支氣管哮喘患兒的血清NAMPT、HIF-2α水平及其與急性發(fā)作期疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系、診斷重度急性發(fā)作的價(jià)值▲

黃運(yùn)麗 劉冠彬 杜 茹 王順蘭 王雅玲

(洪湖市人民醫(yī)院兒科，湖北省洪湖市 433200)

支氣管哮喘是兒童時(shí)期最常見(jiàn)的慢性氣道疾病，表現(xiàn)為反復(fù)發(fā)作的喘息、咳嗽、氣促、胸悶等，多在夜間和凌晨發(fā)作或加劇，近年來(lái)其發(fā)病率呈增長(zhǎng)趨勢(shì)，嚴(yán)重影響患兒的身心健康，因此，有效評(píng)估支氣管哮喘患兒的病情對(duì)其治療和預(yù)后具有重要的意義[1-2]。煙酰胺磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶(niacinamide phosphoribose transferase，NAMPT)具有調(diào)節(jié)尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸合成的作用，還參與炎癥反應(yīng)、血管生成等，在急性肺損傷、肺炎等呼吸系統(tǒng)疾病中發(fā)揮重要作用[3-4]。缺氧誘導(dǎo)因子 2α(hypoxia inducible factor 2α，HIF-2α)是機(jī)體在低氧條件下應(yīng)對(duì)氧氣濃度變化的轉(zhuǎn)錄因子，缺氧可導(dǎo)致HIF-2α表達(dá)上調(diào)，主要影響內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和分化，對(duì)機(jī)體的血管生長(zhǎng)、能量代謝等具有重要的調(diào)控作用[5-6]。因此，本研究探討支氣管哮喘患兒血清NAMPT、HIF-2α水平，并分析其與急性發(fā)作期疾病嚴(yán)重程度的關(guān)系，以及二者診斷支氣管哮喘患兒重度急性發(fā)作的價(jià)值。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2018年9月至2021年8月在我院住院治療的236例支氣管哮喘患兒，其中男童125例、女童111例，年齡9個(gè)月至12歲[(6.70±1.68)歲]。納入標(biāo)準(zhǔn)：(1)患兒均符合《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》[7]中支氣管哮喘的診斷標(biāo)準(zhǔn)；(2)支氣管激發(fā)試驗(yàn)或運(yùn)動(dòng)激發(fā)試驗(yàn)陽(yáng)性；(3)年齡≤12歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：(1)合并慢性上氣道咳嗽綜合征、呼吸道支氣管發(fā)育畸形、肺結(jié)核等的患兒；(2)合并慢性感染性疾病的患兒；(3)合并嚴(yán)重心、肝、腎疾病或其他疾病的患兒；(4)臨床資料不全者。按照是否處于急性發(fā)作期[7]將患兒分為急性期組141例(處于急性發(fā)作期)與緩解期組95例(處于緩解期)，再根據(jù)支氣管哮喘急性發(fā)作的嚴(yán)重程度分級(jí)[7]將急性期組患兒分為輕度組58例、中度組50、重度組33例。另選取同期在我院進(jìn)行體檢的100例健康兒童(無(wú)支氣管哮喘家族史、過(guò)敏史等)作為對(duì)照組，其中男童54例、女童46例，年齡9個(gè)月至12歲[(6.90±1.60)歲]。本研究經(jīng)過(guò)我院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)批準(zhǔn)，受試兒童家屬或監(jiān)護(hù)人均對(duì)本研究知情同意并簽署知情同意書(shū)。

1.2 研究方法

1.2.1 收集一般臨床資料：收集受試兒童的一般臨床資料，包括性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)、過(guò)敏史、家族過(guò)敏史、支氣管哮喘家族史、嗜酸性粒細(xì)胞百分比、血清總IgE水平等。

1.2.2 檢測(cè)血清NAMPT、HIF-2α水平：采集受試兒童清晨空腹靜脈血5 mL，室溫下靜置1 h后，常溫下以3 000 r/min離心10 min后取上清液置于凍存管，置于-80 ℃保存?zhèn)溆谩２捎肊LISA檢測(cè)血清NAMPT、HIF-2α水平，嚴(yán)格按照ELISA試劑盒(泉州市科諾迪生物科技有限公司，批號(hào)：KL-16773、KL19471)說(shuō)明書(shū)進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.3 檢查肺功能指標(biāo)：采用AS-507型肺功能檢查儀(MINATO公司)檢測(cè)急性期組患兒的肺功能指標(biāo)，包括第1秒用力呼氣容積占預(yù)計(jì)值百分比(the percentage of forced expiratory volume in the first second to the predicted value，F(xiàn)EV1%)、第1秒用力呼氣容積占用力肺活量百分比(the percentage of FEV1to forced vital capacity，F(xiàn)EV1/FVC)、最大呼氣峰流速(peak expiratory flow，PEF)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。計(jì)數(shù)資料以例數(shù)和百分比表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；符合正態(tài)分布的計(jì)量資料以(x±s)表示，兩組間比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，多組間比較采用方差分析，進(jìn)一步兩兩比較采用SNK-q檢驗(yàn)；采用Pearson檢驗(yàn)分析急性發(fā)作期支氣管哮喘患兒血清NAMPT、HIF-2α水平與肺功能指標(biāo)的相關(guān)性；采用受試者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲線分析血清NAMPT、HIF-2α水平對(duì)支氣管哮喘患兒重度急性發(fā)作的診斷價(jià)值，曲線下面積>0.7表示具有一定的診斷效能，數(shù)值越高效能越好。以P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 3組一般臨床資料的比較 3組兒童的性別、年齡、體質(zhì)指數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞百分比比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)；急性期組和緩解期組患兒的過(guò)敏史、家族過(guò)敏史、支氣管哮喘家族史比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，對(duì)照組、緩解期組、急性期組的血清總IgE水平依次升高(均P<0.05)。見(jiàn)表1。

表1 3組一般臨床資料的比較

2.2 3組血清NAMPT、HIF-2α水平的比較 對(duì)照組、緩解期組、急性期組的血清NAMPT、HIF-2α水平均依次升高(均P<0.05)。見(jiàn)表2。

表2 3組血清NAMPT、HIF-2α水平的比較(x±s)

2.3 不同嚴(yán)重程度急性期組患兒血清NAMPT、HIF-2α水平及肺功能指標(biāo)的比較 輕度組、中度組、重度組患兒的血清NAMPT、HIF-2α水平均依次升高，F(xiàn)EV1%、FEV1/FVC、PEF均依次降低(均P<0.05)。見(jiàn)表3。

表3 不同嚴(yán)重程度急性期組患兒血清NAMPT、HIF-2α水平及肺功能指標(biāo)的比較(x±s)

2.4 急性期組患兒血清NAMPT、HIF-2α水平與肺功能指標(biāo)的相關(guān)性 急性期組患兒的血清NAMPT、HIF-2α水平與FEV1%、FEV1/FVC、PEF均呈負(fù)相關(guān)(均P<0.05)。見(jiàn)表4。

表4 急性期組患兒血清NAMPT、HIF-2α水平與肺功能指標(biāo)的相關(guān)性

2.5 血清NAMPT、HIF-2α水平對(duì)支氣管哮喘患兒重度急性發(fā)作的診斷價(jià)值 ROC曲線分析顯示，血清NAMPT水平診斷支氣管哮喘患兒重度急性發(fā)作的曲線下面積為0.810(P<0.001，95%CI：0.736,0.871)，截?cái)嘀禐?8.39 ng/mL，靈敏度為84.85%，特異度為81.48%；血清HIF-2α水平診斷支氣管哮喘患兒重度急性發(fā)作的曲線下面積為0.851(P<0.001，95%CI：0.781,0.905)，截?cái)嘀禐?8.95 pg/mL，靈敏度為78.79%，特異度為83.33%；二者聯(lián)合診斷支氣管哮喘患兒重度急性發(fā)作的曲線下面積為0.902(P<0.001，95%CI：0.840,0.945)，靈敏度為85.11%，特異度為87.04%。見(jiàn)圖1。

圖1 血清NAMPT、HIF-2α水平單獨(dú)及聯(lián)合診斷支氣管哮喘患兒重度急性發(fā)作的ROC曲線

3 討 論

支氣管哮喘是由多種因素導(dǎo)致的，炎癥細(xì)胞及炎性細(xì)胞因子介導(dǎo)的慢性炎癥性疾病，其全球患病率為1%～16%，我國(guó)患病率約為2%，早期診斷和治療對(duì)于降低支氣管哮喘的致殘率和病死率具有重要價(jià)值[8-9]。

研究表明，NAMPT在肺損傷、急性呼吸窘迫綜合征、肺癌等多種肺部疾病的發(fā)生、發(fā)展中發(fā)揮作用[10-12]。NAMPT分泌到血液中可以起到細(xì)胞酶的作用，通過(guò)連接Toll樣受體4激活核因子-κB信號(hào)傳導(dǎo)通路，可作為炎癥性肺疾病的生物標(biāo)志物[13]。Wu等[14]發(fā)現(xiàn)，在脂多糖誘導(dǎo)的急性肺損傷小鼠模型中，干擾NAMPT/內(nèi)脂素表達(dá)可激活磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B信號(hào)通路，從而通過(guò)調(diào)節(jié)自噬因子的表達(dá)水平，降低急性肺損傷肺泡上皮細(xì)胞凋亡率和自噬水平，減少肺部組織損傷，對(duì)肺組織產(chǎn)生保護(hù)作用。以上研究結(jié)果表明NAMPT與肺損傷的嚴(yán)重程度有關(guān)。HIF-2α主要表達(dá)于肺臟、腎臟、血管內(nèi)皮細(xì)胞等，通過(guò)刺激血管生成因子(如血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子、血管生成素、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體、整合素等)的表達(dá)在血管生成中發(fā)揮重要作用[15-16]。低氧可增加內(nèi)皮細(xì)胞的HIF-2α表達(dá)水平，促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移，引起肺血管重塑和肺動(dòng)脈高壓[17]。王健富等[18]發(fā)現(xiàn)，在腎臟缺血再灌注損傷小鼠模型中，降低巨噬細(xì)胞中HIF-2α的表達(dá)水平，可減少促炎因子(腫瘤壞死因子α、γ-干擾素) 的分泌且增加抑炎因子(白細(xì)胞介素10)的分泌，從而減輕腎臟缺血再灌注損傷。董小鋒等[19]發(fā)現(xiàn)，HIF-2α可通過(guò)血管生成素-2調(diào)控缺氧下內(nèi)皮細(xì)胞的血管形成，并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞分泌的血管生成素-2促進(jìn)肝癌細(xì)胞遷移。由此可見(jiàn)，HIF-2α在缺氧條件下可調(diào)節(jié)炎性因子與內(nèi)皮細(xì)胞血管生成。本研究結(jié)果顯示，對(duì)照組、緩解期組、急性期組的血清NAMPT、HIF-2α水平均依次升高(均P<0.05)，提示NAMPT、HIF-2α可能參與支氣管哮喘的發(fā)生；輕度、中度、重度哮喘患兒的血清NAMPT、HIF-2α水平均依次升高，F(xiàn)EV1%、FEV1/FVC、PEF均依次降低，且急性期組患兒的血清NAMPT、HIF-2α水平與FEV1%、FEV1/FVC、PEF均呈負(fù)相關(guān)(均P<0.05)，提示NAMPT、HIF-2α可能參與支氣管哮喘的急性發(fā)作，與急性發(fā)作期支氣管哮喘患兒的病情嚴(yán)重程度有關(guān)，或可成為評(píng)價(jià)支氣管哮喘患兒疾病進(jìn)展的指標(biāo)。

本研究ROC曲線結(jié)果顯示，血清NAMPT、HIF-2α水平單獨(dú)診斷支氣管哮喘患兒重度急性發(fā)作具有一定的價(jià)值，但診斷效能中等(曲線下面積均<0.9)，而二者聯(lián)合診斷支氣管哮喘患兒重度急性發(fā)作的曲線下面積為0.902，靈敏度為85.11%，特異度為87.04%，提示聯(lián)合檢測(cè)血清NAMPT、HIF-2α水平，可進(jìn)一步提高支氣管哮喘患兒重度急性發(fā)作的診斷效能。

綜上所述，支氣管哮喘患兒血清NAMPT、HIF-2α水平升高，在支氣管哮喘急性發(fā)作期升高更明顯，且二者均與支氣管哮喘患兒急性發(fā)作時(shí)的嚴(yán)重程度有關(guān)，均可用于支氣管哮喘患兒重度急性發(fā)作的輔助診斷，且二者聯(lián)合應(yīng)用時(shí)的診斷效能更高。