三例奶山羊魏氏梭菌病的診斷與預(yù)防

季云福，王志永，李金春，李國(guó)明，李 明

山東省濰坊市坊子區(qū)畜牧業(yè)發(fā)展中心，山東濰坊 261200

0 引言

魏氏梭菌廣泛存在于土壤、飼草、糞便和污水中，羊的魏氏梭菌病又稱產(chǎn)氣莢膜桿菌病，主要由A型和D型菌及其產(chǎn)生的α毒素所致[1]。傳染途徑主要是消化道或傷口，病原菌自消化道或傷口侵入機(jī)體，在腸道絨毛膜上大量繁殖并產(chǎn)生強(qiáng)烈的α毒素，改變毛細(xì)血管的通透性，使毒素大量進(jìn)入血液，引起全身性毒血癥[2]。發(fā)病羊營(yíng)養(yǎng)多在中等以上，月齡在6～18月齡之間，在我國(guó)北方多發(fā)于冬末春初時(shí)節(jié)。當(dāng)氣候驟變或出現(xiàn)陰雨連綿天氣時(shí)，母羊自身抵抗力較弱，除了滿足自身需要的同時(shí)，還需要承擔(dān)羔羊生長(zhǎng)所需的養(yǎng)分，因寒冷饑餓或吃了冰凍的飼草而機(jī)體抵抗力減弱時(shí)容易誘發(fā)該病。新生的羔羊營(yíng)養(yǎng)需求量較大，吃奶時(shí)毒素會(huì)從母羊的奶水中傳給羔羊，由于羔羊的自身機(jī)體免疫力不足，生命較為脆弱，發(fā)病率和死亡率較高。急性病例發(fā)病突然，往往出現(xiàn)抽搐、角弓反張等神經(jīng)癥狀，數(shù)小時(shí)內(nèi)死亡，稍慢的病例可見臥地、氣喘、流涎、磨牙、運(yùn)動(dòng)失調(diào)、腹部膨脹[3]，病羊最后極度衰竭、昏迷，1～2 天內(nèi)死亡，如果防控不及時(shí)，會(huì)給養(yǎng)殖戶帶來(lái)較大的經(jīng)濟(jì)損失，還會(huì)造成該病外傳的風(fēng)險(xiǎn)，一旦造成大面積傳染、暴發(fā)，會(huì)對(duì)一個(gè)地區(qū)的養(yǎng)羊業(yè)造成難以估計(jì)的經(jīng)濟(jì)損失。

1 發(fā)病情況

2021年3月，山東省濰坊市坊子區(qū)某養(yǎng)羊戶的1 只成年母山羊和2 只羔羊在半夜突然發(fā)病，畜主可聽見母羊明顯地氣喘、嘶叫，聲音時(shí)大時(shí)小，不時(shí)強(qiáng)烈撞擊圈舍欄桿而發(fā)出刺耳的聲音，羔羊嘶叫聲音微弱，之后圈舍內(nèi)聲音逐漸減小，數(shù)小時(shí)后趨于平靜。黎明時(shí)分，畜主發(fā)現(xiàn)母羊和羔羊均已死亡（圖1）。

圖1 已死亡的3 只山羊

2 現(xiàn)場(chǎng)檢查情況

2.1 現(xiàn)場(chǎng)檢查

2.2.1 養(yǎng)殖基本情況

經(jīng)獸醫(yī)現(xiàn)場(chǎng)查看，該養(yǎng)羊戶在自家庭院內(nèi)搭建了簡(jiǎn)易的圈舍，面積約30 m2，其中兩側(cè)靠院墻，另外兩側(cè)無(wú)任何遮擋設(shè)施。母羊和羔羊在同一圈舍內(nèi)飼喂，草料堆放在圈舍靠墻的一角，母羊可自由采食，無(wú)固定飲水水槽，只有放在地上的飲水盆。糞便與墊料混雜在一起，清理不及時(shí)，無(wú)專門糞污處理設(shè)施，現(xiàn)場(chǎng)臭味較大，養(yǎng)殖環(huán)境較差。

2.2.2 病死羊檢查

3 只羊尸體都有不同程度的扭曲，說(shuō)明死亡前有神經(jīng)抽搐癥狀，毛下體表和裸露體表均無(wú)明顯斑塊、水皰、出血點(diǎn)等病變，口唇內(nèi)外及四只蹄部均無(wú)水皰。成年母羊腹部腫脹明顯，肛門及陰道周圍無(wú)明顯病變，羔羊腹部略微腫脹（圖2、圖3）。

圖2 對(duì)死亡母羊進(jìn)行體表檢查

圖3 對(duì)死亡羔羊進(jìn)行口唇檢查

2.2 流行病學(xué)調(diào)查

經(jīng)獸醫(yī)調(diào)查得知，一是以該養(yǎng)殖戶羊舍為中心，半徑1 公里范圍內(nèi)的所有養(yǎng)羊戶近2 個(gè)月內(nèi)均無(wú)羊只購(gòu)入，因處冬季也未在農(nóng)田邊、水溝邊、樹林等公共場(chǎng)所放牧，未在公共場(chǎng)所擠奶，未與有關(guān)野生動(dòng)物接觸，也無(wú)獸醫(yī)上門診治。大多數(shù)養(yǎng)羊戶的養(yǎng)殖環(huán)境良好，疫病防控意識(shí)較強(qiáng)，能按規(guī)定接種國(guó)家強(qiáng)制免疫的疫苗，能定期對(duì)羊舍進(jìn)行清掃、消毒，無(wú)類似疫病發(fā)生；二是該成年母羊月齡為18月齡，是該養(yǎng)殖羊戶于兩年前的秋天所買羔羊養(yǎng)大的，近期未離開過(guò)羊舍，未發(fā)生過(guò)類似疫病，無(wú)獸醫(yī)上門診治。2 只羔羊月齡為1月齡，是該母羊的頭胎羊，還未斷奶，未添加輔料，病死前健康狀況良好。三是該養(yǎng)羊戶日常防疫意識(shí)比較薄弱，保持動(dòng)物衛(wèi)生和消毒意識(shí)不強(qiáng)，所養(yǎng)3 只羊均未接種過(guò)任何國(guó)家強(qiáng)制免疫的疫苗，也未接受過(guò)任何藥物治療，未進(jìn)行過(guò)圈舍消毒，養(yǎng)殖方式粗放。

3 臨床和實(shí)驗(yàn)室診斷

3.1 病理剖檢診斷

剖檢母羊，結(jié)果可見血液凝固不良，呈紫黑色黏稠狀。瘤胃內(nèi)存有大量料草，胃黏膜呈現(xiàn)壞死性脫落，真胃有出血性炎癥[4]。腸腔鼓氣，腸道黏膜發(fā)紺、出血（圖4）。心肌松軟脆弱、無(wú)光澤，心包增大，內(nèi)有積液。肝臟發(fā)黃，邊緣鈍圓，部分有出血點(diǎn)。脾臟略腫，有散在出血點(diǎn)。肺臟出血、水腫，邊緣壞死，腎臟出血、腫脹、變軟。 以上為明顯的敗血癥癥狀。

圖4 剖檢母羊腸道可見明顯出血

剖檢羔羊，結(jié)果可見血液凝固不良，胸腔積液，腸腔鼓氣，胃腸道普遍具有出血癥狀，心包內(nèi)有積液，肝臟、脾臟、肺臟、腎臟均有出血點(diǎn)，且各有不同程度的變性或壞死，屬于比較明顯的敗血癥癥狀。

3.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

3.2.1 涂片鏡檢

采集剖檢母羊和羔羊的臟器及腸道病料進(jìn)行革蘭氏染色涂片，所有涂片經(jīng)顯微鏡觀察均可見兩端鈍圓的革蘭氏陽(yáng)性粗短大桿菌。

3.2.2 細(xì)菌培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)

（1）需氧培養(yǎng)

將采集的臟器樣品分別于血平板、普通平板進(jìn)行劃線培養(yǎng)，經(jīng)37 ℃培養(yǎng)24 h，均未發(fā)現(xiàn)菌落[5]。

（2）厭氧培養(yǎng)

樣品在血平板上長(zhǎng)出表面光滑、中央隆起而大小不一的淡黃色圓形菌落，直徑在2～4 mm之間，多數(shù)菌落周圍有雙層溶血環(huán)，個(gè)別菌落邊緣呈現(xiàn)鋸齒狀，且有溶血特征。樣品在牛奶培養(yǎng)基中培養(yǎng)能使酪蛋白凝固，同時(shí)產(chǎn)生大量氣體，將凝固的酪蛋白沖成蜂窩狀，并將液面上用于封固的的凡士林層向上推擠，氣勢(shì)洶涌，形成暴烈發(fā)酵現(xiàn)象，稱為“洶涌發(fā)酵”[6]。

3.3 委托第三方檢測(cè)

根據(jù)病死羊的神經(jīng)癥狀以及臟器、腸道的普遍出血癥狀，獸醫(yī)懷疑有病毒交叉感染，故分別采取了3 只病死羊的眼/鼻棉拭子樣品各1 份，委托山東省諸城市一家專業(yè)的第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行了口蹄疫病毒檢測(cè)。經(jīng)檢測(cè)，3 份樣品的結(jié)果均為無(wú)CT值和無(wú)擴(kuò)增曲線，全部判定為口蹄疫病毒陰性，從而排除了口蹄疫感染（圖5）。

圖5 第三方檢測(cè)機(jī)構(gòu)出具的口蹄疫病毒檢驗(yàn)檢測(cè)報(bào)告

3.4 診斷結(jié)論

綜上，根據(jù)病死羊臨床癥狀、病理剖檢、微生物學(xué)檢查和第三方檢測(cè)結(jié)果排除感染口蹄疫，確診該養(yǎng)羊戶的3 只羊因感染羊魏氏梭菌病而致死。

4 討論分析

4.1 病因分析

該養(yǎng)羊戶的3 只羊發(fā)病前一天為陰雨天氣，正處于冬末春初時(shí)節(jié)，氣溫低，空氣潮濕，母羊應(yīng)該是白天吃了帶有霜凍的飼草，導(dǎo)致機(jī)體免疫力降低，而跟隨飼草進(jìn)入胃腸道的魏氏梭菌趁機(jī)大量繁殖，誘發(fā)該病，羔羊吃了含有毒素的母乳而誘發(fā)該病。3只羊均形成急性敗血癥，從而導(dǎo)致急性死亡。

4.2 病死羊及環(huán)境處理

3 只病死羊尸體由專門運(yùn)輸車運(yùn)送到無(wú)害化處理廠進(jìn)行無(wú)害化處理，徹底清理墊料、糞便等環(huán)境污染物，用0.2%的戊二醛溶液對(duì)羊舍進(jìn)行全面噴灑消毒[7]，將剩余未飼喂飼草和未使用墊料進(jìn)行焚燒處理。

4.3 疫病預(yù)防

本病一旦發(fā)生，往往都是急性，很難治療，因此應(yīng)采取預(yù)防為主的防治措施。

4.3.1 做好免疫接種

目前，疫苗免疫是預(yù)防該病最有效的手段，可定期對(duì)羊群注射產(chǎn)氣莢膜梭菌α類毒素疫苗，肌內(nèi)注射，每半年免疫1 次，每次4 mL，做到應(yīng)免盡免，提高羊群免疫率和抗病能力，同時(shí)做好新進(jìn)群羊只的補(bǔ)免工作。有條件的可以做抗體水平檢測(cè)，根據(jù)實(shí)際抗體水平?jīng)Q定是否加強(qiáng)免疫。

4.3.2 加強(qiáng)飼養(yǎng)管理

在冬春時(shí)節(jié)，尤其是陰雨天氣或天氣不穩(wěn)定時(shí)應(yīng)加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，保證飼糧的合理配套，對(duì)不同生產(chǎn)和生長(zhǎng)階段的羊只提供相應(yīng)的充足營(yíng)養(yǎng)和潔凈飲水。在變換飼糧時(shí)，應(yīng)采用逐漸過(guò)渡的飼喂方法[8]，同時(shí)防止羊只誤食帶有霜凍或霉變的飼草。

4.3.3 強(qiáng)化消毒

養(yǎng)殖場(chǎng)及圈舍出入口處設(shè)置消毒池，消毒劑使用3%火堿溶液，定期更換。每周對(duì)圈舍、場(chǎng)地、進(jìn)出車輛等用0.2%的戊二醛溶液噴灑消毒。生產(chǎn)區(qū)內(nèi)喂料車、料槽、飲水槽等器具要定期消毒，正確使用戊二醛、聚維酮碘和新潔爾滅等消毒劑并確保消毒頻次。每周對(duì)生產(chǎn)區(qū)和生活區(qū)全面徹底消毒一次，消毒時(shí)要不留死角。

4.3.4 改善飼養(yǎng)環(huán)境

生產(chǎn)區(qū)內(nèi)要設(shè)有捕鼠設(shè)施，禁止同時(shí)飼養(yǎng)犬、貓。保持充足光照、通風(fēng)和合理運(yùn)動(dòng)，提高羊群抵抗力。冬春季節(jié)要采取防風(fēng)保溫措施，盡量減少羊群應(yīng)激反應(yīng)，夏秋季節(jié)，要采用防蚊蟲的藥物進(jìn)行定期滅蚊、滅蠅，以減少傳染病的發(fā)生。定期清掃生產(chǎn)區(qū)，對(duì)清掃的樹葉、污穢的墊草等進(jìn)行焚燒，用堆積發(fā)酵法對(duì)糞便進(jìn)行處理。

4.3.5 發(fā)病羊處置

一是做好病羊隔離。加強(qiáng)圈舍巡查，發(fā)現(xiàn)患病羊只要及時(shí)隔離、趁早治療，對(duì)癥選擇合適的藥物，禁止使用違禁藥物，同時(shí)做好隔離區(qū)的消毒滅源工作。一般病羊，診療康復(fù)后回群。懷疑發(fā)生重大動(dòng)物疫病的，應(yīng)當(dāng)按照法定程序及時(shí)上報(bào)當(dāng)?shù)匦竽莲F醫(yī)主管部門，并積極配合處置。二是病死羊處置。依法依規(guī)對(duì)病死羊做好無(wú)害化處理，確保不擴(kuò)散、不蔓延。