50%酰嘧磺隆水分散粒劑高效液相色譜分析方法研究

王詩(shī)雨，宋 朋，高勝健，張保建，趙廣義*

(1.中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)理學(xué)院，北京 100193；2.山東威瑞信試驗(yàn)檢測(cè)有限公司，山東 濟(jì)南 250119)

1 前言

酰嘧磺隆英文名稱：Amidosulfuron，CAS號(hào)：120923-37-7，分子式：C9H15N5O7S2，化學(xué)名稱：3-(4,6-二甲氧基嘧啶-2-基)-1-(N-甲基-N-甲基磺酰氨基磺酰)-脲。酰嘧磺隆是一種選擇性內(nèi)吸除草劑，被葉面和根系吸收后傳導(dǎo)至植株全身，抑制植物生長(zhǎng)，開始是頂向，然后是根向出現(xiàn)萎斑。主要用于用于冬小麥、硬質(zhì)小麥、大麥、黑麥、黑小麥、燕麥等作物苗后防除多種闊葉雜草尤其是豬殃殃。酰嘧磺隆在土壤中易被土壤微生物分解，不易在土壤中殘留積累，在推薦劑量下，對(duì)當(dāng)茬麥類作物和下茬作物安全。

目前國(guó)內(nèi)有關(guān)酰嘧磺隆水分散粒劑的分析方法未見公開報(bào)道。本文采用高效液相色譜法對(duì)50%酰嘧磺隆水分散粒劑進(jìn)行定量分析，該方法操作簡(jiǎn)便快捷，分離效果好，精密度和準(zhǔn)確度均能達(dá)到定量分析的要求。

2 試驗(yàn)部分

2.1 試劑和溶液 乙腈(色譜純)；超純水(電阻率18.2MΩ·cm，25℃)；磷酸(分析純)；磷酸溶液：ψ(磷酸:水)=1:1 000；酰嘧磺隆標(biāo)樣，已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)99.7%；50%酰嘧磺隆水分散粒劑。

2.2 儀器 高效液相色譜儀：日立Primaide，具有二極管陣列檢測(cè)器和自動(dòng)進(jìn)樣器；日立色譜工作站；色譜柱：250mm×4.6mm(i.d.)不銹鋼柱，內(nèi)裝ZORBAX SB-C18、5μm填充物。

2.3 液相色譜操作條件 流動(dòng)相：ψ(乙腈:磷酸溶液)=50+50(V/V)；流量：1.0mL/min；柱溫：30±2℃；檢測(cè)波長(zhǎng)：254nm；進(jìn)樣體積：10μL；保留時(shí)間：酰嘧磺隆約5.7min。典型的酰嘧磺隆標(biāo)樣和50%酰嘧磺隆水分散粒劑的高效液相色譜圖(圖1、2)。

圖1 酰嘧磺隆標(biāo)樣高效液相色譜圖

圖2 50%酰嘧磺隆水分散粒劑高效液相色譜圖

2.4 測(cè)定步驟

2.4.1 標(biāo)樣溶液的配制 稱取0.05g酰嘧磺隆標(biāo)樣(精確至0.000 1g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。

2.4.2 試樣溶液的配制 稱取含酰嘧磺隆0.05g的試樣(精確至0.0001g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取上述溶液5mL，置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，過濾。

2.4.3 測(cè)定 在上述操作條件下，待儀器基線穩(wěn)定后，連續(xù)注入數(shù)針標(biāo)樣溶液，直至相鄰2針標(biāo)樣溶液的響應(yīng)值相對(duì)變化<1.5%后，按照標(biāo)樣溶液、試樣溶液、試樣溶液、標(biāo)樣溶液的順序進(jìn)行測(cè)定。

2.4.4 計(jì)算 將測(cè)得的2試樣溶液以及試樣前后2針標(biāo)樣溶液中酰嘧磺隆峰面積分別進(jìn)行平均。試樣中酰嘧磺隆的質(zhì)量分?jǐn)?shù)ω(%)，按式(1)計(jì)算：

(1)

式中：

A1——標(biāo)樣溶液中酰嘧磺隆峰面積的平均值；

A2——試樣溶液中酰嘧磺隆峰面積的平均值；

m1——標(biāo)樣的質(zhì)量，g；

m2——試樣的質(zhì)量，g；

P——標(biāo)樣中酰嘧磺隆的質(zhì)量分?jǐn)?shù)，%。

3 結(jié)果與討論

3.1 色譜條件的選擇 通過日立Primaide高效液相色譜儀的光譜數(shù)據(jù)采集功能，獲得酰嘧磺隆的紫外波長(zhǎng)掃描圖(圖3)。從圖中可以看到酰嘧磺隆最大吸收波長(zhǎng)在235nm～260nm處，為了提高靈敏度，減少干擾，滿足分析的要求，故將檢測(cè)波長(zhǎng)確定為254nm。

圖3 酰嘧磺隆的紫外光譜圖

色譜柱選擇250mm×4.6mm(i.d.)ZORBAX SB-C18、5um的不銹鋼柱。根據(jù)酰嘧磺隆物化性質(zhì)和溶劑的紫外吸收波長(zhǎng)，選擇乙腈作為溶劑溶解樣品，并以乙腈和水作為流動(dòng)相，為了得到更好的分離效果和峰形，在1 000mL水里加入1mL磷酸。將流動(dòng)相按不同比例在色譜柱上進(jìn)行試驗(yàn)，隨著乙腈比例的增加，保留時(shí)間減小，當(dāng)乙腈與0.1%磷酸水溶液比例達(dá)到55 : 45時(shí)，有雜質(zhì)峰干擾，峰純度達(dá)不到試驗(yàn)要求，最終選擇Ψ(乙腈: 0.1%磷酸水溶液)=50: 50作為流動(dòng)相，流速1.0mL/min。該條件下，酰嘧磺隆色譜峰峰形較好，與雜質(zhì)能完全分離，具有良好的精密度和準(zhǔn)確度，并且分析時(shí)間較短，提高了工作效率。

3.2 分析方法的特異性試驗(yàn) 將2.4.1、2.4.2配制的酰嘧磺隆標(biāo)樣溶液和試樣溶液，在上述色譜操作條件下進(jìn)行全波段掃描、峰純度分析。結(jié)果表明標(biāo)樣溶液和試樣溶液中酰嘧磺隆峰純度均>990，有效成分出峰處無其他物質(zhì)干擾，符合定量分析要求。

3.3 分析方法的線性相關(guān)性試驗(yàn) 稱取0.05g酰嘧磺隆標(biāo)樣(精確至0.000 1g)，置于50mL容量瓶中，加入20mL乙腈，超聲波振蕩5min，冷卻至室溫，用乙腈稀釋至刻度，搖勻。用移液管移取3、4、5、6、7mL上述溶液，分別置于50mL容量瓶中，用乙腈稀釋至刻度，搖勻，配置成5個(gè)不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，以酰嘧磺隆質(zhì)量濃度為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(圖4)，得到酰嘧磺隆線性回歸方程為y=70 299x+25 791，線性相關(guān)系數(shù)為0.999 9。

圖4 酰嘧磺隆線性關(guān)系圖

3.4 分析方法的精密度試驗(yàn) 從同一產(chǎn)品中準(zhǔn)確稱取5個(gè)試樣，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，測(cè)得酰嘧磺隆的標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.23，變異系數(shù)為0.47%(表1)。

表1 分析方法的精密度試驗(yàn)結(jié)果

3.5 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn) 從已知質(zhì)量分?jǐn)?shù)(48.99%)的酰嘧磺隆水分散粒劑中稱取5個(gè)試樣，分別加入一定量的酰嘧磺隆標(biāo)樣(99.7%)，在上述色譜操作條件下進(jìn)行分析，測(cè)得酰嘧磺隆的平均回收率為99.90%(表2)。

表2 分析方法的準(zhǔn)確度試驗(yàn)結(jié)果

4 結(jié)論

本文建立了酰嘧磺隆水分散粒劑有效成分含量測(cè)定的高效液相色譜分析方法，試驗(yàn)結(jié)果表明，本方法分離效果好、線性關(guān)系良好，具有較高的精密度和準(zhǔn)確度，分析操作簡(jiǎn)便快捷，是酰嘧磺隆水分散粒劑產(chǎn)品質(zhì)量控制較為理想的分析方法。