感冒雙解顆粒解熱作用研究*

陳 良 徐曉琴 郭玉東 買迪娜 阿吉艾克拜爾·艾薩

(1.中國科學院新疆理化技術研究所, 烏魯木齊 830011)(2.中國科學院大學，北京 100049)(3.新疆醫科大學附屬中醫醫院，新疆中藥炮制研究重點實驗室，烏魯木齊 830000)(4.新疆維吾爾自治區中藥民族藥研究所，烏魯木齊 830002)(5.北京市藥品檢驗所中藥成分分析與生物評價北京市重點實驗室，北京 100035)

感冒雙解顆粒為復方制劑，其主要功用為解表散寒、清熱宣肺及解毒利咽，主要用于感冒風寒及肺胃郁熱諸癥，例如：流行性感冒、普通感冒、急性支氣管炎、肺炎早期等。為了進一步研究該藥藥效作用機理，采用大鼠干酵母和家兔細菌內毒素解熱模型對解熱作用進行研究[1-3]。

1 材料和方法

1.1 實驗動物

SD大鼠，70只，雄性，體質量180～200 g，實驗動物生產許可證號：SCXK(京)2019-0001；大耳白家兔，60只，雌雄不限，體質量1.6～2.5 kg，購自北京維通利華實驗動物技術有限公司。實驗動物生產許可證號：SCXK(京)2019-0033。實驗已通過北京市藥檢所福利倫理審查，審查編號：bjll170652。

1.2 試劑、藥品及儀器

安琪干酵母購自安琪酵母股份有限公司，生產日期 2015/03/28；生理鹽水(生產批號：1407263201)和滅菌注射用水(生產批號：1409193203)購自石家莊四藥有限公司；白凡士林(產品批號：20081005)購自南昌白云藥業有限公司。感冒雙解顆粒(浸膏粉)購自揚子江藥業集團；阿司匹林泡騰片(規格：0.5 g/片，生產批號 1311043)購自阿斯利康制藥有限公司。歐姆龍電子體溫計(產品型號 MC-106B)購自歐姆龍工貿有限公司；天平型號：BS224S，PB602 N和WRY-2008；微機熱原測溫儀購自上海遼卓科貿有限公司；ZRY-2D智能熱原儀購自天津市天大天發科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1樣品配制:感冒雙解顆粒每天人口服用量10.23 g(浸膏粉)，浸膏粉中生藥材含量為12.12 g，臨床人用劑量為0.17 g浸膏粉/kg。大鼠高、中和低給藥劑量分別為臨床等效劑量的14、7和3.5倍，給藥劑量分別為2.4 g浸膏粉/kg、1.2 g 浸膏粉/kg和0.6 g 浸膏粉/kg。大鼠給藥體積以1 mL/100 g計，配制濃度分別為：高劑量為0.24浸膏粉g/mL，中劑量0.12浸膏粉g/mL，低劑量為0.06浸膏粉g/mL。家兔高、中和低給藥劑量分別為臨床等效劑量的10、5和2.5倍。給藥劑量分別為1.7 g浸膏粉/kg、0.85 g 浸膏粉/kg和0.43 g 浸膏粉/kg，家兔給藥體積以5 mL/kg計，配制濃度分別為：高劑量為浸膏粉0.34 g/mL，中劑量為0.17 g/mL及低劑量為0.08 g/mL。

1.3.2干酵母模型的制備及感冒雙解顆粒作用考察:雄性SD大鼠70只，體質量180～200 g，實驗前3 d進行適應性測溫，使大鼠適應操作，實驗前1 d選用體溫波動不超過0.3 ℃的大鼠, 實驗當天分別測肛溫兩次，間隔30 min, 以均值作為其正常體溫，其中若體溫大于38.3 ℃或相鄰兩次體溫差值大于0.5 ℃的動物淘汰?；A體溫符合要求的動物分別皮下注射10%現配的干酵母混懸液(10 mL/kg)，于注射酵母菌后4 h 測量大鼠體溫[4], 選擇動物體溫增高0.6 ℃以上者作為實驗用(造模成功)[1]。按大鼠造模后4 h體溫增高值進行拉丁方分組，分為6組，包括: 空白組、模型組、陽性對照組(阿司匹林0.25 g/kg)、感冒雙解顆粒高(浸膏粉2.4 g/kg)、中(浸膏粉1.2 g/kg)和低(浸膏粉0.6 g/kg)劑量組(以下簡稱：高、中、低劑量組)，每組10 只動物。感冒雙解顆粒樣品組和陽性藥均給予相應藥物，給藥體積為1 mL/100 g，空白組和模型組給予同體積去離子水。各組大鼠于給藥后0.5、1、1.5、2、 3 h和4 h 分別測量大鼠肛溫。計算每只大鼠各時間點體溫與致熱前基礎體溫的差值作為體溫增高值(△℃=致熱后某時間點的體溫-基礎體溫)，結果見表1和圖1。記錄整理數據，并用SPSS統計軟件進行多組樣本的方差統計分析。

表1 感冒雙解顆粒對干酵母模型大鼠給藥前后體溫變化(n=10)

圖1 感冒雙解顆粒對干酵母模型大鼠給藥前后體溫變化曲線

1.4 細菌內毒素模型的制備及感冒雙解顆粒作用考察

2 結果

2.1 感冒雙解顆粒對干酵母模型大鼠體溫影響

各組大鼠皮下注射干酵母后，體溫開始逐步升高，4 h后除空白組外，各組大鼠的體溫均在升高0.6 ℃以上。給藥后連續觀察各組大鼠4 h內體溫變化。在0～4 h內，空白組大鼠體溫沒有明顯變化，陽性對照組(阿司匹林泡騰片0.25 g/kg)在4 h 內有效抑制了大鼠體溫的升高，給藥后0.5 h大鼠體溫明顯下降，在給藥后2 h升溫值已降至0.6 ℃以下。感冒雙解顆粒也具有抑制大鼠體溫升高的作用，高劑量組在給藥后1.5、2、3 h及4 h能明顯抑制模型大鼠體溫升高，并與模型組相比具有差異極顯著(P<0.01)，其降溫幅度在0.6 ℃左右。中劑量組和低劑量組對大鼠體溫抑制作用不明顯，與模型組相比，差異不具統計學意義(P>0.05)，結果見表1。

給藥后，各組大鼠的體溫升高曲線如圖1所示。與模型組相比，高劑量組和陽性對照組的升溫曲線明顯在模型組之下，中劑量和低劑量與模型組升溫曲線交織在一起，這表明高劑量組和陽性對照組具有抑制大鼠體溫升高的作用。從升溫曲線進一步可以看出，陽性對照組升溫曲線成斜向下的45°角下降，說明阿司匹林降溫迅速，起效時間較早，而高劑量組升溫曲線雖比模型組明顯下降，但降溫曲線相對比較平緩，說明感冒雙解顆粒降溫作用相對較為平緩，能持續一定時間。

2.2 感冒雙解顆粒對細菌內毒素模型家兔體溫影響

家兔耳緣靜脈給予細菌內毒后0.5 h，家兔體溫升高超過0.6 ℃。給藥后連續觀察各組家兔3 h內體溫變化。在0～3 h內，陽性對照組在給藥后1.5 h降溫較為明顯，2.5 h陽性對照組家兔體溫基本恢復。感冒雙解顆粒高、中劑量組在給藥后0.5～2.0 h能夠輕微抑制家兔體溫升高，但與模型組相比無顯著性差異(P>0.05)，低劑量組抑制家兔體溫升高作用不明顯，說明感冒雙解顆粒對細菌內引起的家兔體溫升高無明顯抑制作用。

表2 感冒雙解顆粒細菌內毒型家兔給藥前后體溫變化值(n=10)

由圖2可以看出，各給藥組家兔體溫升高曲線較為集中，與模型組相比，無明顯差異，僅陽性對照組在給藥后1.5 h出現體溫顯著下降，而感冒雙解顆粒高、中劑量組升溫曲線略低于模型組，進一步說明感冒雙解顆粒對細菌內引起的家兔體溫升高無明顯抑制作用。

圖2 感冒雙解顆粒對細菌內毒型家兔給藥前后體溫變化曲線

3 討論

“發熱”是臨床上的最常見癥狀，是人體因致熱原的作用而使體溫調節中樞的調定點上移而引起的，可見于多種感染性疾病和非感染性疾病[6]。以非甾體類抗炎藥(NSAID)為代表的解熱鎮痛劑是臨床應用最多、最廣泛的一類藥物，但長期使用存在很多不良反應，如胃腸道系統、心血管系統、肝臟、腎臟、中樞神經系統損害等。當前，以中藥為代表的天然藥物因其副作用少而愈來愈受到醫藥界的接受和重視，因此選擇中藥進行解熱鎮痛研究開發很有必要[7]。

干酵母發熱模型和細菌內毒發熱模型均為經典模型[8]，干酵母發熱模型是由于注射部位的局部潰爛引發的劇烈炎癥反應，引起動物體溫升高，動物全身表現與人類臨床伴內臟或皮膚有明顯炎癥的發熱類似。細菌內毒素模型則是由細菌內毒素作為致熱原激活單核巨噬細胞產生內生致熱原導致機體發熱，從而引起動物體溫升高。根據感冒雙解顆粒對這兩個經典模型的作用可以看出，感冒雙解顆粒主要針對感染、潰爛等引發的感染性疾病引起的高熱具有較好的解熱作用，對于內源性細胞因子引起的體溫升高作用不明顯。通過本實驗的研究為感冒雙解顆粒說明書的制定及臨床開發奠定良好的工作基礎，其主要的解熱作用機理還有待進一步研究。