急性腦梗死患者血清小凹蛋白-1水平的變化及意義

李才明 陳禮錕 孔令恩 張停亭 莊順芝 邱志維 黃愛鄭

（1.惠州市第一人民醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，廣東 惠州 516003；2.東莞東華醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，廣東 東莞 52300）

Caveolae是1953年由美國生物學(xué)家在電子顯微鏡觀內(nèi)皮細(xì)胞下被發(fā)現(xiàn)的一種小窩結(jié)構(gòu)，主要由脂類和蛋白質(zhì)組成，其胞質(zhì)面由一層膜外衣覆蓋[1]。小凹蛋白（Cav）主要成分有三種，分別為Cav-1，Cav-2和Cav-3。目前認(rèn)為，Cav-1主要發(fā)揮著生物學(xué)作用。Cav-1是胞膜上的一種整合膜蛋白，在保持Caveolae的完整性、膽固醇轉(zhuǎn)運(yùn)、小胞的運(yùn)輸、信號(hào)的傳導(dǎo)中起一定的作用[2]。Cav-1的生物學(xué)作用多樣，在細(xì)胞外基質(zhì)、血管內(nèi)皮細(xì)胞、神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、血管平滑肌等方面都有其相關(guān)作用機(jī)制，通過cAMP-PKA、TrkB、PKC等多條途徑，調(diào)控基質(zhì)金屬蛋白（MMPs）、緊密連接蛋白等物質(zhì)的表達(dá)，在維持血腦屏障完整性、側(cè)枝形成、調(diào)控動(dòng)脈粥樣硬化、神經(jīng)修復(fù)等方面發(fā)揮作用[3]。本研究觀察了腦梗死患者急性期Cav-1水平變化及與腦梗死相關(guān)因子的關(guān)系，探索其臨床意義，為腦梗死的預(yù)防和治療提供理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2017年1月至9月本院神經(jīng)內(nèi)科收治的急性腦梗死病人39例（腦梗死組）和39例同期健康體檢者（對(duì)照組），腦梗死組男19例，女20例，平均年齡（66.89±11.38）歲。對(duì)照組男20例，女19例，平均年齡（64.87±8.82）歲。兩組年齡、性別相比差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。所有急性腦梗死患者均在發(fā)病7d內(nèi)入院，均未進(jìn)行阿替普酶或尿激酶溶栓治療，也無出血轉(zhuǎn)化。39例腦梗死患者中，根據(jù)NIHSS評(píng)分，輕型35例，中型3例，重型1例，NIHSS評(píng)分中位數(shù)為3分。入選標(biāo)準(zhǔn)：（1）按照《中國急性缺血性腦卒中診治指南2018》中腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)，均經(jīng)頭顱CT和（或）MRI掃描證實(shí)；（2）發(fā)病時(shí)間≤7d；（3）首次發(fā)病；（4）年齡18～80歲。排除標(biāo)準(zhǔn)：既往有腫瘤、腦梗死、心肌梗死、頭顱外傷、嚴(yán)重肝腎疾病史或其他嚴(yán)重的急慢性疾病者。所有入選患者均對(duì)本研究知情同意，醫(yī)院倫理委員會(huì)討論通過，符合倫理原則。

1.2 方法 兩組患者均在入院后第1d清晨空腹抽取靜脈血清標(biāo)本。所有標(biāo)本使用肝素鈉抗凝，在室溫下3000 r/min離心10min后分離血清，血清轉(zhuǎn)移至EP管，置于低溫冰箱-40℃儲(chǔ)存。血清Cav-1檢測試劑盒為Human Caveolin-1 ELISA kit（英國abbexa公司，型號(hào)abx571954），使用美國寶特ELX-800生產(chǎn)的酶標(biāo)儀參照Human Caveolin-1 ELISA試劑盒說明書進(jìn)行檢測。同型半胱氨酸（Hcy）、總 膽 固 醇（TC）、甘油三酯（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）、載脂蛋白A1（APOA1）和載脂蛋白B（APOB）、空腹血糖（FBS）、尿素氮（BUN）、肌酐（Cr）、尿酸（UA）和前白蛋白（PA）的水平由我院檢驗(yàn)科生化中心使用德國羅氏Cobas全自動(dòng)生化儀檢測。糖化血紅蛋白（HbA1C）由我院檢驗(yàn)科生化中心使用深圳普門H9全自動(dòng)糖化血紅蛋白測試儀檢測。

所有入選急性腦梗死患者入院后第1d采用NIHSS評(píng)分評(píng)估患者神經(jīng)功能缺損程度，該量表包括視野、凝視、意識(shí)水平、運(yùn)動(dòng)、感覺、共濟(jì)失調(diào)、面癱、構(gòu)音障礙、語言及忽視癥等11項(xiàng)條目，分值0～45分，得分越高表示神經(jīng)功能缺損越嚴(yán)重。輕型：NIHSS評(píng)分4～7分；中型：NIHSS評(píng)分8～15分；重型：NIHSS評(píng)分＞15分。在評(píng)估NIHSS評(píng)分時(shí)，需經(jīng)兩名專業(yè)的神經(jīng)內(nèi)科醫(yī)師完成，保證測評(píng)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS 26.0軟件分析，結(jié)果用（x±s）表示，不同發(fā)病日的組間Cav-1差異比較采用配對(duì)t檢驗(yàn)，組間多重兩兩對(duì)比采用LSD法，采用Logistic線性回歸模型分析Cav-1與NIHSS評(píng)分、生化指標(biāo)的關(guān)系，取（P＜0.05）為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 腦梗死組與對(duì)照組血清Cav-1水平、生化指標(biāo)比較 與對(duì)照組相比，腦梗死組Cav-1水平明顯降低，差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；腦梗死組和對(duì)照組的Hcy、FBS、HbA1C、TC、TG、LDL、HDL、apoA、apoB、BUN、Cr、UA、PA水平無顯著性差異（P＞0.05）。見表1

注：*P＜0.01

2.2 血清Cav-1水平與NIHSS評(píng)分、生化指標(biāo)的關(guān)系 將腦梗死組血清Cav-1水平與NIHSS評(píng)分、Hcy、FBS、HbA1C、TC、TG、LDL、HDL、apoA、apoB、BUN、Cr、UA水平進(jìn)行Logistic回歸分析。結(jié)果提示，腦梗死組血清Cav-1水平與NIHSS評(píng)分、Hcy、FBS、HbA1C、TC、TG、LDL、HDL、apoA、apoB、BUN、Cr、UA、PA均 無 明顯相關(guān)（P＞0.05）。

3 討論

Cav-1目前在腦血管病中的作用機(jī)制尚不十分明確。研究表明，Cav-1在血腦屏障、神經(jīng)炎性反應(yīng)、動(dòng)脈粥樣硬化等方面發(fā)揮生物學(xué)作用[4]。近年的臨床及動(dòng)物研究表明，Cav-1可能是腦血管病的一種保護(hù)性因素[5]。本研究發(fā)現(xiàn)腦梗死組的血清Cav-1水平顯著低于對(duì)照組，推測血清低水平Cav-1可能是腦梗死發(fā)病的一個(gè)危險(xiǎn)因素；但不排除患者發(fā)生腦梗死后，體內(nèi)Cav-1的水平下降導(dǎo)致的差異，其因果關(guān)系需進(jìn)一步研究明確。

Castellanos等[6]對(duì)133名行溶栓治療的腦梗死患者的研究表明，Cav-1水平在出血轉(zhuǎn)化組及1型腦血腫轉(zhuǎn)化組均與非出血組無顯著性差異，且三組患者Cav-1水平均高于非卒中組；而2型血腫轉(zhuǎn)化組及癥狀性出血組（sIHT）則顯著低于非出血組。表明血清低Cav-1水平可能與阿替普酶溶栓后的嚴(yán)重出血轉(zhuǎn)化及神經(jīng)功能惡化相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，腦梗死后發(fā)生血清中低Cav-1水平患者，其腦微出血的風(fēng)險(xiǎn)是高Cav-1水平者的3倍，血清低Cav-1水平可能與腦梗死早期神經(jīng)功能惡化相關(guān)[7]。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)方面，通過基因敲除、病毒轉(zhuǎn)染等方式，使Cav-1基因沉默或過度表達(dá)，隨后構(gòu)建大腦中動(dòng)脈栓塞模型（MCAO）。結(jié)果表明，Cav-1敲除的小鼠神經(jīng)功能惡化、腦梗死面積等方面顯著比對(duì)照組小鼠嚴(yán)重，而Cav-1過量表達(dá)的小鼠則神經(jīng)損傷的程度較對(duì)照組小鼠減輕[8]。本研究表明，腦梗死患者Cav-1水平低于對(duì)照組，但其變化與NIHSS評(píng)分無明顯相關(guān)性，提示Cav-1水平與病情嚴(yán)重程度可能無關(guān)。

既往研究發(fā)現(xiàn)，血清前白蛋白水平升高可能是青年型腦梗死發(fā)病的一種保護(hù)因素。但本研究表明，腦梗死患者血清Cav-1水平與Hcy水平、血糖（FBS、HbA1C）、血脂（TC、TG、LDL、HDL、apoA、apoB）和腎功能（BUN、Cr）、UA和PA水平無明顯的相關(guān)性，提示血清Cav-1水平變化可能與Hcy、血糖、血脂、PA代謝無關(guān)，不受腎功能和UA的影響，可能是急性腦梗死的新指標(biāo)[9]。但Hcy、血糖、血脂、PA代謝和腎功能、UA等受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物、吸煙、酗酒等因素影響大。本研究有其局限性：納入的病例大部分為輕型病例（35/39，NIHSS評(píng)分＜7分），未進(jìn)行病因分型，均因?yàn)槌^時(shí)間窗未進(jìn)行溶栓治療，無出血轉(zhuǎn)化，且樣本量不大，須進(jìn)一步研究以明確Cav-1在腦梗死的發(fā)生和發(fā)展中的作用。

綜上，血清Cav-1水平在腦梗死發(fā)病后存在一定的變化規(guī)律，但與Hcy、血糖、血脂、PA代謝無關(guān)，不受腎功能和UA的影響，提示Cav-1對(duì)腦梗死的發(fā)生、發(fā)展有一定的預(yù)測價(jià)值，與常規(guī)風(fēng)險(xiǎn)因素聯(lián)合檢測或許能及早發(fā)現(xiàn)急性腦梗死的患者，為腦梗死的預(yù)防、治療和預(yù)后評(píng)估等方面提供一定的理論基礎(chǔ)，可能是急性腦梗死的新指標(biāo)。