呼吸道病原體九聯檢聯合痰培養在小兒支氣管肺炎診斷中的應用價值

楊敏怡，岑麗蓮

（1.廣東肇慶端州區婦幼保健院 檢驗科，廣東 肇慶 526040；2.廣東肇慶市第一人民醫院 檢驗科，廣東 肇慶 526040）

0 引言

支氣管肺炎為兒童發病率較高的呼吸道感染性疾病，病原體傳播速度較快，再加上小兒機體免疫力相對低下，如果不及時予以治療，可并發多臟器衰竭，危害患兒身心健康[1]。因此，盡早診療小兒支氣管肺炎有重要的意義。小兒支氣管肺炎的臨床癥狀體征無特異性，導致肺炎發生的病原體種類多樣，以往臨床常單一應用痰培養進行檢測，但其操作復雜、耗時長，易受外界因素影響，使其漏診誤診[2]。近年隨著實驗室檢測技術的不斷發展，呼吸道病原體九聯檢逐漸應用于呼吸道感染性疾病診斷中。現為進一步探究呼吸道病原體九聯檢聯合痰培養在小兒支氣管肺炎診斷中的應用價值，特做如下研究。

1 資料和方法

1.1 一般資料

選擇2020年1月-2021年4月到肇慶市端州區婦幼保健院就診250例支氣管肺炎患兒進行研究，納入標準：①符合《諸福棠兒科學（第7版）》[3]中支氣管肺炎的相關診斷標準；②無重要臟器疾病或其他肺部疾病；③家屬同意患兒進行痰培養、呼吸道病原體九聯檢。排除標準：①不配合血樣本或痰樣本取樣的患兒；②伴有其他感染性疾病。此次研究患兒中男133例，女117例，年齡6個月至11歲，平均（5.16±0.92）歲，病程2～14d，平均（7.09±2.24）d。

1.2 方法

1.2.1 痰培養

250例患兒均接受痰培養，具體方法：①采集痰樣本：對于不能自主咳痰的兒童，應用口腔一次性無菌吸痰管深插，在負壓吸取痰液作為樣本，存于無菌容器內送到生物檢驗室進行細菌培養檢測。對于可自主咳痰的兒童，指導其先用清水漱口，深呼吸用力咳嗽，將咳出的痰液保存到無菌容器內送檢；②檢測步驟：吸取痰樣本接種于培養皿中，在室溫35℃、二氧化碳濃度為5%的環境生化培養箱中孵育分離培養18～24h，觀察菌落的形態，涂片并進行鏡檢。再挑取單個純菌落應用梅里埃ATB細菌鑒定分析儀進行菌株鑒定。

1.2.2 呼吸道病原體九聯檢

對于痰培養陰性的患兒，進一步進行呼吸道病原體九聯檢，具體方法：采集患兒的肘靜脈血樣本2mL，先進行離心處理（離心速率3000r/min）10min，吸取上清液采用間接免疫熒光法進行檢測，觀察血清中的待測抗體與抗原結合情況，除去未能結合的抗體，而抗原-抗體復合物進行干燥、封片處理，在熒光顯微鏡下觀察結果。嚴格按照九項呼吸道感染病原體IgM抗體檢測試劑盒（包括肺炎支原體IgM抗體、嗜肺軍團菌1型IgM抗體、肺炎衣原體IgM抗體、Q熱立克次體IgM抗體、呼吸道合胞病毒IgM抗體、腺病毒IgM抗體、流感病毒甲型IgM抗體、流感病毒乙型IgM抗體、副流感病毒IgM抗體）說明書進行操作，而且為了保障檢測有效性，每一次試驗操作均進行陽性、陰性對比。

1.3 觀察指標

記錄患兒痰培養、呼吸道病原體九聯檢的檢測結果，分析其結果的差異。

1.4 統計學方法

應用Microsoft Excel 2013軟件整理數據，并將錄入的數據輸入到SPSS 20.0中進行處理，細菌種類及病原體類型屬于計數資料，以百分比表現，行卡方檢驗。

2 結果

2.1 痰培養結果

250例患兒痰樣本檢測中174例陽性（69.60%），76例陰性（30.40%）。174例陽性共檢出226株致病菌，以革蘭氏陰性菌為主，菌株具體構成比前5名菌種為肺炎克雷伯菌（26.99%）、大腸埃希氏菌（23.45%）、銅綠假單胞菌（12.39%）、金黃色葡萄球菌（11.06%）、鮑曼不動桿菌（9.29%），具體見表1。

表1 痰培養結果

2.2 呼吸道病原體九聯檢結果

76例痰培養陰性患兒呼吸道病原體九聯檢均為陽性，其中肺炎支原體占22.37%、嗜肺軍團菌 1型占6.58%、肺炎衣原體占13.16%、Q熱立克次體占13.16%、呼吸道合胞病毒占6.58%、腺病毒占6.58%、流感病毒甲型占10.53%、流感病毒乙型占6.58%、副流感病毒構成比占14.47%，見表2。

表2 呼吸道病原體九聯檢結果

3 討論

小兒支氣管肺炎在兒科門診中極為常見，其病原體感染以細菌、病毒、支原體等為主，臨床癥狀多為咳嗽、咳痰、發熱、氣促等，嚴重的還會出現食欲下降、嗜睡，在體征方面可聞及肺部呼吸音變弱、濕啰音，呼吸頻率和心率增加等。支氣管肺炎患兒若不予以及時有效診療，可促使病情急劇惡化，損害各項組織臟器，治療難度顯著增加。因此臨床應做好小兒支氣管肺炎的診斷，及時為患者提供準確有效的治療方案，促進其盡快康復。

針對小兒支氣管肺炎的診斷，常用方法有痰培養、血培養、肺泡灌洗等，肺泡灌洗為侵入性操作，可損傷患兒機體組織，患兒的耐受性一般較差，臨床較為少用；血培養對肺炎致病菌的檢測陽性率較低，診斷價值不高[4]。痰培養為當前臨床診斷肺炎的主要手段，其能夠培養出細菌、真菌等致病菌，而且在培養后進行涂片時還可以鑒別細菌是革蘭氏陰性菌還是革蘭氏陽性菌，這對于診斷疾病和制定針對性治療方案具有一定的臨床價值[5]。但是痰培養的檢測過程復雜，耗時較長，干擾因素多等，極易造成檢測不準確，陽性率較低。因此，尋找一種可靠的檢測方案與痰培養結合應用對于提升診斷準確率具有重要的意義。

近年也越來越多研究報道[6]，病毒、支原體是呼吸道感染發生主要病原體之一，故在支氣管肺炎病原體篩查中應重視非典型病原體的抗體檢測。隨著現代檢測技術的飛速發展，呼吸道感染性疾病的診斷技術也在不斷進步，呼吸道病原體九聯檢應用越來越廣泛。呼吸道病原體九聯檢主要是應用間接免疫熒光法分析受檢者血清中肺炎支原體、嗜肺軍團菌1型、肺炎衣原體、Q熱立克次體、呼吸道合胞病毒、腺病毒、流感病毒甲型、流感病毒乙型、副流感病毒9種常見病原體的IgM抗體分布情況[7]。其檢測原理是在檢測過程中將血清樣本滴加到載玻片上，使血清抗原與特異性抗體結合發生免疫反應，進而生成抗體復合物，并通過熒光鏡檢明確形成抗體復合物的相應特異性抗體，進而明確其感染病原體類型[8]。相關研究也證實[9]，呼吸道病原體九聯檢不僅能夠檢出單一致病病原體，還能夠對多個病原體的感染狀況進行診斷，具有特異性強、準確率高、檢測速度快等優點，可顯著提升肺炎的診斷準確率，使治療更具針對性，療效更好。

本研究對支氣管肺炎患兒予以呼吸道病原體九聯檢聯合痰培養檢測，結果顯示，250例患兒痰樣本檢出174例陽性（陽性率69.60%），共有226株致病菌，構成比前5名分別為肺炎克雷伯菌、大腸埃希氏菌、銅綠假單胞菌、金黃色葡萄球菌、鮑曼不動桿菌。此外，76例痰培養陰性患兒呼吸道病原體九聯檢均為陽性，其中肺炎支原體占22.37%、嗜肺軍團菌1型占6.58%、肺炎衣原體占13.16%、Q熱立克次體占13.16%、呼吸道合胞病毒占6.58%、腺病毒占6.58%、流感病毒甲型占10.53%、流感病毒乙型占6.58%、副流感病毒構成比占14.47%，提示痰培養能夠對細菌、真菌感染進行鑒別，而呼吸道病原體九聯檢可檢出病毒、支原體、衣原體等病原體，故呼吸道病原體九聯檢聯合痰培養能夠全面分析評價患兒細菌、真菌、病毒、支原體、衣原體等病原體感染情況，檢測范圍廣，有效避免漏診，顯著升高檢測陽性率，為后續治療及患兒預后判斷提供可靠的依據[10-11]。尤其是對于痰培養陰性的支氣管肺炎患兒，更應重視其血清中非典型病原體抗體檢測，根據檢測結果選用對非典型病原體敏感的藥物，予以科學合理的治療[12]。

綜上所述，呼吸道病原體九聯檢具有操作簡單、檢測快速、準確率高、特異性強、檢測項目多、費用低等優點，可早期發現非典型病原體。在小兒支氣管肺炎診斷中聯合應用呼吸道病原體九聯檢和痰培養有協同互補作用，可以全面早期確定致病病原體，提高引起支氣管肺炎發生的病原體類型診斷準確率，為臨床制定科學合理的治療方案提供重要的參考依據，也有利于臨床合理用藥治療，避免抗生素濫用。