牛水皰性口炎的診斷與防控

陳立剛

（本溪滿族自治縣農業綜合發展服務中心高官動監所 遼寧本溪 117100）

水皰性口炎是由水皰性口炎病毒引起的一種多種哺乳動物感染的高度接觸性人畜共患病，牛感染后臨床特征性的癥狀為口部、乳頭和蹄部發生水皰[1]。水皰性口炎最早于1821 年發現于馬和騾，常見于牛、豬、馬。

1 發病原因

牛水皰性口炎的病原為水皰性口炎病毒，該病毒屬于彈狀病毒科水皰病毒屬，病毒基因組為RNA，病毒粒子呈子彈狀或圓柱狀，有囊膜，囊膜上有纖突。水皰性口炎病毒的基因組編碼5 種蛋白，分別為糖蛋白（G）、基質蛋白（M）、核蛋白（N）、磷酸蛋白（NS）和RNA 聚合酶大蛋白（L）[2]。通過補體結合試驗和中和試驗將水皰性口炎病毒分為印第安納株和新澤西株兩種血清型，兩種血清型無交叉反應。水皰性口炎病毒可經雞胚接種，接種后的雞胚絨毛尿囊膜有痘斑狀病變，感染的雞胚在1～2d 內死亡。水皰性口炎病毒還可用雞胚成纖維細胞、Vero 進而BHK-21 細胞進行體外增殖。此外，水皰性口炎病毒可在埃及伊蚊、白紋伊蚊、果蠅的體內或體外細胞系中增殖。水皰性口炎病毒對光、高溫、常見消毒劑都較為敏感。水皰性口炎病毒在土壤中可存活數天，在含有50%的甘油緩沖液中4～6℃可存活4～6 個月，凍干的病毒在4～6℃可存活5 個月。0.05%結晶紫、0.1%陽離子表面活性劑、1%甲醛、0.5%乙醇-碘復合物、0.5%氯芐烷胺、0.1%次氯酸鈣、0.1%鄰苯基苯酚復合物均可在15min 內殺死水皰性口炎病毒，1%升汞、3%甲酚皂、1%石炭酸需6h 以上才能殺滅水皰性口炎病毒。

2 流行病學

患病牛或隱性帶毒牛是水皰性口炎病毒的主要傳染源，其他帶病毒的動物如患病的馬、豬，甚至患病的人都可向牛群中傳播水皰性口炎病毒。蚊、白蛉、螨蟲、蚋、庫蠓、虻、果蠅、蟬等昆蟲在自然狀態或試驗條件下均可感染水皰性口炎病毒，其中部分吸血節肢動物可通過叮咬動物使其患病。患病動物的鳥、糞便和乳汁中均為病毒，但病畜的水皰液和唾液中可存在大量的病毒，并在水皰形成前96h 即可通過唾液排出水皰性口炎病毒。除蚊蟲叮咬外，牛個體間的水平傳播途徑包括通過受損傷皮膚或黏膜感染，被病毒污染的飼料和飲水被易感牛攝入后病毒可通過消化道感染牛。牛水皰性口炎病毒具有一定的季節性，多發于蚊蟲活動頻繁的夏季和秋季兩季。我國的水皰性口炎呈散發和地方性流行，僅有少數牛患病，傳染性不強，發病率一般為1.7%～7.6%，并常以良性經過，極少引起病牛死亡。

3 臨床癥狀

水皰性口炎病毒最開始從患病牛損傷的口鼻黏膜、乳頭或蹄部感染，并在皮膚表層進行復制，經2～3d 患病部位開始出現水皰，若繼發感染常波及皮下組織，若無繼發感染可在患病后的14d內痊愈[3]。牛水皰性口炎的潛伏為3～7d，病牛在患病初期體溫升高至40～41℃，精神沉郁，食欲減退，反芻減少，飲欲增加，鼻鏡干燥，耳根發熱，在舌面、唇部出現米粒大的水皰，多個水皰融合成更大的水皰，內含大量黃色水皰液[4]。經1～2d 后水皰破裂，形成潰瘍，后患病部位出現痂皮，脫落后留下鮮紅色的瘢痕。患病牛大量流涎，唾液黏稠，采食困難。水皰還可出現于乳頭和蹄部，與口唇部病變過程基本一致。牛水皰性口炎病程通常為1～2 周，多數病例可在數天內康復，痊愈后病牛狀態良好，病死率極低。

4 診斷方法

首先，應根據當地牛水皰性口炎的流行情況、牛群內是否存在患病牛、患病牛是否接觸過其他病牛等流行病學信息，結合患病牛的臨床癥狀進行臨床診斷，應注意與口蹄疫、牛病毒性腹瀉、牛傳染性鼻氣管炎等同樣可導致病牛出現口部或蹄部水皰潰瘍糜爛等癥狀的疾病進行區分。由于牛水皰性口炎患病癥狀較輕且臨床上通常以良性經過為結局，因此較為容易與其他疾病進行區分。進一步確診可采集樣品送至獸醫實驗室進行水皰性口炎病毒檢測。可采集患病牛病變部位的痂皮、水皰皮、水皰液等樣品，放入50%甘油鹽水中保存，也可采集水皰拭子、口鼻拭子、咽喉洗液等，上述樣品均用于水皰性口炎病毒的病原檢測[5]。也可采集患病牛的血液或血清進行血清學檢測。病毒學檢測水皰性口炎病毒的方法有病毒的分離鑒定、電鏡檢測和動物接種試驗等。可將水皰皮或痂皮等進行研磨，加入生理鹽水制成10%的懸液后過濾除菌，也可用水皰液稀釋后過濾除菌，之后將上述樣品液體接種至7～13 日齡的雞胚尿囊膜或尿囊腔，水皰性口炎病毒可導致雞胚在接種后1～2d 內死亡。并且胚體有明顯的充血或出血病變。之后收集病死雞胚的尿囊液，也可再次接種雞胚進行傳染，后通過分子生物或免疫學檢測方法檢測水皰性口炎病毒。分子生物學檢測水皰性口炎病毒的方法有RT-PCR、熒光定量RT-PCR、基因芯片技術等，其中RT-PCR是實驗室較為常用的檢測方法，可通過擴增水皰性口炎病毒保守性基因序列鑒定該病毒，也可通過不同血清型的特異性基因序列區分水皰性口炎新澤西株和印第安納株。血清學檢測水皰性口炎病毒又分為抗原檢測和抗體檢測，抗原檢測有補體結合試驗、熒光抗體染色試驗、間接夾心ELISA 試驗等，抗體檢測方法有補體結合試驗、中和試驗、液相阻斷ELISA 等。其中間接ELISA 是診斷水皰性口炎的常用方法，可用于水皰性口炎病毒的血清型鑒定，也可與其他水皰性疾病進行區分。

5 防治措施

牛水皰性口炎一般均可自愈，因此可不做任何處理。但為了促進病牛康復，防止病牛繼發感染其他疾病，可根據患病牛的臨床癥狀進行治療。臨床上可使用清水、食醋、0.1%高錳酸鉀清洗病牛口腔患病部位，糜爛面可涂抹1%明礬、碘甘油或冰硼散進行治療。蹄部可使用高錳酸鉀或甲酚皂溶液進行清洗后涂抹松餾油或魚石脂軟膏。乳房可使用2%硼酸溶液進行清洗后涂抹紅霉素或青霉素軟膏。目前，無針對水皰性口炎病毒的特效治療藥物。由于患病牛口部出現病變后采食困難，應喂食質地較軟的飼料或牧草，做好護理工作，待其癥狀緩解后再逐步更換為正常的飼料。

牛水皰性口炎的防控方面，應以生物安全管理為主。在生物安全防控方面，應采取綜合性的牛群管理措施。首先，應降低牛接觸水皰性口炎病毒的概率。對于規模較大的牛場或有一定養殖基礎的牛場可采取自繁自養和全進全出的養殖模式，防止引入病牛從而導致牛水皰性口炎病毒在牛群中擴散。對于需要引進新牛的牛場尤其肉牛場應做好引入牛牛場的資格審查、疫病檢疫工作，在新牛引進后采取隔離飼養的方式，隔離期為30d 左右，期間觀察引進牛的狀態，有條件的養殖場也可再次進行疫病檢測。牛場工作人員也可能成為傳染源將水皰性口炎病毒帶入牛場，因此應做好人員入場前和入舍前的更衣、沐浴消毒工作，并且在牛場內劃定污染區、潔凈區和過渡區，從污染區進入潔凈區應先進入過渡區消毒。車輛進入牛場前也應對車的輪胎、車身等進行消毒。螨蟲、蚊、蠅等動物也可通過叮咬牛傳播水皰性口炎病毒，因此在夏秋兩季蚊蟲活動的時期定期進行牛場內的驅蟲工作，可采用物理滅蚊燈、使用殺蟲藥殺蟲等，減少牛舍內蚊蟲數量。其次，還要做好牛群內的水皰性口炎病毒的監測工作和病牛的處理工作。在夏秋兩季要注意牛群內的牛是否出現口部、蹄部和乳房水皰，發現出現該癥狀的病牛應及時隔離，進行發病原因的診斷，尤其是與口蹄疫進行區分。當確診為水皰性口炎病毒引起牛水皰性口炎后進行對癥治療，可能接觸病牛的其他牛也應隔離飼喂，以防水皰性口炎病毒在牛群內傳播。對于患病牛使用的圈舍、養殖器具等進行消毒，尤其是可能被病牛舔舐或唾液污染的物品更應進行全面的消毒。若病牛繼發感染其他疾病導致臨床癥狀惡化，應及時淘汰病牛并采取深埋、焚燒或化學銷毀等無害化處理方式處理病牛。

6 結語

牛水皰性口炎是一種接觸性的人畜共患病，雖然對牛的影響相對較小，并且病牛可自行康復，但仍需要牛場工作人員引起注意，一方面防止該病在牛群內大規模擴散，以免免疫力低下的牛出現更為嚴重的癥狀，另一方面也防止牛場工作人員感染該病毒發病。對于水皰性口炎病毒仍存在較多的知識缺口，如病毒的傳播機制和致病機制，以及目前仍無特效的抗水皰性口炎病毒的藥物，因此獸醫科研工作者應繼續開展有關水皰性口炎病毒的基礎研究以及疫苗、藥物和診斷方法的應用研究，從而為牛水皰性口炎的防控工作奠定基礎。