信號轉導和轉錄激活因子3及鱗狀細胞癌抗原在喉癌中表達及其臨床意義

邵 靜 魏鑫鑫 范栩嫚

喉癌(laryngeal cancer)是原發于咽喉或轉移至喉部腫瘤的統稱，分為原發性和繼發性[1,2]，癥狀包括吞咽困難、聲音嘶啞、耳痛、咳血、呼吸困難等。既往研究顯示，喉癌與吸煙、飲酒、職業接觸、HPV感染等有關。但目前尚無明確的病因，可能是以上因素綜合作用的結果。喉癌可通過手術(包括微創手術和切除術等)、放射治療、化學治療和免疫治療等，早期治療生存率高達90%，因此早期診斷尤為重要[3]。目前尚無理想標志物，以達到細胞免疫學診斷的目的。信號轉導和轉錄激活因子3(STAT3)參與腫瘤的發生，鱗狀細胞癌抗原(SCC)是典型的腫瘤相關抗原。因此，本研究擬觀察STAT3、SCC與喉癌的關系，為臨床診斷和治療提供依據。

1 材料與方法

1.1 研究對象

選取2019年1月至2020年5月于本院耳鼻喉科活檢或經手術治療留取病理組織的患者68例，其中獲取喉癌病理組織樣本68例，癌旁(0.5～1 cm以上)組織25例。患者年齡35～72歲，平均(57.4±3.5)歲；男性59例，女性9例；無淋巴結轉移45例，伴頸部淋巴結轉移23例；高分化49例，中低分化29例。全部患者均未接受化療或免疫治療。

1.2 主要儀器和試劑

STAT3和SCC單克隆抗體、免疫組化試劑盒購于R&D System公司(美國)，顯色試劑盒購于Abcam公司(美國)，石蠟包埋和切片機購于萊卡公司(德國)，顯微鏡及顯微拍攝儀購于奧林巴斯公司(日本)。

1.3 觀察指標

應用免疫組化法(SP)檢測樣品組織中STAT3和SCC蛋白質表達水平，全部操作按試劑盒說明書完成。在顯微鏡下觀察判定結果，細胞核或細胞質中出現黃色顆粒判定為陽性。在低倍鏡視野下隨機選取5個視野，在高倍鏡下計數500個細胞后，對陽性細胞進行，并計算陽性細胞數量占比，以此百分比判定陽性腫瘤細胞占比及染色強度。其中無色判定為0分，淺黃色為1分，棕黃色為2分，黃褐色為3分；含黃色顆粒細胞占比小于5%判定為0分，占比5%～25%為1分，占比26%～50%為2分，占比大于51%為3分。兩結果相乘為此樣本最終得分，0至1分判定為陰性，大于1分判定為陽性。

1.4 數據分析

2 結果

2.1 STAT3和SCC在樣品組織中的表達情況

在喉癌組織中，STAT3和SCC陽性染色大部分出現于細胞質中，細胞核也見表達。喉癌組織中STAT3和SCC陽性率均明顯高于癌旁組織(P<0.05)，見表1、表2。

2.2 STAT3、SCC表達與喉癌臨床病理特征的關系

不同性別、年齡、吸煙史喉癌患者STAT3、SCC表達無明顯差異(P>0.05)。臨床分期Ⅰ+Ⅱ期、高分化、T1～T2浸潤深度患者STAT3陽性率明顯低于Ⅲ+Ⅳ期、中低分化、T3～T4浸潤深度患者(P<0.05)，臨床分期Ⅰ+Ⅱ期、高分化、無淋巴結轉移、T1～T2浸潤深度患者SCC陽性率明顯低于Ⅲ+Ⅳ期、中低分化、有淋巴結轉移、T3～T4浸潤深度患者(P<0.05)，見表3。

表3 STAT3、SCC表達與喉癌臨床病理特征的關系(例，%)

3 討論

STAT3定位于細胞質中，參與體內細胞因子、生長因子介導的信號傳遞和轉導，從而調節各種不同的生理功能[4]。同時作為信號轉導及轉錄活化因子家族的一員，STAT3也參與細胞凋亡和增殖、組織修復和再生過程。已有研究證實，STAT3在肺鱗狀細胞癌中陽性表達率明顯升高，在胃癌組織中強陽性表達[5,6]。這些都證實STAT3與惡性腫瘤疾病顯著相關。本研究顯示相同的結果，相較于癌旁組織，喉癌病理組織中STAT3陽性表達率明顯升高。進一步分析STAT3與喉癌患者臨床病理特征的關系發現，隨著患者臨床分期的上升、病理分化的降低和浸潤深度的增加，患者喉癌病理組織的STAT3陽性表達率明顯上升。這些結果都表明，STAT3高表達或表達增加可能促進喉癌疾病的發生和發展，也增加惡性腫瘤的浸潤及惡化程度，同時促進癌細胞轉移。究其原因，可能STAT3高表達促進細胞因子、生長因子介導的信號傳導，激活細胞增殖，從而導致癌細胞擴增加速，增加癌細胞侵染能力。

SCC是一種在子宮、肺部和頭頸等上皮細胞癌細胞質中表達的糖蛋白。現作為特異性較好的標志物，已被用于多種癌癥診斷[7,8]。研究報道，在正常鱗狀上皮組織中，可見極低水平SCC表達，但在鱗狀上皮來源腫瘤細胞中可見SCC大量表達[7,9]。但SCC水平研究及臨床價值討論均集中于鱗癌，少見于喉癌。本研究比較喉癌病理組織和癌旁組織中SCC水平發現，喉癌病理組織SCC陽性率為73.5%，明顯高于癌旁組織。進一步分析SCC與喉癌患者臨床病理特征的關系發現，隨著患者臨床分期的上升、病理分化的降低、浸潤深度的增加和淋巴結的轉移，患者喉癌病理組織的SCC陽性表達率明顯上升。與STAT3結果相同，SCC高表達或表達增加可能促進喉癌疾病的發展，也增加惡性腫瘤的浸潤及惡化程度，同時促進癌細胞轉移。這可能是高表達水平的SCC經淋巴系統進入血液，從而誘導癌細胞浸潤和轉移，導致癌細胞加速擴散引發疾病進展。

但由于本研究納入時間和資料受限，未對STAT3、SCC水平與患者治療、疾病進展的相關性展開研究，故無法了解上述兩指標與不良預后的關系。因此在下一步的研究中，本研究擬擴充樣本量，并延長隨訪時間，以對上述問題更好了解。

綜上所述，喉癌組織STAT3和SCC均呈過表達，STAT3和SCC均與喉癌患者臨床病理特征相關。