類風濕關節炎患者血清Dickkopf-1表達與疾病活動的相關性研究〔1〕

張麗卿，王建寶，白小娟，劉艷紅，李鵬花

(1.山西醫科大學汾陽學院，山西 汾陽 032200；2.山西省汾陽醫院，山西 汾陽 032200)

類風濕關節炎(RA)是一種慢性炎癥性全身性自身免疫性疾病，占全球人數的0.5%[1]，且逐年升高。我國每年有近5萬例新增RA患者，門診及住院費用驚人，嚴重影響人類健康和生存質量。RA有活動期與穩定期交替發作的特點，活動期給予有效干預可以延緩病情進展，減少關節畸形發生，部分病例可達到長期緩解。因此，準確判斷病情對治療方法的選擇及預后尤為重要。目前RA的發病機制仍不明確，越來越多的證據表明RA的發病受(包括基因在內等)多因素的影響[2-4]。Dickkopf-1(DKK-1)是Dickkopf家族的成員，是由兩個富含半胱氨酸的結構域和一個信號肽序列組成的分泌蛋白。DKK-1是Wnt/β-catenin信號通路(典型Wnt通路)的內源性可溶性抑制因子。典型的Wnt通路通過模擬成骨細胞的增殖、成熟、分化及相關蛋白的產生，抑制破骨細胞的骨吸收來調節骨重塑[5-6]。DKK-1表達異常引起的骨代謝紊亂參與了骨侵蝕的發病機制[7-9]。關于血清DKK-1在RA中的表達說法不一[10-12]。為此本研究就血清DKK-1水平與RA疾病活動的關系進行研究。報告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2017年10月—2019年12月在山西省汾陽醫院風濕免疫科門診及住院治療的RA患者44 例，其中男14 例，女30 例，年齡(55.68±1.37) 歲。所有患者符合1987年美國風濕病學會(ACR)RA分類標準或者2010年ACR和歐洲抗風濕病聯盟(EULAR)提出的RA新的分類標準。排除患有其他結締組織病、血液系統疾病、腫瘤、嚴重感染者。

1.2 研究方法

詳細記錄RA患者病史及治療前和治療3個月后關節壓痛數(TJC)、關節腫脹數(SJC)，檢測治療前后紅細胞沉降率(ESR)、C反應蛋白(CRP)、類風濕因子(RF)水平，計算同一時點的RA患者疾病活動評分(DAS28)。DKK-1試劑盒和標準品購自上海星科生物科技有限公司，嚴格按試劑說明書采用酶聯免疫吸附法(ELISA)檢測。ESR用魏氏法檢測，CRP和RF用ELISA法檢測。

1.3 統計學方法

2 結 果

2.1 治療前RA患者血清中DKK-1與相關指標的關系

RA患者年齡(55.68±1.37) 歲，TJC(7.14±0.85) 個，SJC為(6.90±0.87) 個，ESR為(40.01±7.87) mm/h，CRP為(34.71±6.87) mg/L，RF為(71.89±6.70) U/mL，DAS28為(4.49±0.16)。血清中DKK-1與TJC，SJC，DAS28呈正相關，與ESR，CRP，RF及年齡無相關性(見表1)。

表1 DKK-1與相關指標的關系

2.2 治療前后RA患者相關指標的比較

治療后RA患者TJC，SJC，ESR，CRP，RF，DAS28及DKK-1較治療前下降，差異有統計學意義(P<0.05)(見表2)。

表2 治療前后相關指標的比較

3 討 論

RA是由多種因素引起的一種自身免疫性疾病，可引起關節畸形，導致生活能力下降。目前國際上有關RA的治療推崇達標治療，以讓每位患者達到完全緩解或低疾病活動度為目標，最大限度地提高患者生活質量。因此，及時明確疾病活動性有利于更好地治療。

引起RA關節破壞的機制一直備受關注。目前已知Wnt/β-catenin信號通路參與骨骼的生長發育，而DKK-1作為Wnt/β-catenin信號通路的內源性抑制劑，通過與低密度脂蛋白受體相關蛋白-5/6(LRP 5/6)結合，參與骨穩態的調控。這種結合導致了LRP 5/6的失活，并抑制了脆性蛋白、Wnt成員與LRP 5/6的競爭結合。在動物實驗中發現，健康大鼠組織中DKK-1表達低于病理組織和壞死組織(炎癥組織)。與骨性關節炎(OA)相比，RA個體膝關節滑膜組織中DKK-1表達增加更為明顯，且RA中DKK-1可能抑制血管形成，降低成骨細胞功能，負調控軟骨形成，從而影響軟骨或骨骼發育。這些提示DKK-1可能參與了慢性炎癥性關節病的骨代謝異常和發病機制[3]。

DKK-1通過成骨細胞與破骨細胞調控骨代謝。研究[13]發現，RA患者骨密度評分越低血清DKK-1水平越高。國外研究[14]發現，一些炎癥因子可以通過激活和增加DKK-1進一步加速骨丟失、促進骨破壞。另有研究[15]發現，抑制骨信號通路的關鍵蛋白DKK-1比單純抑制炎癥能更好地控制病理性骨侵蝕，進一步證實了DKK-1在骨代謝中的重要作用。有學者應用腫瘤壞死因子(TNF-α)阻斷劑抑制DKK-1，發現RA患者的骨破壞逐漸逆轉為骨重塑[16]。推測DKK-1表達上調可能成為RA成骨細胞活性抑制的主要機制，對于RA患者中成骨細胞的Wnt信號途徑的其他變化還需更深入的研究。關于Wnt/β-catenin信號通路對破骨細胞影響的研究較少，認為主要是通過作用于成骨細胞間接影響破骨細胞的功能。

DKK-1水平與RA患者的疾病活動性、骨破壞等密切相關。研究[17]結果顯示，RA患者血清DKK-1水平與病程及ESR，CRP，DAS28呈正相關；RA患者血清DKK-1越高，預示著放射學進展越明顯。國外學者對379 例RA患者進行研究發現，血清中DKK-1水平高者骨關節功能下降，同時未發現DKK-1與高水平的DAS28、臨床的疾病活動指數(CDAI)、簡化的疾病活動指數(SDAI)的相關性，提示DKK-1可能是RA功能障礙的生物標志物[17]；另有研究發現RA患者血清中DKK-1水平與影像學進展呈正相關，與骨密度呈負相關，支持RA中DKK-1的高表達與骨破壞相關[13]。本研究發現治療后DKK-1水平較治療前下降，且反映疾病活動性的指標也下降，表明DKK-1可提示疾病活動性。對DKK-1與相關指標的關系分析，證明DKK-1與疾病活動性呈正相關，進一步證明DKK-1可作為反映疾病活動性的指標，與國外研究[13]結論一致。同時我們對DKK-1與ESR，CRP，RF的相關性進行了探討，得出DKK-1與ESR，CRP，RF無相關性，考慮與ESR，CRP，RF受多種因素影響或病例數較少有關。

綜上所述，治療后RA患者血清中DKK-1水平下降，且DKK-1與RA疾病活動性呈正相關，因此可將DKK-1視為RA疾病活動的生物標志物，對其展開深入研究有利于控制RA患者疾病活動性，延緩疾病進展。