柞蠶微孢子蟲胚種傳染率的分析

河南省蠶業科學研究院 徐欣 朱緒偉 劉中文 周其明 張耀亭 張永君

柞蠶微粒子病是柞蠶生產上的重要病害，由柞蠶種生產中的唯一檢疫對象柞蠶微孢子蟲誘發，并能夠經卵垂直傳播影響種繭生產，威脅種質資源的保育及生產的安全。寄生柞蠶的微孢子蟲到目前為止共發現 5 種，包括柞蠶微粒子蟲（Nosema pernyi Wen et Ding）、修氏內網蟲（Endoreticlatus schubergi）、鏈孢變形孢蟲（Vairimorpha chainsporum Wen et Ding）、訥卡變形孢蟲（Vairimorpha necatrix）和柞蠶微孢子蟲新種（Nosema sp.），其中，柞蠶微孢子蟲是優勢種。柞蠶微孢子蟲的傳播方式有水平傳播與垂直傳播，其中，垂直傳播即胚種傳染，是主要傳染途徑，也是造成檢測及防治難度較大的原因。因此，本試驗初步研究柞蠶微孢子蟲的垂直傳播過程，調查河南省主要柞蠶品種的胚種傳染率，為探究柞蠶微孢子蟲侵染相關的機制奠定基礎，也為尋找控制水平傳播和阻斷垂直傳播的綜合治理方法提供幫助。

一、材料與方法

（一）供試柞蠶品種

試驗中選取河南省柞蠶育種研究室鏡檢后攜帶微孢子蟲的母蛾，母蛾已經完成交配，在產卵袋中單獨產卵、保存，供試的母蛾品種為豫大1 號、鎮玉、181、182、101 及三三共6 個品種，帶毒母蛾均隨機挑選。

（二）試驗方法

母蛾產卵后，在氣溫25 ℃、濕度80%條件下進行催青處理，2%的甲醛溶液進行卵面消毒，待出蟻前1天將單個蠶卵放置到直徑5 cm、高度4 cm 的圓柱形塑料帶蓋小盒（自行設計，食品級塑料，塑料盒四周和蓋上有數個透氣小圓孔）中，每個柞蠶品種隨機選取10 頭母蛾，每頭母蛾隨機選取50 粒蠶卵，進行單蠶飼養。

在飼養過程中，從孵化出蟻到3 齡48 h，每隔1～2 d 更換小盒內的柞樹葉并除沙，保證小盒內的飼養環境，記錄每頭柞蠶的生長狀況及得病、死亡情況。并于3 齡48 h 將所有柞蠶幼蟲進行鏡檢，調查微孢子蟲的攜帶情況并記錄。

（三）數據處理

試驗數據采用SAS 9.0 數據分析軟件對試驗結果中的胚種傳染率進行統計學分析。

二、結果與分析

（一）豫大1 號品種帶毒母蛾胚種傳染率調查

表1 中展示了柞蠶品種豫大1 號品種10 頭帶毒母蛾隨機選取50 個卵進行單蠶飼養的簡單生長狀況，幼蟲從收蟻到2 齡眠的過程中大多能夠適應較密閉的盒內飼養環境。由于柞蠶的放養天性，齡數越大越需要更多的生長與活動空間，而室內飼養條件不能夠滿足其需要，到3 齡起蠶后長勢逐漸減弱，運動性和進食量大大降低，死亡數量增加過快。為不使細菌病等其他病害影響實驗結果，故選擇在3 齡48 h 將所有幼蟲進行腹部血液鏡檢，將鏡檢帶毒頭數與當前活頭數之比值作為1 頭帶毒母蛾的胚種傳染率，結果如圖1所示。經過統計，胚種傳染率試驗中隨機調查了柞蠶品種豫大1 號10 頭帶毒母蛾的胚種傳染率，最低為11.76%，最高為85.71%；胚種傳染率低于30%的為2頭，30%～70%的為6 頭，高于70%的為2 頭。柞蠶微孢子蟲的胚種傳染率較高，同時個體差異較大，帶毒率高的胚種傳染率也高，孢子的數量是決定胚種傳染率的重要因素。

表1 豫大1號品種10頭帶毒母蛾單卵飼養生長狀況統計

圖1 豫大1號品種帶毒母蛾胚種傳染率

各品種中調查的10 個帶毒母蛾差異情況基本相似，因此沒有一一列出各品種的調查數據。

（二）6 個柞蠶品種的胚種傳染率對比

本試驗共調查了豫大1 號、鎮玉、181、182、101及三三共6 個河南省柞蠶繁育主要品種，表2 至表6展示了除豫大1 號品種外剩余5 個品種的單蠶飼養的生長狀況，整體的生長情況和豫大1 號品種相似。從圖2 各品種的平均胚種傳染率統計結果中可以看出，幾個品種的傳染率均在50%～75%。雖然由于個體差異大導致數據平均偏差較大，但從平均值上看，仍然能說明豫大1 號品種的柞蠶微孢子蟲胚種傳染率較低，其抗微粒子病能力較強；其次是鎮玉品種，其他幾個品種的抗性較弱，傳染率在70%以上。

表2 鎮玉品種10頭帶毒母蛾單卵飼養生長狀況統計

表3 181品種10頭帶毒母蛾單卵飼養生長狀況統計

表4 182品種10頭帶毒母蛾單卵飼養生長狀況統計

表5 101品種10頭帶毒母蛾單卵飼養生長狀況統計

表6 三三品種10頭帶毒母蛾單卵飼養生長狀況統計

圖2 6個柞蠶品種的平均胚種傳染率

三、討論

試驗過程中發現柞蠶微孢子蟲的胚種傳染率個體差異較大，與母蛾帶毒情況有關呈正相關，結合孢子的侵染機制，說明孢子數量是決定胚種傳染率的重要因素，為今后探究柞蠶微孢子蟲胚種傳播具體方式提供幫助。試驗調查的6 個柞蠶品種中發現豫大1 號品種的抗微粒子病能力較其他5 個供試品種強，在今后柞蠶生產與推廣上，尤其在微粒子病高發地區，應結合柞蠶生產基地的具體條件與當年天氣狀況，建議優先推廣豫大1 號品種。