上杭縣禽流感一免和二免免疫效果對比與分析

范永嬋 上杭縣動物疫病預防控制中心 福建上杭 364200

禽流感（Avian influenza，AI）是由A型流感病毒（AIV）引起的一種從呼吸系統到全身嚴重敗血等多種癥狀的禽類烈性傳染病，不僅嚴重危害養禽業，而且對公共衛生安全構成了極大威脅。世界動物衛生組織將其列為A類傳染病，我國將其列為一類動物疫病。疫苗免疫是有效防控禽流感最重要的手段之一。為掌握禽流感疫苗不同免疫次數產生的免疫效果，進行禽流感疫苗一免和二免試驗，對免疫效果進行對比與分析。

1 材料與方法

1.1 試劑禽流感病毒H5亞型Re-11株、H7亞型Re-3株血凝抑制試驗抗原，陽性血清、陰性血清購自哈爾濱國生生物科技股份有限公司；1%紅細胞懸液、磷酸鹽緩沖液由實驗室自配。

1.2 疫苗重組禽流感病毒（H5＋H7）三價滅活疫苗（H5N1Re-11株+Re-12株、H7N9H7-Re3株）來自政府統一采購。

1.3 器材一次性96孔V型微量反應板、單道與多道移液器、低速臺式離心機、微量振蕩器、1.5 mL離心管等。

1.4 樣品來源血清樣品采自上杭縣臨城鎮4家規模禽場（2家河田雞場、2家番鴨場）。

1.5 樣品處理與保存翅靜脈采集2 mL血液樣品，3 000 r/min離心3 min，取上層血清倒入1.5 mL離心管并編號，置-20℃冰箱保存，備檢。

1.6 檢測方法根據GB/T18936-2020《高致病性禽流感診斷技術》規定，采用血凝（HA）和血凝抑制試驗（HI）微量法。

1.7 結果判定HI抗體效價≥4log2，判定為免疫合格，HI抗體效價≤3log2，判定為免疫不合格；免疫抗體檢測合格數達到抽檢總數的70%以上，判定為群體免疫合格。

2 結果與分析

2.1 各規模禽場存欄數、免疫及樣本采集情況2021年6～8月，選取臨城鎮飼養管理水平相當的4家規模禽場進行禽流感一免和二免免疫效果對比。各場存欄數、免疫及樣本采集情況見表1。

表1 各規模禽場存欄數、免疫及樣本采集情況

2.2 禽流感H5Re-11株一免抗體檢測結果兩家規模雞場一免H5Re-11株的抗體合格率分別為86.7%、83.3%，抗體效價達到6log2以上的血樣共33份，占檢測總數的55%；兩家規模鴨場一免H5Re-11株的抗體合格率分別為60.0%、63.3%，抗體效價達到6log2以上的血樣共14份，占檢測總數的23.3%，見表2。結果表明，一免雞群H5Re-11株免疫抗體合格率明顯高于一免鴨群，超過農業農村部規定≥70%的標準，且雞群血樣抗體效價達到6log2以上的比鴨群多得多，能起到較好的群體保護作用。一免鴨群H5Re-11株的免疫抗體合格率低于農業農村部規定的標準，存在發生疫病的風險。

表2 H5Re-11株一免抗體檢測結果

2.3 禽流感H7Re-3株一免抗體檢測結果兩家規模雞場一免H7Re-3株的抗體合格率分別為83.3%、80.0%，抗體效價達到6log2以上的血樣共27份，占檢測總數的45.0%；兩家規模鴨場一免H7Re-3株的抗體合格率均為53.3%，抗體效價達到6log2以上的血樣10份，占檢測總數的16.7%，見表3。結果表明，一免雞群H7Re-3株免疫抗體合格率明顯高于一免鴨群，超過農業農村部規定的標準，且抗體效價達到6log2以上的血樣遠遠多于鴨群，能起到群體保護作用。鴨群一免H7Re-3株的抗體合格率低于農業農村部規定的標準，存在發生疫病的風險。

表3 H7Re-3株一免抗體檢測結果

2.4 禽流感H5Re-11株不同免疫次數抗體檢測結果雞群二免H5Re-11株的抗體合格率為100%，抗體效價集中在8log2；鴨群的二免抗體合格率為83.3%，抗體效價大部分集中在6log2、7log2。雞群未開展二免H5Re-11株的抗體合格率為86.7%，鴨群為60.0%，見表4。結果表明，雞群和鴨群二免H5Re-11株的抗體合格率分別大大高于一免雞群和鴨群。通過二免，雞群抗體效價更高且整齊度較好，鴨群略差。

表4 H5Re-11株不同免疫次數抗體檢測結果

2.5 禽流感H7Re-3株不同免次數抗體檢測結果雞群二免H7Re-3株的抗體合格率為100%，抗體效價集中在8log2；鴨群抗體合格率為80.0%，抗體效價大部分集中在6log2、7log2。雞群未開展二免H7Re-3株的抗體合格率為83.3%，鴨群為56.7%，見表5。結果表明，雞群和鴨群二免H7Re-3株的抗體合格率分別大大高于一免雞群和鴨群。通過二免，雞群抗體效價更高且整齊度較好，鴨群略差。

表5 H7Re-3株不同免次數抗體檢測結果

2.6 不同禽場、不同免疫次數抗體檢測總體情況一免雞群的抗體合格率大大超過一免鴨群，二免雞群和鴨群的抗體合格率均明顯高于一免。H5Re-11株的免疫抗體合格率高于H7Re-3株，見表6。結果表明，雞群的免疫效果比鴨群好，H5Re-11株的免疫效果比H7Re-3株好。

表6 不同禽場、不同免疫次數抗體檢測匯總表

3 小結與討論

1）試驗結果表明，雞群的免疫效果好于鴨群，二免免疫效果相較一免效價更高、更整齊。在生產實踐中，雞群要獲得較好的免疫效果，建議實行二免；對于鴨群，必須實施二免才能達到足夠的群體保護率。

2）本試驗結果顯示H5Re-11株的免疫抗體合格率高于H7Re-3株，在多年的免疫監測工作中也發現其他二價苗也有相類似的情況，這是否與檢測數量、疫苗中抗原相互競爭或抗原含量的多少存在相關性，有待進一步探討。

3）高致病性禽流感是導致家禽死亡的主要疫病之一，制定合理的免疫程序，加強飼養管理，提高免疫接種技術，免疫接種前后1周不使用磺胺類、呋喃類抑制抗體產生的藥物，不安排消毒、轉群等以減少應激，免疫接種前在飲水中添加電解多維、黃芪多糖等，可有效提高免疫效果。