蜂王漿的食品安全問題一直受到人們的廣泛關(guān)注。現(xiàn)代化農(nóng)業(yè)生產(chǎn)為了提高農(nóng)作物產(chǎn)量、減少病蟲為害，開始普遍使用化肥和農(nóng)藥，這也使蜜源植物常常攜帶各種有害化學(xué)物質(zhì)殘留；再加上蜂農(nóng)為了治療蜂病所使用的抗生素、除螨劑等蜂藥在蜂箱中均有殘留，使有害物質(zhì)被蜜蜂富集在其體內(nèi)，最終影響蜂產(chǎn)品質(zhì)量，危害人類的身體健康。對蜂王漿中幾種主要的藥物殘留及其檢驗(yàn)方法進(jìn)行了綜述。

1 有機(jī)磷農(nóng)藥

1.1 簡介

從20 世紀(jì)開始，為防止農(nóng)作物的病、蟲、草害，農(nóng)藥被廣泛應(yīng)用于農(nóng)作物生產(chǎn)中。如今，大部分的除草劑、殺蟲劑均為更易降解的有機(jī)磷農(nóng)藥，典型的有機(jī)磷農(nóng)藥有敵敵畏、樂果、滅線磷、三唑磷等。

有機(jī)磷農(nóng)藥是指含磷元素的有機(jī)化合物農(nóng)藥，絕大多數(shù)為殺蟲劑，對人體的危害從劇毒到低毒不等。農(nóng)民在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)過程中使用農(nóng)藥，采集蜂在直接接觸后有很大概率死亡。而蜜源植物或從其體表、或從土壤、水源中將有機(jī)磷農(nóng)藥富集在植物體內(nèi)，經(jīng)蜜粉傳遞至蜂群中制成蜂糧，最終由蜜蜂消化吸收，因此，其在蜂王漿、蜂蜜、蜂花粉等蜂產(chǎn)品中均可能存在一定殘留。

1.2 檢測方法

SN/T 2577-2010[5]中采用氣相色譜法測定蜂王漿中有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量，該方法使用乙腈提取測試樣品中的有機(jī)磷農(nóng)藥，提取液經(jīng)凝膠色譜柱凈化，使用火焰光度檢測器的氣相色譜儀測定， 使用外標(biāo)法定量。 Emmanouel 等[6]將實(shí)驗(yàn)樣品經(jīng)C18 固相萃取技術(shù)純化并分離試驗(yàn)樣品，采用氣相色譜法進(jìn)行測定蜂王漿中有機(jī)磷和有機(jī)氯農(nóng)藥的殘留量。李櫻紅等[7]將蜂王漿樣品通過乙腈提取并進(jìn)行初步處理后，采用HLB 固相萃取小柱富集凈化，使用高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法測定了蜂王漿中包括蠅毒磷在內(nèi)的7 種不同農(nóng)藥的殘留。

2 殺螨劑

2.1 簡介

蜂螨寄生在蜂體，以吸食蜜蜂血淋巴為生，造成蜜蜂壽命縮短、采集力下降等問題，嚴(yán)重時會導(dǎo)致群勢迅速降低，造成巨大損失。常見的蜜蜂寄生螨有大蜂螨、小蜂螨等。為了解決這一難題，殺螨劑應(yīng)運(yùn)而生，如氯殺螨、甲基克殺螨、殺螨酯、樂殺螨等。

嚴(yán)格來說，殺螨劑也是屬于農(nóng)藥的一種，與上述有機(jī)磷農(nóng)藥有所重疊。但不同的是，殺螨劑直接在蜂巢中使用。殺螨劑雖然對蜜蜂無害，但仍會被蜜蜂吸收進(jìn)體內(nèi)，同時在蜂產(chǎn)品中有所殘留，最終影響蜂產(chǎn)品品質(zhì)。

2.2 檢測方法

SN/T 2571-2010[8]中采用氣相色譜- 質(zhì)譜法檢測殺螨劑殘留量，通過1 : 1 的正己烷和丙酮混合試劑提取殘留的殺螨劑，然后使用弗羅里硅土柱凈化，通過氣相色譜- 質(zhì)譜- 負(fù)化學(xué)源測定，外標(biāo)法定量。曾銀歡[9]將蜂王漿離心處理后使用乙腈+ 水進(jìn)行樣品萃取，建立了液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜的測定方法，對市場購買的蜂王漿樣品中的殺螨劑（四螨嗪、喹螨醚、吡螨胺、噻螨酮、乙螨唑等10 種） 殘留進(jìn)行了測定，相關(guān)系數(shù)均大于0.99。

3 抗生素類

3.1 簡介

抗生素類與殺螨劑類似，大多屬于直接用于蜂箱內(nèi)的蜂藥。抗生素種類繁多，憑借其優(yōu)異的殺菌性能在多種蜂病的治療當(dāng)中均有應(yīng)用。如鹽酸土霉素可用于治療美洲幼蟲腐臭病和歐洲幼蟲腐臭病、使用制霉菌素治療白堊病、煙曲霉素治療孢子蟲病等[10]。

3.2 檢測方法

GB/T 22945-2008[11]中使用磷酸溶液提取鏈霉素、雙氫鏈霉素和卡娜霉素，經(jīng)過三氯乙酸沉淀蛋白，苯磺酸和羧酸型固相萃取柱精華，采用液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測定其在蜂王漿中的殘留量。李曉東等[12]將樣品采用QuEch-ERs 技術(shù)進(jìn)行提取凈化，UPLC-MS/MS 法同時定性、定量分析了蜂王漿中14 種喹諾酮類藥物殘留。葉有標(biāo)等[13]采用高效液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法分別對干粉和鮮王漿兩種不同狀態(tài)下的蜂王漿中四環(huán)素類抗生素進(jìn)行了測定，結(jié)果符合產(chǎn)品質(zhì)量安全標(biāo)準(zhǔn)要求。SN/T 2664-2010[14]中對四環(huán)素類抗生素殘留量采用放射受體分析法測定，該方法通過提取出的四環(huán)素類抗生素與[3H]標(biāo)記的金霉素共同競爭結(jié)合特異的受體位點(diǎn)，經(jīng)反應(yīng)后[3H]測定衰變發(fā)出的β 粒子數(shù)放射性量值對四環(huán)素殘留進(jìn)行定量分析。SN/T 3027-2011[15]中采用酶聯(lián)免疫法測定蜂王漿中氟喹諾酮類抗生素的殘留量。薄海波等[16]通過酸性Na2EDTA-Mcllvaine 緩沖溶液將蜂王漿中蛋白質(zhì)沉淀并提取其中的藥物殘留通過反相液相色譜柱分離，紫外檢測器監(jiān)測，外標(biāo)法定量，結(jié)果滿足相關(guān)規(guī)定的要求。

4 其他藥物

侯建波等[17]使用液相色譜- 串聯(lián)質(zhì)譜法測定了蜂王漿中新煙堿類藥物及其代謝產(chǎn)物的殘留量。譚韓英等[18]利用氣相色譜法測定了蜂王漿中氟胺氰菊酯的殘留量。 SN/T 2573-2010[19]和SN/T 2574-2010[20]中介紹了氣相色譜- 質(zhì)譜法測定殺蟲脒和雙甲脒及其代謝產(chǎn)物殘留量的監(jiān)測方法。雙甲脒還可采用液相色譜- 質(zhì)譜法、質(zhì)譜法進(jìn)行測定。

5 展望

近年來，隨著農(nóng)藥、化肥、食品添加劑等化學(xué)產(chǎn)品的大規(guī)模使用，食品安全問題開始廣受人們關(guān)注。蜂王漿中各類農(nóng)藥、抗生素的殘留量直接影響著蜂王漿的產(chǎn)品質(zhì)量，也與人們的生命健康安全息息相關(guān)。因其巨大危害，蜂王漿中藥物殘留的允許檢出指標(biāo)均為mg/kg 量級，屬于痕量分析，因此對監(jiān)測設(shè)備的精密度要求極高。目前，氣相色譜法、高效液相色譜法、質(zhì)譜法等高精度儀器分析方法應(yīng)用廣泛。此外，質(zhì)譜儀憑借其通用性、高精度等優(yōu)點(diǎn)也被作為氣相色譜、高效液相色譜的檢測器使用，即氣相色譜- 質(zhì)譜法和高效液相色譜- 質(zhì)譜法，高效、高精度，但也有價格昂貴等問題。因此，更廉價、簡單便捷、高效、高精度的檢測方法研究一直是該領(lǐng)域的研究方向。