不同分期肺癌患者血清中PDCD5蛋白、CEA和CYFRA21-1表達水平變化及臨床意義

雷立鋒 李 雪 胡會杰

肺癌主要發生于支氣管黏膜上皮，根據相關研究[1]報道顯示，近些年肺癌的發病率及病死率呈逐年上升趨勢，主要與現代工業化的發展及環保意識的不健全、自然環境惡化、空氣質量下降以及長期吸煙等因素相關[1]。由于早期肺癌通常無明顯癥狀表現，因而在臨床確診時大多已處于局部晚期或晚期，失去手術治療的最佳機會[2]。臨床采取胸部CT篩查，有利于及早發現周圍型肺癌[3]，對于發生在支氣管管腔內的小的、中心型肺癌，影像學手段一般很難發現[4]。盡管采取活檢的方式對肺部腫物可以進行確診，但由于該方式為侵入性手段，不適合廣泛篩查。血清腫瘤標志物作為近年來逐漸發展起來的一個輔助檢查手段[5]，由于具有無創、給患者造成的痛苦小、簡單經濟、快速有效以及有一定的特異度和靈敏度等多種優勢，因而在臨床上越來越受到醫生和患者的認可。本研究探討血清程序化細胞死亡分子5(programmed cell death5，PDCD5)蛋白、癌胚抗原(carcino-embryonic antigen，CEA)和細胞白蛋白19(Cytokeratin-19，CYFRA21-1)在不同分期肺癌患者中的表達水平，同時分析其臨床意義，現將結果報告如下。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選取我院2016年8月至2020年8月收治的肺癌患者184例作為肺癌組，包括腺癌72例，鱗癌60例，小細胞癌52例；116例男性，68例女性；年齡25～76歲，平均年齡(62.51±4.86)歲；TNM分期：Ⅰ期～Ⅱ期76例，Ⅲ期～Ⅳ期108例。納入標準：①年齡大于18歲；②預期壽命至少大于3個月；③臨床資料完整；④了解本研究目的且愿意簽署知情同意書。排除標準：①入院前已接受手術或放化療治療者；②依從性差；③缺乏肺癌病理學診斷者。選取同期于我院接受體檢的健康體檢者(常規體檢及肝腎功能正常且無肺癌相關高危因素)80例作為對照組，46例男性，34例女性；年齡26～80歲，平均年齡(61.89±4.79)歲。2組一般資料差異均不顯著(P>0.05)，見表1。

表1 2組一般資料比較(例，%)

1.2 方法

(1)樣本采集：所有研究者入院后，均采集5 ml清晨空腹靜脈血，并于室溫靜置30 min后，于轉速為3000 r/min的離心機內離心10 min，以分離血清，并分裝保存于-70 ℃超低溫冰箱內，集中檢測。(2)血清PDCD5蛋白檢測方法：采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測血清PDCD5蛋白水平，PDCD5試劑盒購自武漢博士德生物公司，具體操作嚴格按照試劑盒說明書進行。(3)血清CEA和CYFRA21-1檢測方法：采用電化學發光免疫分析法檢測CEA和CYFRA21-1水平，儀器為美國Roche公司的Cobas e 601型化學發光免疫多功能檢測儀，試劑由Roche公司提供，嚴格按照說明書操作。

1.3 統計學分析

2 結果

2.1 2組血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1表達水平比較

肺癌組PDCD5水平明顯低于對照組，CEA和CYFRA21-1水平明顯高于對照組，其差異均具統計學差異(P<0.05)，見表2。

表2 2組血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1表達水平比較

2.2 不同TNM分期肺癌患者血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1表達水平比較

Ⅰ～Ⅱ期肺癌患者血清PDCD5水平明顯高于Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者，CEA和CYFRA21-1水平明顯低于Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者，其差異均具統計學差異(P<0.05)，見表3。

表3 不同TNM分期肺癌患者血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1表達水平比較

2.3 血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1水平與肺癌患者TNM分期相關性分析

經Pearson相關性分析，血清PDCD5水平與肺癌患者TNM分期呈負相關(γ=-0.423)，血清CEA和CYFRA21-1水平與肺癌患者TNM分期呈正相關(γ1=0.514，γ2=0.346)，見表4。

表4 血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1水平與肺癌患者TNM分期相關性分析

3 討論

肺癌發病率和死亡率近些年呈逐年上升趨勢，已成為絕大多數國家癌癥死亡的主要原因[6]。由于肺癌發生的隱匿性較強，當有確切的影像學和組織病理學證據時，大部分患者都已診斷為晚期，失去了最佳治療的機會，因此對早期肺癌患者進行血清腫瘤標志物的檢測已成為目前臨床診斷肺癌的重要的輔助檢查手段之一[7]。

PDCD5是近年來發現的一個新的人類基因，其編碼的PDCD5蛋白可與半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)結合，在細胞凋亡過程中發揮重要作用[8]，由于PDCD5蛋白與Caspase-3結合明顯延長活化的Caspase-3的體外半衰期，提示PDCD5基因可能作為Caspase-3的正調控分子參與細胞凋亡[9]，但其具體機制還有待進一步確證。另也有相關文獻[10]顯示，PDCD5蛋白可與組蛋白乙酰轉移酶Tip60相互作用，導致DNA損傷，從而促進細胞凋亡。本研究對肺癌患者和健康體檢者血清PDCD5水平進行比較，結果顯示，肺癌患者血清PDCD5的表達水平明顯低于健康體檢者，與汪端等[11]研究結果一致，均顯示血清PDCD5在胃癌患者中的水平顯著低于正常人群。CEA是一種糖蛋白，相對分子質量較大，肺癌細胞可直接產生，主要作為非小細胞肺癌相關的有特異性的腫瘤標志[12]。CYFRA21-1廣泛存在于上皮細胞，是一種分化特異的蛋白質，為組成細胞骨架的蛋白質之一，在上皮細胞惡性轉化過程中，激活的蛋白酶加速角蛋白的降解，使大量角蛋白片段釋放入血，在肺癌患者血循環中通常含量較豐富[13]。本研究對肺癌患者和健康體檢者血清CEA和CYFRA21-1水平進行比較，結果顯示，肺癌患者血清CEA和CYFRA21-1水平均明顯高于健康體檢者，與單新潔等[14]研究結果一致，由于CEA和CYFRA21-1在肺癌腫瘤細胞中高表達，當腫瘤細胞凋亡或死亡時釋放入血，因此，在臨床上可將CEA和CYFRA21-1水平作為腫瘤診斷的一個重要指標。

根據TNM分期，本研究將肺癌患者分為Ⅰ期～Ⅱ期76例，Ⅲ期～Ⅳ期108例，分別對2組血清PDCD5、CEA和CYFRA21-1水平進行比較，發現Ⅰ～Ⅱ期肺癌患者血清PDCD5水平顯著高于Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者，這提示PDCD5蛋白表達與患者臨床分期有關，且該蛋白的低表達預示著患者臨床分期晚以及不良預后；Ⅰ～Ⅱ期肺癌患者CEA和CYFRA21-1水平顯著低于Ⅲ～Ⅳ期肺癌患者，分析原因，可能由于腫瘤處于中晚期時，細胞發生大量增殖，并出現異常分化或低分化，因而導致各種腫瘤標志物在腫瘤細胞的表達急劇增多，在腫瘤細胞凋亡或異常裂解時進入血液，從而造成血清中各種腫瘤標志物水平明顯升高。經Pearson相關性分析，發現肺癌患者血清PDCD5水平與肺癌患者TNM分期呈負相關(γ=-0.423)，血清CEA和CYFRA21-1水平與肺癌患者TNM分期呈正相關(γ1=0.514，γ2=0.346)，這也為臨床治療肺癌提供了血清參考指標，臨床上可通過提高PDCD5水平，降低CEA和CYFRA21-1水平來達到改善患者預后的目的。本研究后續還需進一步擴大樣本量，并進行隨訪觀察，動態監測PDCD5、CEA和CYFRA21-1水平，以進一步確證其相關性，為肺癌的治療提供新的病情評估指標。

綜上所述，肺癌患者血清PDCD5水平存在明顯低表達，而CEA和CYFRA21-1水平存在明顯高表達，PDCD5、CEA和CYFRA21-1均與TNM分期密切相關，可將其作為肺癌臨床診斷、治療以及預后評估的參考依據。