氣相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀檢測(cè)含乳飲料中的5種人工麝香

彭露 賈亞麗

摘要：本文研究了不同提取溶液以及不同提取條件對(duì)含乳飲料中二甲苯麝香、西藏麝香、葵子麝香、傘花麝香、酮麝香5種人工麝香的提取效果。采用氣相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀（GC-MS/MS）進(jìn)行檢測(cè)，內(nèi)標(biāo)法定量。分析結(jié)果表明，采用正己烷作為提取溶劑、超聲5min的條件下有較好的提取效果。5種人工麝香在0.050～1.0 μg/mL濃度范圍內(nèi)線性良好。二甲苯麝香、葵子麝香的檢出限均為4.0 μg/kg，西藏麝香、傘花麝香、酮麝香的檢出限均為5.0μg/kg，陰性樣品添加水平分別為20、40、200 μg/kg時(shí)，回收率在89.1%～101%之間，相對(duì)偏差在2.09%～5.78%之間。本方法能夠快速準(zhǔn)確的檢測(cè)含乳飲料中5種人造麝香，滿足檢測(cè)及確證需要。

關(guān)鍵詞：人工麝香、GC-MS/MS、含乳飲料

1.引言

人工合成麝香因其突出的提香、定香能力以及價(jià)格優(yōu)勢(shì)，被作為天然麝香的替代品，廣泛應(yīng)用于化妝品、洗滌用品、香水等產(chǎn)品中，其中硝基麝香合成工藝相對(duì)簡(jiǎn)單，價(jià)格低廉，用量最大，其中以二甲苯麝香和酮麝香用量最大。但研究發(fā)現(xiàn)，人造麝香會(huì)通過(guò)皮膚和空氣兩個(gè)途徑吸收富集于人體，長(zhǎng)期使用含人造麝香的產(chǎn)品可能導(dǎo)致肝腎負(fù)擔(dān)加重，對(duì)免疫系統(tǒng)造成危害，嚴(yán)重的致癌或造成畸胎，從而給健康帶來(lái)潛在的危害。

有研究人員發(fā)現(xiàn)大量的母乳樣本中合成麝香顯現(xiàn)陽(yáng)性的結(jié)果，甚至部分地區(qū)檢出佳樂(lè)麝香的含量逐年增加。某些在人體血液中檢出人造麝香的研究也證實(shí)了體內(nèi)污染的事實(shí)和嚴(yán)重性。此外，在環(huán)境監(jiān)測(cè)中有相當(dāng)多的關(guān)于水質(zhì)與土壤受到人造麝香污染的報(bào)道。在食品行業(yè)，也有在水產(chǎn)品中檢出佳樂(lè)麝香與酮麝香的報(bào)道，這都反映了一個(gè)不容樂(lè)觀的事實(shí)，人造麝香對(duì)環(huán)境、生物乃至人類的污染已經(jīng)十分嚴(yán)重。而我國(guó)是合成麝香的生產(chǎn)和使用大國(guó)，未來(lái)人造麝香的污染問(wèn)題或呈上升趨勢(shì)。據(jù)歸納，我國(guó)化妝品、污水、污泥、土壤、血液、母乳、水生生物及水產(chǎn)品中均有檢出合成麝香的檢測(cè)的報(bào)道，但對(duì)于食品中特別是含乳飲料中未見(jiàn)有關(guān)于檢測(cè)合成麝香研究。在目前嚴(yán)峻的形勢(shì)下，為確保食品安全，建立一種簡(jiǎn)單、快速的檢測(cè)飲料中人造麝香方法，為食品安全保駕護(hù)航，十分有必要。

人工麝香的分析檢測(cè)方法主要包括前處理和儀器分析方法兩部分，目前前處理方法主要有液-液萃取、固相萃取、索氏提取、加速溶劑萃取、超聲波輔助萃取及超臨界流體萃取等。針對(duì)不同的樣品可選擇不同的提取方式。儀器分析方法有氣相色譜法（GC）、氣相色譜-質(zhì)譜法（GC-MS）及氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（GC-MS/MS）[2，19-22]，其中以GC-MS為主，為達(dá)到更低的檢測(cè)限、減小干擾使結(jié)果更準(zhǔn)確，本文選用正己烷超聲提取法提取含乳飲料中的麝香，結(jié)合GC-MS/MS對(duì)五種麝香同時(shí)進(jìn)行定量和定性分析，實(shí)現(xiàn)了簡(jiǎn)單、快捷、高效的分析目標(biāo)。

2.實(shí)驗(yàn)部分

2.1儀器與試劑

7890B-7000D氣相色譜串聯(lián)三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀（Agilent）、ME204電子天平（METTLER TOLEDO）、UMV-2多管渦旋振蕩器（北京優(yōu)晟聯(lián)合科技有限公司）、KQ-500E超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）、3-30K高速冷凍離心機(jī)（SIGMA）、氮吹濃縮儀（上海安譜）

正己烷（色譜純）、二氯甲烷（色譜純）、乙酸乙酯（色譜純）均購(gòu)自于Merck KGaA，實(shí)驗(yàn)用水均為Milli-Q 超純水系統(tǒng)（Millipore ）制備的超純水。

2.2標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

二甲苯麝香（100 μg/mL溶于環(huán)己烷）、傘花麝香（100 μg/mL溶于環(huán)己烷）、酮麝香（100 μg/mL溶于環(huán)己烷）均購(gòu)自 Dr. Ehrenstorfer公司，西藏麝香（10.0 μg/mL溶于異辛烷）、葵子麝香（10.0 μg/mL溶于乙腈）購(gòu)自于First Standard，內(nèi)標(biāo)熒蒽-D10（200 μg/mL溶于異辛烷）購(gòu)自于安譜。分別移取適量5種人工合成麝香標(biāo)準(zhǔn)品置于10 mL棕色容量瓶，加入正己烷定容至刻度，配置成濃度為1.0 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，-20℃避光儲(chǔ)存。移取適量熒蒽-D10稀釋成濃度為1.0 μg/mL的內(nèi)標(biāo)溶液。移取適量混合標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液、內(nèi)標(biāo)溶液，配制成質(zhì)量濃度分別為：0.05、0.10、0.20、0.40、0.60、0.80、1.0 μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)工作溶液，內(nèi)標(biāo)濃度為0.10 μg/mL。

2.3儀器條件

色譜柱：HP-5MS 30m×0.25mm，0.25μm;升溫程序：60℃保持2min，30℃/min升溫至200℃，5℃/min升溫至250℃，保持3min;進(jìn)樣方式：不分流進(jìn)樣;進(jìn)樣口溫度：250℃;進(jìn)樣量：1μL;載氣：He（99.999%）。

質(zhì)譜條件：EI離子源，電壓70eV，離子源溫度：150℃，四級(jí)桿溫度：230℃，掃描方式：MRM。

2.4樣品的制備

準(zhǔn)確稱取均勻試樣5.0 g（精確至0.0001g）至10 mL塑料離心管中，準(zhǔn)確加入0.1 mL內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)溶液和4 mL提取溶劑正己烷，渦旋振蕩均勻后超聲提取5min，10000 r/min高速離心5min，取上清液;重復(fù)上述步驟一次，合并上清液，室溫下氮吹至干，準(zhǔn)確加入1.0 mL正己烷復(fù)溶，過(guò)0.22μm濾膜后待測(cè)。

3.結(jié)果與討論

3.1樣品前處理的條件選擇與優(yōu)化

3.1.1提取溶劑的選擇

選用商場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)的陰性含乳飲料為空白樣品，通過(guò)添加40 μg/kg的二甲苯麝香，西藏麝香、葵子麝香、傘花麝香、酮麝香，分別采用二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、乙腈4種溶劑對(duì)樣品中人造麝香進(jìn)行提取，回收率見(jiàn)表2。

由表2可知，二氯甲烷、正己烷、乙酸乙酯、乙腈4種溶劑對(duì)5中人工麝香均有一定的提取效果，回收率均達(dá)到80%以上。綜合比較4種溶劑對(duì)5種人工麝香的提取效果，采用正己烷提取效果最好，目標(biāo)化合物的回收率在90.8%～95.7%之間。人工麝香的極性較低，具有較強(qiáng)的親酯性，在正己烷中的溶解度較高，因此正己烷的提取效果最好。

3.1.2提取方式的選擇

實(shí)驗(yàn)選用商場(chǎng)購(gòu)買(mǎi)的陰性含乳飲料為空白樣品，通過(guò)添加40 μg/kg的二甲苯麝香，西藏麝香、葵子麝香、傘花麝香、酮麝香，選取超聲提取和渦旋震蕩提取兩種方式，研究?jī)煞N方式不同提取時(shí)間對(duì)5種人工麝香的加標(biāo)回收率的影響，結(jié)果見(jiàn)圖1。

由圖1可知，延長(zhǎng)提取時(shí)間對(duì)超聲和渦旋振蕩兩種提取方式的目標(biāo)化合物回收率均有提升，總體來(lái)說(shuō)，超聲提取效果比渦旋振蕩提取效果更好。渦旋振蕩提取10min，5種人工麝香的回收率可以達(dá)到90%以上，繼續(xù)延長(zhǎng)時(shí)間，提取效率略有提升，但效果不明顯;超聲提取時(shí)間5min時(shí)，目標(biāo)化合物的回收率為95.3%～99.0%，繼續(xù)延長(zhǎng)時(shí)間，提取效果略有提升。因此，綜合考慮操作的便捷性和節(jié)約時(shí)間，可以認(rèn)為，超聲提取5min可以滿足檢測(cè)要求。

3.2分析條件的選擇

在適當(dāng)?shù)纳V條件下，先用全掃描模式對(duì)濃度為1.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液進(jìn)行掃描，得到各人工麝香質(zhì)譜圖后，選擇質(zhì)荷比較大、豐度比較高的進(jìn)行MRM模式檢測(cè)。圖2為5種人工麝香標(biāo)準(zhǔn)溶液MRM圖。

（a.葵子麝香，b.西藏麝香，c.二甲苯麝香，d.傘花麝香，e.酮麝香）

3.3線性關(guān)系、檢出限、回收率及精密度

在上述儀器條件下對(duì)5種人工麝香濃度為0.050～1.0 μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液建立標(biāo)準(zhǔn)曲線，線性方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限見(jiàn)表4。

以購(gòu)買(mǎi)的陰性含乳飲料為試驗(yàn)樣品，添加5種人工麝香，添加水平分別為20、40、200 μg/kg，以正己烷為提取溶劑，超聲提取5min，通過(guò)GC-MS/MS測(cè)定其回收率，結(jié)果見(jiàn)表5。由表5可知，含乳飲料中5種人工麝香的回收率在89.1%～101%，相對(duì)偏差在2.09%～5.78%之間，滿足痕量分析要求。

3.4含乳飲料樣品分析

采用本方法對(duì)購(gòu)買(mǎi)的不同品牌/廠家的36份含乳飲料樣品進(jìn)行檢測(cè)，正己烷為提取溶劑，超聲提取5min，內(nèi)標(biāo)法定量，GC-MS/MS檢測(cè)。結(jié)果顯示，所有樣品均未檢出5種人工合成麝香。

4.結(jié)論

本方法采用GC-MS/MS針對(duì)含乳飲料中二甲苯麝香，西藏麝香、葵子麝香、傘花麝香、酮麝香5種人工麝香的含量進(jìn)行測(cè)定，研究了不同提取溶劑、超聲及渦旋振蕩的時(shí)間對(duì)樣品中目標(biāo)化合物回收率的影響。結(jié)果表明，以正己烷為提取溶劑、超聲5min時(shí)的提取效果最好，5種目標(biāo)化合物的回收率均達(dá)到95%以上。本方法二甲苯麝香、葵子麝香的檢出限均為4.0 μg/kg，西藏麝香、傘花麝香、酮麝香的檢出限均為5.0 μg/kg。當(dāng)添加水平分別為20、40、200 μg/kg時(shí)，回收率介于89.1%～101%之間，相對(duì)偏差（n=6）在2.09%～5.78%之間。該方法操作簡(jiǎn)捷、靈敏度高、結(jié)果準(zhǔn)確，能同時(shí)檢測(cè)含乳飲料中5種人工麝香，滿足檢測(cè)需求。

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作者簡(jiǎn)介：

賈亞麗（1993.12）女，漢，河南永城，碩士，助理工程師，食品檢驗(yàn)。

彭露（1995.04）女，漢，四川廣安，碩士，助理工程師，食品檢驗(yàn)。