一株強吸附膽固醇乳酸菌的分離鑒定及益生特性研究

曹海鵬，姬鄧紅，黃作芳，甘 濤，袁雨雨，楊良恒，姜 山

（貴州師范大學 生命科學學院，貴州 貴陽 550001）

膽固醇是人體內重要的生理物質，但是隨著人們生活水平的提高和飲食結構的改變，過量的血清膽固醇（尤其是低密度脂蛋白膽固醇）導致高血壓、冠心病及動脈硬化等心腦血管疾病的發病率逐年上升[1]。因膽固醇過高引起的心血管疾病是我國居民死亡的首要原因，其死亡率超過所有癌癥的總和[2]。據報道，血清膽固醇水平與心血管疾病發病呈正相關，膽固醇水平每高出正常水平1 mmol/L，則心血管疾病的風險便約增加35%，每降低1%，則心血疾病發病率減少2%～3%[3]。降低血清膽固醇水平的傳統方法是服用他汀類藥物、依澤替米貝和膽汁酸螯合劑等，抑制膽固醇的吸收與合成[4-6]。但是這些藥物昂貴，加重病人費用負擔，此外，還會造成橫紋肌溶解、腎功能受損及潮紅等無法逆轉的副作用[7]。因此，尋找新的、安全有效的藥物替代品具有重要意義。

大量研究表明，服用乳酸菌及其制品可以有效降低人體血清膽固醇水平。早在1974年，MANN G V[8]研究發現，非洲Masai人長期飲用由乳桿菌發酵的乳制品，其體內血清膽固醇含量普遍較低。GILLILAND S E等[9]研究了腸道乳桿菌降膽固醇機制，提出乳酸菌能在生長過程中降解膽鹽，并促進膽固醇的分解代謝，從而降低膽固醇水平的觀點。此后，國內外學者展開了大量降膽固醇乳酸菌的分離、功能和機制研究。RAI J L等[10]研究發現，一些豬糞便源乳酸菌能在膽鹽存在的情況下，直接通過菌體細胞吸收膽固醇，顯著降低發酵培養基中膽固醇的含量。KLAVER F等[11]研究發現，膽固醇能在低pH下與游離膽酸鹽共沉淀，從而降低培養基的膽固醇。馬長路等[2，12-14]從人體與動物糞便及各種食品原料中分離出各種降膽固醇乳酸菌，且這些乳酸菌均具有良好的益生特性，能較好的降低體外降膽固醇水平，表明降膽固醇乳酸菌具有較好的研究和應用價值。但是以上菌株大多是以含膽鹽的培養基為篩選培養基，所分離的菌株能水解膽鹽形成游離膽酸，游離膽酸與膽固醇在酸性條件下（pH＜5.0）共沉淀，進而降低培養基中的膽固醇水平。然而，人與其他哺乳動物腸道一般是中性的，乳酸菌在腸道內通過水解膽鹽與膽固醇共沉淀的機制幾乎不存在[15]。且上述糞便或食品來源乳酸菌的生理環境與腸道內部不同，其在腸道定植、存活時間及體內發揮活性時間均有待考證。

本研究以豬腸道黏膜內容物、人類糞便及自然發酵泡菜等為原料，從中分離、篩選出能直接通過吸附、同化等機制降膽固醇的乳酸菌，并對其進行形態學觀察及分子生物學鑒定，研究其膽固醇降解能力、抗生素敏感性及溫度、pH、0.3%牛膽鹽、模擬胃腸液對菌株耐受性的影響，探討菌株益生特性，以期為降膽固醇制劑的開發提供新的出發菌株。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

1.1.1 原料

健康成年黔北黑豬的豬腸道黏膜內容物（飼養期間未施用抗生素和任何微生態制劑等）：貴州省畢節市偏遠山區散養豬；健康成人糞便：本地健康成年男性志愿者；自然發酵泡菜：自制。

1.1.2 試劑

胃蛋白酶（酶活250 U/mg）、胰蛋白酶（酶活250 U/mg）：南京都萊生物技術有限公司；結合型牛膽鹽（99%）：上海源葉生物技術有限公司；藥敏紙片：杭州微生物試劑有限公司；膽固醇（分析純）：天津市大茂化學試劑廠；DL5000 DNA Marker：南京諾唯贊生物科技有限公司。其他化學試劑均為國產分析純。

1.1.3 培養基

MRS液體培養基[16]：蛋白胨10.0 g，牛肉膏3 g，吐溫80 1.0 mL，葡萄糖20.0 g，檸檬酸氫二銨2.0 g，乙酸鈉5.0 g，磷酸氫二鉀2.0 g，七水硫酸鎂0.58 g，硫酸錳0.25 g，蒸餾水1 000 mL，pH 6.2～6.6。121 ℃高壓滅菌20 min。MRS固體培養基是在MRS液體培養基上添加1.5%的瓊脂。

改良MRS液體培養基：在MRS液體培養基基礎上加0.05%碳酸鈣。121 ℃高壓滅菌20 min。改良MRS固體培養基是在改良MRS液體培養基上添加1.5%的瓊脂。

膽固醇培養基[17]：取膽固醇100 mg，蔗糖酯100 mg，吐溫-80 1.0 mL，冰乙酸5.0 mL，冰浴超聲破碎后，加入到改良MRS液體培養基中，加水調至膽固醇終質量濃度為100 μg/mL，pH 6.5。121 ℃滅菌20 min。

0.3%牛膽鹽培養基：在改良MRS液體培養基中加入0.3%結合型牛膽鹽。

1.2 儀器與設備

JA1003電子天平：力辰科技有限公司；DH6000B電熱恒溫培養箱：天津市泰斯特儀器有限公司；XMTA-7000智能恒溫干燥箱：上海景邁儀器設備有限公司；XSP-06光學顯微鏡：湖北省潛江市教學儀器廠；THZ-82A雙數顯旋轉氣浴震蕩器、TGL-16A高速離心機：金壇市城東新瑞儀器廠；FE20 pH計：深圳市科力易翔儀器設備有限公司；WD-9402B/D聚合酶鏈式反應（polymerase chain reaction，PCR）儀：北京六一生物科技有限公司；HVE-50高壓蒸汽滅菌鍋：日本HIRAYAMA公司；721可見分光光度計：上海佑科儀器儀表有限公司。

1.3 方法

1.3.1 人工胃液和人工腸液的制備

人工胃液[18]：氯化鈉0.2 g，胃蛋白酶1.0 g，以pH 2.0的100 mL鹽酸水溶液稀釋，溶解后調節pH至3.0，微孔濾膜過濾除菌，4 ℃保存備用。

人工腸液[18]：磷酸二氫鉀0.68 g，蒸餾水溶解，以濃度為0.1 mol/L的氫氧化鈉溶液調節pH至8.0，另取胰蛋白酶1.0 g加適量水使其溶解，將兩液混合后加水定容至100 mL，用微孔過濾膜過濾除菌，4 ℃保存備用。

1.3.2 菌株的初篩

用體積分數75%酒精消毒過的解剖剪剪開豬腸道，小心剔除腸道內容物，用消毒過的解剖刀刮取腸道黏膜附屬物，收集之后與健康成人糞便、自然發酵泡菜樣品一起進行梯度稀釋，分別稀釋至10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6及10-7等梯度，各選取10-5、10-6和10-7等梯度樣品200 μL涂布于改良MRS平板，于厭氧罐37 ℃，培養48 h，分離單菌落，分離方案參考馬長路等[2]的方法。從豬腸道黏膜樣品的改良MRS固體培養基中挑取40個乳白色、高圓隆、邊緣整齊且溶鈣圈較大等具有典型乳酸菌特征的菌落，劃線分離，多次純化后轉接改良MRS固體培養基斜面，分別編號為R-1～R-40；采取同樣的分離、純化方法，從成人糞便樣品的改良MRS固體培養基中挑取同樣形態的菌落30個，轉接斜面后分別編號FR-1～FR-30；從自制泡菜樣品的改良MRS固體培養基中挑取同樣形態的菌落30個，轉接斜面后分別編號為PF-1～PF-30。進一步將各菌株純化后，經鏡檢后進行接觸酶和過氧化氫酶試驗，篩選革蘭氏陽性、接觸酶陽性及過氧化氫酶陰性的菌株接種斜面，于4 ℃保藏備用。

1.3.3 降解膽固醇乳酸菌的復篩

將上述分離的所有保藏于MRS固體培養基斜面的菌株分別轉接入10 mL膽固醇液體培養基中，37 ℃、150 r/min振蕩培養24 h。取1 mL種子液轉接于100 mL MRS液體培養基中，同樣條件下培養24 h。取1 mL發酵液，8 000 r/min離心5 min，收集上清液，采用硫酸鐵銨法檢測上清液與未接種乳酸菌的培養基中膽固醇的含量[19]。計算膽固醇降解率，初步篩選出膽固醇降解率在10%以上的菌株進行復篩，至膽固醇降解率穩定。最終篩選膽固醇降解率最高的菌株進行后續試驗。膽固醇降解率計算公式如下：

式中：R為降解率，%；A0為培養前的膽固醇含量，μg/mL；A為培養后的膽固醇含量，μg/mL。

1.3.4 降解膽固醇乳酸菌的16S rDNA鑒定

篩選出目的菌株后，以其單菌落為脫氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid，DNA）模板進行PCR擴增。PCR擴增體系（50 μL）：細菌通用引物27F和1492R為引物，各1 μL，加入2×Taqmix 25 μL，雙蒸水23 μL。PCR擴增程序為：98 ℃預變性5 min；94 ℃變性30 s，55 ℃退火30 s，72 ℃延伸90 s，循環30次；72 ℃再延伸5 min。用1%的瓊脂糖凝膠驗證PCR產物，驗證成功的PCR產物送至上海生工生物工程有限公司進行序列分析。將所測的16S rDNA序列在美國國家生物技術信息中心（national center for biotechnology information，NCBI）GenBank中基本局部比對搜索工具（basic local alignment search tool，BLAST）比對（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/）[20]。并采用MEGA 7.0軟件的鄰近法（neighbor joining，NJ）構建系統發育樹，分析并確定菌株種類。

1.3.5 菌株生長曲線及膽固醇降解率曲線

取上述篩選出的最佳降解膽固醇菌株種子液，以1%接種量（V/V）接入200 mL膽固醇液體培養基中，于37 ℃、150 r/min震蕩培養24 h。期間分別取發酵時間為0 h、4 h、8 h、12 h、16 h、20 h、24 h的樣品各5 mL，8 000 r/min離心5 min，收集上清液，檢測各時間點上清液pH值，將剩余樣品參照方法1.3.3進行降膽固醇試驗，并計算各時間點膽固醇降解率[19]。

1.3.6 膽固醇吸附試驗

取篩選菌株的MRS培養液10 mL，制備方法同1.3.3，8 000 r/min離心5 min，棄上清收集沉淀，將沉淀用生理鹽水洗滌3次，重懸于生理鹽水中，并將菌體懸液調至原濃度的2倍，分等體積兩份，其中一份置于121 ℃滅菌20 min。將兩組菌懸液分別與等體積質量濃度為200 μg/mL的膽固醇溶液混合（膽固醇用含2%吐溫-80溶液溶解，混勻后膽固醇終質量濃度為100 μg/mL），分別取0、0.5 h、1.0 h、2.0 h、3.0 h、4.0 h、5.0 h時間點的樣品溶液1 mL，離心取上清液，參照方法1.3.3檢測膽固醇含量，計算各時間點菌體對膽固醇的清除率。

1.3.7 藥物敏感試驗

取200 μL篩選菌株菌液，制備方法同方法1.3.3，均勻涂布于MRS培養基平板中，小心放置氨芐西林、慶大霉素、頭孢唑林、四環素、丁胺卡那、環丙沙星、氯霉素、青霉素、復方新諾明、諾氟沙星及紅霉素11種抗生素藥敏紙片（藥片直徑為6 mm），每個紙片的間距≥24 mm。其中，氨芐西林、慶大霉素、青霉素和諾氟沙星每片10 μg，頭孢唑啉、四環素、丁胺卡那和氯霉素每片30 μg，環丙沙星每片5 μg，復方新諾明每片23.75 μg，紅霉素15 μg。于37 ℃靜置培養24 h后，測量并統計抑菌圈直徑。菌株對抗生素敏感性評價標準參考李艷莉[21]的方法，乳酸菌對抗生素的耐藥標準見表1。

表1 乳酸菌對抗生素的耐藥標準Table 1 Antibiotic resistance standards of lactic acid bacteria

1.3.8 菌株耐受性試驗

針對過程控制儀表應用能力的培養需求，增設高級PLC技術、現代測控系統兩門選修課程；改進電氣控制與PLC技術、控制儀表及裝置等專業課程的教學模式，如電氣控制與PLC技術增加大量的工程案例教學及利用實驗室設備進行現場編程調試等形式的技能測試環節，控制儀表及裝置利用實驗室現有儀器設備以及實驗教學平臺實施現場儀表教學，并增加平時預留查閱作業以及儀表技能測試內容；工業控制網絡課程也逐步采取考試方法改革，提高學生儀表通信與控制方面的實時設計能力。

（1）溫度耐受性

取上述制備篩選菌株的MRS培養液，制備方法同1.3.3，離心（8 000 r/min、5 min），取沉淀，生理鹽水清洗3次后重懸于等體積的生理鹽水中。將菌懸液分成等體積5份，分別置于30 ℃、35 ℃、40 ℃、45 ℃、50 ℃、55 ℃及60 ℃處理30 min，梯度稀釋至10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6及10-7等，分別選取10-5、10-6和10-7梯度樣品200 μL涂布于MRS固體培養基平板中，37 ℃培養48 h，統計乳酸菌數量，計算菌株存活率，存活率計算公式如下：

式中：S為存活率，%；A為處理后乳酸菌數量，CFU/mL；B為處理前乳酸菌數量，CFU/mL。

（2）酸、膽鹽耐受性

取篩選菌株菌液，離心棄上清，沉淀經生理鹽水清洗后重懸于等體積的生理鹽水中，并取400μL菌液接種于8 mL pH2的MRS液體培養基和0.3%牛膽鹽培養基中，37 ℃靜置培養。取處理0、2 h、4 h、6 h的菌液稀釋涂布于改良MRS平板，并置于厭氧培養罐中，37 ℃靜置培養36 h。從稀釋度較高（稀釋度為10-6）的平板中統計乳酸菌數，計算菌株存活率[23]。

（3）模擬胃腸液耐受性

取篩選菌株菌懸液400 μL，接種于8 mL人工胃液和人工腸液中，37 ℃靜置培養6 h。取0、2 h、4 h、6 h稀釋液涂布于改良MRS平板中。靜置培養后，從稀釋度較高（稀釋度為10-6）的平板中統計菌落數，計算菌株存活率[22]。

1.3.9 數據分析

以上數據均為3次重復，實驗數據以“平均值±標準差”表示。采用Excel 2017進行分析、處理與制圖。

2 結果與分析

2.1 菌株的初篩

從豬腸道黏膜內容物、成人糞便、自然發酵泡菜樣品中分離的100株菌株的菌落特征均為乳白色、高隆起、邊緣整齊，產酸能力強，有乳香味，其表菌株的菌落形態特征見圖1。所有分離菌株革蘭氏染色鏡檢結果為紫色，為革蘭氏陽性菌，且接觸酶陽性、過氧化氫酶陰性，具備典型的乳酸菌理化特征。結合形態學特征及生理生化試驗可以初步判斷所分離菌株為乳酸菌。

圖1 分離代表菌株的菌落形態Fig.1 Colony morphology of isolated representative strains

2.2 降解膽固醇乳酸菌的篩選

將上述分離的100株菌株分別接入膽固醇培養基中培養24 h，采用硫酸鐵銨法檢測發酵液與對照培養基中膽固醇的含量，經復篩共篩選出19株膽固醇降解率在10%以上的乳酸菌菌株，結果見圖2。

由圖2可知，豬腸道黏膜內容物源、成人糞便、自制泡菜源降解膽固醇菌株分別有6株、3株、10株，這可能與糞便中微生物過于集中、且多為糞腸球菌等有關[2]；菌株R-15的膽固醇降解率最高，為60.5%；菌株R-21和PF-28膽固醇降解率均＞30%。除菌株R-15之外，其余分離菌株的膽固醇降解率普遍低于當前研究報告中乳酸菌的膽固醇降解率[2，12-13，19]。本研究以非膽鹽培養基為篩選培養基，排除膽鹽共沉淀干擾，篩選出能直接吸附或同化膽固醇的乳酸菌。其中，豬腸道黏膜源菌株R-15能直接吸附或同化培養基中約60%以上的膽固醇，降膽固醇性能穩定，受環境干擾少，具有更重要的研究意義和應用價值。因此，后續試驗均使用菌株R-15為出發菌株。

圖2 分離菌株的膽固醇降解率Fig.2 Cholesterol degradation rates of isolated strains

2.3 菌株R-15的16S rDNA鑒定結果

PCR產物經凝膠電泳驗證，菌株R-15的16S rDNA的長度見圖3。

圖3 菌株R-15的16S rDNA PCR擴增產物瓊脂糖凝膠電泳結果Fig.3 Agarose gel electrophoresis results of PCR amplification product of 16S rDNA of strain R-15

由圖3可知，PCR擴增的DNA片段長度約1 500 bp。測序后，將16S rDNA測序序列提交GenBank進行BLAST比對（http：//www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/），結果顯示菌株R-15的16S rDNA序列與數據庫中的Lactiplantibacillus plantarumATG-K6的同源率較高（＞99%）。選取同源性較高乳酸菌的16S rDNA序列，采用NJ法構建系統發育樹，結果見圖4。由圖4可知，菌株R-15與植物乳桿菌（Lactiplantibacillus plantarum）聚于一支，親緣關系最近。結合菌株的菌落特征，鑒定菌株其為植物乳桿菌，并將其命名為植物乳桿菌（Lactiplantibacillus plantarum）R-15。并將菌株R-15保藏于中國典型培養物保藏中心（China center for type culture collection，CCTCC），保藏編號為CCTCC M2018010。

圖4 基于16S rDNA序列菌株R-15系統發育樹Fig.4 Phylogenetic tree of strain R-15 based on 16S rDNA sequence

2.4 菌株R-15生長曲線及膽固醇降解率曲線

菌株R-15生長曲線與膽固醇降解率結果曲線見圖5。由圖5可知，菌株R-15液體培養時生長迅速，菌種濃度在12 h時基本達到穩定（12～24 h）。膽固醇的降解率變化與菌體生長量（OD600nm值）基本一致，菌株R-15在8～12 h降膽固醇效果更好，培養12 h時，其膽固醇降解率達50%以上，表明菌株R-15對膽固醇的降解主要發生在微生物生長期，與菌體生長量有直接關系，即降解機制主要為同化或細胞吸收。

圖5 菌株R-15生長曲線與膽固醇降解率Fig.5 Growth curve and cholesterol degradation rates of strain R-15

2.5 菌株R-15膽固醇吸附試驗

菌株R-15對膽固醇的吸附率隨時間變化結果見圖6。由圖6可知，菌株R-15的活菌與死菌的膽固醇吸附曲線一致，但菌株R-15的活菌能迅速吸附大量的膽固醇。當吸附時間為0.5 h時，活菌的膽固醇吸附率在50%以上（吸附速率高達109.4 μg/（mL·h），隨著吸附時間在0.5～1.0 h范圍內的增加，活菌的膽固醇吸附率明顯增加；繼續增加吸附時間至4 h，膽固醇吸附率增加至最高值，為70%；隨后，繼續延長吸附時間，膽固醇吸附率有所下降。死菌膽固醇吸附較慢，當吸附時間為0.5 h時，死菌膽固醇吸附率約為34.77%，延長吸附時間至4.0 h，膽固醇吸附率逐漸增加；當吸附時間＞4.0 h，吸附率逐漸平穩，達到70%左右。當吸附時間為4 h時，休眠菌體與死亡菌體的膽固醇吸附率均達70%。數據表明，植物乳桿菌R-15對膽固醇的降解機制主要為細胞吸附，吸附能力強且迅速，與李杰等[18，24-25]研究結論一致，說明吸附是部分乳酸菌體外降膽固醇的主要機制；菌體滅活后會影響其吸附速率，但不影響其最終吸附率。

圖6 菌株R-15對膽固醇的吸附率隨時間變化結果Fig.6 Change of adsorption rates of strain R-15 to cholesterol with time

2.6 菌株R-15藥敏試驗結果

菌株R-15的藥敏試驗結果見圖7。由圖7可知，菌株R-15對氨芐西林、頭孢唑啉、氯霉素和青霉素等敏感，藥敏直徑均＞6 mm；對紅霉素中度敏感，藥敏直徑約20 mm；對四環素耐藥，藥敏直徑≤14 mm；對喹諾酮類諾氟沙星和環丙沙星，氨基糖苷類慶大霉素和丁胺卡那及磺胺類復方新諾明等完全耐藥。乳酸菌的多重耐藥現象有利于其在抗生素存在的情況存活，或與相關抗生素聯用治療細菌性疾病。但多重耐藥現象的存在增大了耐藥基因種間轉移的風險，存在一定的生物安全問題，需進一步研究其耐藥機制和耐藥基因遺傳轉移的潛在可能性[24-25]。

圖7 菌株R-15的藥敏試驗結果Fig.7 Results of drug sensitivity tests of strain R-15

2.7 菌株R15耐受性試驗結果

2.7.1 溫度耐受性

不同溫度處理30 min條件下菌株R-15的存活率結果見圖8。由圖8可知，處理溫度范圍在30～45 ℃時，菌株R-15活菌數基本無變化；當處理溫度高于50 ℃時，菌株R-15的存活率開始有所下降；當處理溫度達60 ℃時，存活率降至約40%。說明分離菌株對溫度有一定耐受性，在一定程度上能抵抗巴氏消毒、薄膜蒸發或熱氣流干燥等處理，便于食品工業或微生態制劑生產及加工。

圖8 不同溫度處理下菌株R-15的存活率Fig.8 Survival rates of strain R-15 after treatment under different temperature

2.7.2 酸、膽鹽耐受性

人和哺乳動物的胃消化道環境是酸性的，空腹時胃消化液pH一般＜2.0。乳酸菌作為腸道益生菌需要具備一定的耐酸性能，以確保其能順利通過酸性胃消化道進入腸道，發揮益生功能。另外，哺乳動物腸道一般含有0.03%～0.30%膽鹽，乳酸菌必須對高濃度膽鹽有一定的耐受性，以確保其順利通過消化道，才能在腸道內存活、增殖或定植，發揮益生活性[7]。菌株R-15的耐酸、耐膽鹽試驗結果見圖9。由圖9可知，菌株R-15在pH 2.0條件下，隨著處理時間在0～6 h范圍內的延長，其乳酸菌活菌數對數值逐漸下降；至處理時間6 h時，乳酸菌活菌數對數值下降至6.83，較初始值下降1.34。在0.3%牛膽鹽條件下，隨著處理時間在0～6 h范圍內的延長，菌株R-15活菌數對數值逐漸下降；處理時間6 h時，對數值降至6.12，較初始值下降2.05。與陳儀婷等[26]所分離乳酸菌相比，菌株R-15對酸和膽鹽的抵抗力較弱，但考慮到乳酸菌隨食物通過胃的時間一般小于4 h，且腸道內不會一直處于高膽鹽濃度，該乳酸菌已滿足其基本生存條件[19]。另外，菌株R-15降膽固醇主要機制是吸附，即使死菌依然有較強的降膽固醇性能。

圖9 菌株R-15的耐酸、耐膽鹽試驗結果Fig.9 Resistance results of strain R-15 to acid and bile salt

2.7.3 模擬胃腸液耐受性

益生菌經過胃腸道環境時，除受低pH、高濃度膽鹽影響，還要承受胃蛋白酶、胰蛋白酶等多種消化酶的影響。菌株R-15在模擬胃腸液中的活菌數對數值隨時間的變化見圖10。由圖10可知，該菌株在模擬胃液、模擬腸液中連續處理6 h時，其活菌數對數值呈逐漸較小的趨勢，模擬胃液中乳酸菌活菌數對數值比初始值僅減少1.54；模擬腸液中乳酸菌活菌數對數值減少1.05。表明菌株R-15在模擬胃腸液中有一定的穩定性，對胃蛋白酶和胰蛋白酶具有一定的抵抗力，有助于其通過消化道，在腸道內發揮活性。

圖10 菌株R-15的模擬胃液耐受性試驗結果Fig.10 Resistance results of strain R-15 to simulated gastric juice

3 結論

本研究以未施用過抗生素的健康成年黔北黑豬的腸道黏膜內容物、本地健康陳年人糞便和自然發酵泡菜為原料，從腸道黏膜內容物中篩選出1株具有極強吸附膽固醇能力的乳酸菌R-15；分子生物學鑒定結果表明，該菌株為植物乳桿菌（Lactiplantibacillus plantarum）；菌株R-15降膽固醇能力與菌株的生長量（OD600nm值）呈正相關，主要機制為吸附作用；當吸附時間為4.0 h時，活菌與死菌的膽固醇吸附率相近（70%）；對氨芐西林和頭孢唑啉較敏感，藥敏直徑約為30 mm；可耐受30～45 ℃的溫度；對pH2、0.3%膽鹽、模擬胃腸液具有一定耐受性。因此，該菌株在預防和治療高膽固醇疾病方面具有一定的研究意義和應用價值。