砂糖桔黃龍病防治技術中有機磷農藥殘留分析

砂糖桔黃龍病為我國植物重點檢疫常見病害項目之一。我國大部分區域的砂糖桔黃龍病均是通過農藥給予控制的，然而農藥的頻繁使用會造成土壤中有機磷農藥含量過高，進而對土壤產生嚴重不良影響。為保證砂糖桔的食用安全與持續的生長發育，有必要對黃龍病防治技術過程中有機磷農藥殘留進行檢測與詳細分析，嚴格控制化學藥物的使用劑量，確保有機磷農藥未超出國家食品安全標準，使土壤與砂糖桔呈現健康狀態，同時保障大眾的生命健康。

引言

砂糖桔黃龍病，又稱為黃梢病，其能夠破壞整片桔樹健康生長狀態，是柑橘主要病害現象。黃龍病傳播的主要方式是柑橘木虱從病株吸取汁液，通過唾液侵染到健康樹冠，從而誘發病害。砂糖桔黃龍病初期癥狀為樹冠常現均勻性黃化葉片，或在葉脈底部或葉片邊緣附近呈現無規律的黃綠色斑駁區域，伴隨淀粉沉積現象;在發病中期，病枝長出新葉片，叫作“插金花”，其主脈和側脈依舊為綠色，而葉肉部分則泛黃嚴重;后期，新梢抽牙艱難，葉片病變癥狀顯著，部分葉片出現下落，枝條自上而下干枯，病枝木質部部分或全部呈現出玫瑰色，最終整株凋亡。

1. 基本防治方法

黃龍病的感染發生在柑橘芽萌發早期，并傳播到果園。病害接穗和幼苗的傳播是病害遠距離傳播的主要途徑。疾病傳播的速度取決于木虱種群數量和帶菌率，其發病率和病情與許多因素有關。幼樹容易生病，樹勢強，抗病性強，病樹多;木虱數量越多，黃龍病就越普遍，且春梢病較輕，夏、秋梢病較重。

砂糖桔黃龍病的傳播途徑是柑桔木虱，防治該病必須清除柑桔木虱，在幼芽期可用25%殺滅快1000倍，或4.5%好綠微乳劑1500倍，或20%頑蟲敵1500噴藥護梢，并及時根除病株和苗木，徹底消滅病原。然而因農藥防治技術會致使土壤中殘留一定量的有機磷農藥，為了食品的安全性，需對有機磷農藥殘留狀況有細致的了解，便于采取相應的治理措施及方案來解決問題。

2. 黃龍病防治過程中殘留的有機磷農藥

2.1材料與方法

（1）設備準備

NY-16DA農藥殘留檢測儀、電子天平、高效無管道凈氣型通風柜、氣相色譜儀、石英毛細管柱、冷凍離心機、液氮罐、鼓風干燥柜、超聲波清洗器等。

（2）試劑準備

無水氯化鈉、丙酮、乙腈、甲醇和正己烷以及有機磷農藥。目前，有機磷農藥已成為我國農業防治病蟲害的常用產品，其種類眾多，其中典型代表為敵敵畏、毒死蜱、辛硫磷、馬拉硫磷、噻唑磷等，產品純度均大于99%，且要在4℃恒溫條件下進行保存。

（3）試驗方法

使用上述試劑，對農業研究基地的砂糖桔果肉和果皮開展有機磷農藥檢測。如果有機磷農藥殘留量低于國家食品安全標準，則表明未合格產生。此外，還對未采取控制措施的果園進行了水果和土壤試驗比較。

①農藥殘留檢測儀重點對有機磷、氨基甲酸脂類等農藥殘留物檢測。測試結果定性定量均可，定性顯示結果為抑制率，定量顯示結果為mg/kg。抑制率顯示和測量范圍：0-100%、農藥定量含量測量范圍：0-20mg/kg、透射比準確性≤±1.5%、透射比重復性吸光度（A）≤0.005（0.5%）。預熱20min后，光電流3min內漂移引起的透射比（T）值變化不超過1.0%（或吸光度（A）值0.005）。

②氣相色譜條件，取管柱內樣品，進行加熱試驗，初始溫度為80℃，維持大約1min時間，然后進行預熱，每分鐘加熱10℃，直至250℃，恒溫形態大約維持10min。載氣流速為0.8ml/min，尾氣流速為10.0ml/min，氫氣流速為40.0ml/min，空氣流速為400.0ml/min，進樣量為1μL。結合定性保留時間，用外標法定量峰面積。

③有機磷農藥溶液的制備，應用上述所列出的有機磷農藥，再用丙酮對其進行稀釋，以準確得到各種混合溶液，將其分別置于10ml器皿中，固定丙酮體積，進行充分均勻混合，并制備不同濃度的0.05-0.50μg/ml溶液，每種樣品一式三份。

④樣品制備，分別取1kg砂糖桔和土壤作為樣品，冷凍干燥，再將獲得的土壤進行研磨，并通過100目篩。再取5g過篩樣品，置于50ml離心管中，隨后注入2ml的水，再添加10ml乙腈，進行充分、均勻混合后，再添入0.5g氯化鈉，再實施充分、均勻混合，后于超聲波中靜置15min，使乙腈與水分層，并除去乙腈層，再利用10ml乙腈執行二次萃取操作，合并過濾乙腈層，置于離心管中，樣品制備完成。

2.2 結果與分析

2.2.1有機磷混合溶液色譜

將濃度設為每毫升0.20μ。結果顯示，上述五種有機磷農藥在約25min均能夠完成分離，并無干擾源。可見，構建的色譜條件與此次分析試驗相適應，且滿足砂糖桔黃龍病的檢測基本要求。

2.2.2標準曲線與檢出限

試驗結果顯示，上述有機磷農藥的標準曲線關系均高于0.999，利用S/N計算的檢測限，作為最低檢測濃度，檢測限大約平穩在0.01-0.08μg/ml左右，線性范圍控制在0.05-0.50μg/ml，滿足砂糖桔黃龍病的檢測基本要求。相關回歸方程、相關系數、線性范圍及檢出限（見下表1）。

2.2.3精密度試驗

取5.0g樣品粉末，加入到0.1ml標準混合儲備液之中，予以充分均勻的攪拌后，再依照上述樣品處理方法來制備所需試驗的溶液，按照構建的色譜條件予以分析，精確測量參考樣品的峰面積與精密度。結果表明，該儀器的精密度RSD<2.98%，具有良好的精密度。

平均RSD詳見下表2。

2.2.4重現性試驗

共取5份5.0g粉末樣品，精密加入0.1ml混合標準儲備液，予以充分均勻的攪拌后，按上述項下樣品處理方法制備所需溶液，同時按照照構建的色譜條件予以分析，計算方法的重復性和平均RSD如表2所示。結果表明，重復性RSD<2.78%，計算計方法具備用良好的重現性。

2.2.5樣品回收率

將樣品混合物分成9份，每份5.0g，分為三組：低、中、高。添加不同量的有機磷農藥進行比較。按上述制樣處理方法配制溶液，計算有機磷農藥的回收率。通過反復試驗發現，在不同溶液、不同提取措施的有機磷農藥之中，乙腈超聲提取方案最簡單、便捷且效果顯著。經純化后，通過濾膜即可測定。結果表明，黃龍病防治方法中，有機磷農藥的回收率為87%-105%，滿足實際應用需求。

2.2.6 樣品檢測

根據上述樣品處理方法，通過色譜條件進行檢測，結合不同保留時間的定性研究和峰面積外標法定量測定。每個樣品分為3部分，以計算不同種類有機磷農藥的殘留量，并取每個樣品的平均值。在檢測過程中，所殘留的有機磷農藥不會對砂糖桔及其果皮造成影響，且其對土壤污染不顯著，在土壤中殘留的有機磷農藥均符合國家食品安全標準。在土壤中檢測到少量毒死蜱，其含量<1mg/kg，滿足有機磷農藥柑橘最大殘留標準，低于標準值，對土壤無污染影響。

3. 討論

隨著農業技術的不斷更迭，經農技部門多年深化研究，總結出以下幾種非農藥的黃龍病防治措施，能夠從本質上降低有機磷農藥使用過多造成的食品污染及安全問題。①強化果樹檢疫。鑒于砂糖桔黃龍病現象頻出，有必要進行劃分區域管理，分成疫區與非疫區，采用病樹隔離措施，預防黃龍病植物與健康樹接觸，感染正片非疫區。砂糖桔在種植過程中遭到柑橘木虱的病毒傳播危險，柑橘木虱可通過唾液攜帶病原體侵入健康樹。因此，必須做好砂糖桔樹檢疫工作，強化對柑桔木虱的防治，以免病毒蔓延，造成不可挽回的損失。此外，柑橘木虱的防治工作于每年的4-10月進行，可使用低毒藥物防止病原體的持續、廣泛傳播。②深化栽培管理制度。由于過多的應用有機磷農藥，會對食品安全與大眾健康安全存在著一定的威脅，需盡量采取有效的針對性預防措施，并進行細致化管理，在最大程度上減少黃龍病危害。一是做好砂糖桔栽培管理，增加植物抗病性，防止出現黃龍病的到處傳播和蔓延的惡劣情況;二是針對病發砂糖桔樹木，務必及時實施挖掘、砍伐措施，清理病果，清除病原菌，并即刻進行病株焚燒措施。此外，對于砂糖桔栽培工作，在種植過程要科學施肥，提高砂糖桔樹抗病能力。依據各地的氣候特征以及砂糖桔的生長規律，做好冬肥、春肥的及時施用。冬季肥料主用于砂糖桔收獲7天后，每棵果樹施0.4kg45%的復合肥（N∶ P∶K=1∶0.5∶1）。每年2月下旬-3月上旬施春肥，每棵果樹施0.3kg復合肥，保證果樹生長需要;12月-次年3月，利用99%200倍綠顆乳油實施消毒2次，同時需做好其他病蟲害防治。③提升人工檢查頻率。每年組織技術人員對砂糖桔園進行定期檢查，并結合種植地區黃龍病的發生頻率與規律，尤其是在秋梢成熟和果實變色階段，提高檢測頻率，以便及時了解黃龍病的發生時間及病情進展。同時，盡早排查整個砂糖桔園，設置隔離帶，保證砂糖桔基地其他健康樹木不受黃龍病感染。

結語

此次試驗采用有機磷農藥噴灑病枝，采用抑蟲、殺菌、營養液滴入樹干、空洞中，以此來防治黃龍病，其操作便捷，成本費用較低，效果明顯。同時，通過檢測證明了采用有機磷農藥治理砂糖桔樹木病害，所殘留的有機磷農藥不會對砂糖桔及其果皮造成影響，且其對土壤污染十分微小，在土壤中殘留的有機磷農藥均符合國家食品安全標準。此次研究結果，為果農及時止損，幫助脫貧致富，并對其他地區防治黃龍病措施有著指導作用，可大范圍實施推廣應用。

作者簡介：

鄭麗（1975.4-），女，廣西荔浦人，漢族，工程師，本科，研究方向：農藥殘留分析。