多種血清學抗體檢測在炎癥性腸病診斷中的應用價值

龐霄君 葉玲娜 林子聞 曹倩（通訊作者）

（1浙江大學醫學院附屬邵逸夫醫院消化內科 浙江 杭州 310058）

（2浙江省天臺縣人民醫院消化內科 浙江 臺州 317200）

（3浙江省寧波市醫療中心李惠利醫院消化內科 浙江 寧波 315040）

炎癥性腸病(IBD)主要是指慢性、非特異性腸道炎癥，主要包括潰瘍性結腸炎、克羅恩病兩類疾病。目前人們主要研究的抗體分別為抗釀酒酵母抗體（ASCA），核周型抗中性粒細胞胞漿抗體(pANCA)、抗小腸杯狀細胞抗體(GAB)、抗胰外分泌腺抗體(PAB)，抗DNA結合乳鐵蛋白抗體（LFS），為提高IBD的診斷的敏感性，可采用聯合檢測的方式進行。我院選取克羅恩病（CD）病人、潰瘍性結腸炎（UC）病人為實驗組、其他腸道疾?。ㄅ懦鼵D和UC)病人、健康人群為對照組，分析不同抗體在不同類型炎癥性腸病患者的血清濃度，探究檢測炎癥性腸病相關抗體的臨床價值。

1.資料與方法

1.1 一般資料

選取2017年2月—2017年8月在浙江大學附屬邵逸夫醫院診治，并行ASCA、pANCA、GAB、PAB、LFS檢查的IBD患者245例，其中克羅恩病組184例，男128例，女56例，年齡位于13～67歲之間，平均年齡（30.3±10.1）歲；潰瘍性結腸炎組61例，男35例，女26例，年齡位于19～69歲之間，平均年齡為（43.1±12.2）歲；CD和UC的診斷標準參照2012年的炎癥性腸病診斷與治療的共識意見[1]。其他腸道疾病組（排除CD和UC）31例，男18例，女13例，年齡位于24～82歲之間，平均年齡（57.9±13.8）歲；健康體檢人群組30例，男14例，女16例，年齡位于15～51歲之間，平均年齡（32.6±9.8）歲；所有患者均知情同意，通過醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

血清學抗體的檢測：患者空腹取靜脈血，對標本隨機編盲。采用間接免疫熒光法和酶聯免疫法，試劑盒采用德國歐蒙公司，慢性炎癥性腸病抗體檢測試劑盒。按照試劑盒操作說明進行檢測，分別判定 ASCA、pANCA、GAB、PAB、LFS的檢測結果，滴度1∶10陽性即為某抗體陽性。

1.3 觀察標準

調查統計不同組患者ASCA-IgA、ASCA-IgG、pANCA-IgA、pANCA-IgG、GAB-IgA、GAB-IgG、PAB-IgA、PAB-IgG、LFSIgA、LFS-IgG檢測的陽性率，以及ASCA+/PAB+/GAB+/pANCA—/LFS—，診斷CD的敏感性和特異性，與ASCA—/PAB—/GAB—/pANCA+/LFS+，診斷UC的敏感性和特異性。

1.4 統計學方法

統計學處理：采用SPSS22.0統計軟件進行統計學處理，計量資料以±s表示，行t檢驗，計數資料采用卡方檢測，P＜0.05為差異有統計學意義。

2.結果

2.1 不同人群的5種血清學抗體陽性率的對比

潰瘍性結腸炎組患者的pANCA-IgA、pANCA-IgG、GAB-IgA、LFS-IgA、LFS-IgG檢測的陽性率顯著高于其他組患者（P＜0.05），克羅恩病組患者的ASCA-IgA、ASCA-IgG、GAB-IgG、PAB-IgA、PAB-IgG檢測的陽性率顯著高于其他組患者（P＜0.05）。見表。

表 不同組人群的5種血清學抗體陽性率對比 [%（n/n）]

2.2 不同組人群聯合檢測ASCA+/PAB+/GAB+/pANCA-/LFS—診斷CD的敏感性的特異性和敏感性對比：五種抗體聯合檢測與單獨抗體檢測，特異性有所降低（P＞0.05），但無統計學意義；特異性分別如下：ASCA-IgA：(115/122)94.3%；ASCA-IgG：(113/122)92.6%；PAB-IgA：(118/122)96.7%；PABIgG：(121/122)99.2%；GAB-IgA：(117/122)96.0%；GAB-IgG：(106/122)86.9%；聯合抗體-IgA：(104/122)85.2%；聯合抗體-IgG：（91/122）74.6%。而五種抗體聯合檢測的敏感性顯著高于單獨抗體檢測，兩者檢測的結果比較，P＜0.001，提示五種抗體聯合檢測的診斷CD的敏感性與各抗體單獨檢測，有顯著性差異。敏感性分別如下：ASCA-IgA：(49/184)26.6%；ASCAIgG：(51/184)27.7%；PAB-IgA：(40/184)21.7%；PAB-IgG：(70/184)38%；GAB-IgA：(1/184)0.5%；GAB-IgG：(45/184)24.5%；聯合抗體-IgA：（76/184）41.3%；聯合抗體-IgG：（118/184）64.1%。

2.3 聯合檢測ASCA-/PAB-/GAB-/pANCA+/LFS+診斷UC的敏感性和特異性的陽性率對比：聯合檢測的特異性有所降低，但與各抗體單獨檢測的特異性比較，P＞0.05，無統計學意義；特異性比較如下：pANCA-IgA：(242/245)98.8%；pANCAIgG：(210/245)85.7%；LFS-IgA：(226/245)92.2%；LFS-IgG：(220/245)89.8%；聯合抗體-IgA：(220/245)89.8%；聯合抗體-IgG：(194/245)79.2%。而五種抗體聯合檢測的敏感性顯著高于單獨抗體檢測，兩者檢測的結果比較，P＜0.05，提示五種抗體聯合檢測的診斷CD的敏感性與各抗體單獨檢測，有顯著性差異。敏感性比較如下：pANCA-IgA：(19/61)31.1%；pANCA-IgG：(38/61)62.3%；LFS-IgA：(19/61)31.1%；LFSIgG：(32/61)52.5%；聯合抗體-IgA：(30/61)49.2%；聯合抗體-IgG：(46/61)75.4%。

3.討論

炎癥性腸病IBD是一組發病機制不明的慢性腸道非特異性炎癥性疾病，主要包括CD和UC。普遍研究認為，IBD是由于腸道菌群觸發易感宿主導致的異常免疫反應。因此，自身抗體的檢測可作為IBD診斷的實驗室血清學指標之一[2]。ASCA，pANCA，GAB，PAB，LFS；是比較有代表性的相關自身抗體[3-5]。國內外研究表明，ASCA，PAB主要存在于CD患者，pANCA，LFS主要存在于UC患者。聯合檢測有利于CD和UC鑒別診斷[6-8]。

抗釀酒酵母抗體（ASCA）是酵母細胞壁磷酸肽甘聚糖的抗體，是一種與CD有關的血清學標志物，國外文獻報道，ASCA在CD患者中的陽性率60～70%，在UC患者中的陽性率為10～15%[8]，國內報道陽性率高低不一，我們的研究，ASCA-IgA在CD組，UC組，其他腸道疾病組及健康體檢組分別是26.6%，4.9%，6.5%，6.7%，ASCA-IgG四組中陽性率分別是27.7%，6.5%，9.7%，6.7%，這可能與研究的種族及選擇的人群不同有關，CD組與其他組有統計學差異，可以作為CD與其他疾病的鑒別診斷，但ASCA陽性率偏低，不適合作為IBD的篩查指標?？怪行粤＜毎麧{抗體（ANCA）是指與中性粒細胞、單核細胞胞漿成分發生反應的抗體，可將ANCA分為胞漿型、核周型、不典型三個方面[9]。核周型抗中性粒細胞胞漿抗體（pANCA）被認為是一種通過與腸道細菌抗原交叉反應所誘導的自身抗體，主要存在于UC患者中。據國外文獻報道，pANCA在UC，CD，其他腸道疾病患者及健康體檢中陽性率分別是41～73%；6～38%，8%，0～8%[10]，與我們的研究基本一致，可認為pANCA可作為UC與CD及其他腸道疾病的鑒別診斷。抗小腸杯狀細胞抗體（GAB）也是一種IBD相關的自身抗體，有研究表明，當患者出現潰瘍性結腸炎等情況時，常出現高滴度的抗小腸杯狀細胞抗體，其陽性率達15%～46.6%。我們的研究是GAB-IgA在CD組，UC組，其他腸道疾病組及健康體檢組陽性率分別是0.5%，8.2%，0%，0%；GAB-IgG在CD組，UC組，其他腸道疾病組及健康體檢組陽性率分別是24.5%，11.5%，16.1%，13.3%；GAB-IgA，UC組與其他組有統計學差異，而GAB-IgG在CD組與其他組有統計學差異。國內外多數文獻報道GAB檢測的陽性率，未具體指出是IgA還是IgG，其結果與我們研究的GABIgA陽性率不同，與GAB-IgG陽性率基本一致。本研究中還發現其他腸道疾病組，健康體檢組中，GAB-IgG也有一定的陽性率，提示GAB可能并非IBD特異性的血清學標志物。故GAB檢測無法作為UC和CD的鑒別指標，GAB的檢測意義有待進一步研究?？挂认傧倥菘贵w（PAB）出現在30-40%的CD患者血清中[5]，針對UC、CD的診斷和鑒別可以起到一定的作用，我們的研究結果是PAB-IgA在CD組，UC組，其他腸道疾病組及健康體檢組分別是21.7%，6.5%，0%，0%；PAB-IgG在CD組，UC組，其他腸道疾病組及健康體檢組分別是38%，1.6%，0%，0%。PAB在其他腸道疾病組及健康體檢組中均未檢出，在UC組中敏感度較低，在CD組中對比其他三組其敏感性較高。并且我們還發現，PAB在CD組中有較高的特異性，PAB-IgA96.7%，PAB-IgG99.2%，因此PAB可作為CD患者的一種篩查指標，并可作為CD與UC，其他腸道疾病的鑒別指標?？笵NA結合乳鐵蛋白抗體（LFS）[2，11]，也是炎癥性腸病患者的一種血清學標志物，目前LFS在炎癥性腸病中檢測的陽性率情況，國內外報道不多。乳鐵蛋白（LF）—DNA復合物是不典型抗中性粒細胞胞漿抗體（aANCA）的主要靶抗原之一，兩者結合形成ANCA的胞漿型抗體—抗DNA結合乳鐵蛋白抗體(LFS)，可用間接免疫熒光法和酶聯免疫吸附法檢測。LFS是潰瘍性結腸炎，自身免疫性肝炎的標志性抗體。我們的研究結果是LFS-IgA在CD組，UC組，其他腸道疾病組及健康體檢組陽性率分別是10.3%，31.1%，0%，0%；LFS-IgG在CD組，UC組，其他腸道疾病組及健康體檢組陽性率分別是11.9%，52.5%，3.2%，6.7%。故可認為LFS可作為UC與CD及其他腸道疾病的鑒別診斷。

本研究中，我們同時發現ASCA-/PAB-/GAB-/pANCA+/LFS+，五種抗體聯合檢測在潰瘍性結腸炎診斷中的敏感度顯著高于pANCA，LFS單獨檢測（P＜0.05）。ASCA+/PAB+/GAB+/pANCA-/LFS-，五種抗體聯合檢測在克羅恩病診斷中的敏感度顯著高于ASCA，PAB，GAB的單獨檢測（P＜0.001）。

綜上所述，對炎癥性腸病患者采用相關抗體檢測，其特異性較高，但缺陷為敏感性較低。pANCA與LFS的檢測對于潰瘍性結腸炎的診斷較為有效，ASCA，PAB的檢測對于克羅恩病的診斷較為有效。由于ASCA，pANCA，GAB血清抗體陽性率偏低，不適于作為IBD的篩查指標，PAB可作為CD患者的一種篩查指標。采用聯合檢測的方式可以有效的提高敏感性，這些抗體聯合檢測在CD與UC，其他腸道疾病的診斷、鑒別診斷的判定有一定作用?？贵w聯合檢測有利于炎癥性腸病的診斷更加準確，值得在臨床中進一步推廣。