鹽酸青藤堿治療類風濕關節炎新劑型研究進展

張二兵， 劉文亮， 胡勝濤， 林 也， 張 逢， 宋厚盼， 黃 丹， 嚴建業，劉 斌， 黃宇明， 蔡 雄*， 劉 良

[1.湖南中醫藥大學中藥粉體與創新藥物省部共建國家重點實驗室(培育基地)，湖南 長沙 410208；2.深圳市藥品檢驗研究院，廣東 深圳 518057；3.湖南大學生物學院，湖南 長沙 410082；4.湖南正清制藥集團股份有限公司，湖南 懷化 418000；5.澳門科技大學中藥質量研究國家重點實驗室，澳門 氹仔 999078]

青藤堿是從防己科植物青風藤Sinomeniumacutum(Thunb.) Rehd.et Wils.和毛青藤Sinomeniumacutum(Thunb.) Rehd.et Wils.var.cinereumrehd.et Wils.的干燥藤莖中分離提取的一種生物堿單體，因其難溶于水，藥用多為鹽酸青藤堿[1]。藥理藥效學研究表明青藤堿具有鎮痛、抗炎、免疫抑制、抗心律失常等多種生物活性，臨床已有正清風痛寧片及緩釋片、鹽酸青藤堿注射液、毛青藤總堿片等制劑應用于類風濕關節炎、心律失常等疾病[2]。鹽酸青藤堿普通制劑對光、熱、堿不穩定,易分解，生物半衰期短，生物利用度低，且易促進機體組胺釋放而致皮疹、胃腸道不適等不良反應[3]，從而限制了其在類風濕關節炎中的廣泛應用。為此，國內外學者結合藥物制劑理論與新技術對鹽酸青藤堿進行劑型改進，研制出了鹽酸青藤堿新劑型(如緩控釋片劑、緩釋微球注射劑及凝膠劑等)。本文結合近年來國內外對鹽酸青藤堿治療類風濕關節炎研制的新劑型按各給藥途徑進行綜述，以期為后續開展青藤堿增效減毒新型制劑研發及其合理應用于類風濕關節炎提供參考。

1 口服給藥制劑

1.1 緩控釋片 正清風痛寧緩釋片由湖南正清制藥集團研制并于2001年上市，該制劑可以增強鹽酸青藤堿治療類風濕關節炎的療效、減少患者服藥次數，彌補口服普通片劑生物半衰期短、生物利用度低、長期服用導致的毒性積累等缺陷[4]。藥劑學研究表明，該制劑通常以羥丙基甲基纖維素(HPMC)為骨架材料，以調節各性能載體材料與藥物用量之間的比例進而實現不同的釋藥速率，也稱為緩釋骨架片。然而研究發現，采用HPMC為骨架材料制備緩控釋片時，制造成本較高、對設備要求高、產品收率低，進而限制工業化生產。因此，尋找新的替代骨架材料成為研究者們的突破點。目前，除了選擇國產HPMC為骨架材料代替進口HPMC外，亦有新的骨架材料被發現。洪怡等[5]以乙基纖維素(EC)代替HPMC制備鹽酸青藤堿緩釋片并對處方進行優化，其制備工藝簡單，且制備的緩釋片釋放行為符合一級釋放方程，12 h釋放度>75%，與HPMC為骨架材料制備的正清風痛寧緩釋片相比無顯著差異(P>0.05)。

將緩控釋片按釋藥機理對其劃分，除了骨架型緩控釋片外，還包括膜控型和滲透泵型緩控釋片。劉偉等[6]以鹽酸青藤堿為模型藥物制備膜控型腸溶控釋片，體外釋藥受致孔劑pH的影響，鹽酸青藤堿在pH>5.8的PBS中釋放行為符合零級動力學方程。辛偉等[7]制備鹽酸青藤堿滲透泵控釋片并對釋放度進行考察，采用以滲透壓差為釋藥動力的釋藥模式，體外可控制釋藥16 h，藥物釋放曲線也符合零級釋藥模型。同時將制備的各緩控釋片劑與普通片劑比較，緩釋片劑在類風濕關節炎患者體內血藥濃度平穩，有效血藥濃度維持時間較長，且可減少血藥濃度“峰谷”現象，使得鹽酸青藤堿的毒副反應減小，服用更為方便。因類風濕關節炎發病具有晝夜節律特性，一般在凌晨五六點病情加重，張瑜等[8]研制鹽酸青藤堿延遲起釋型緩釋片，其為將時間因素引入藥物釋放的新型口服擇時釋藥系統，具有擇時和緩釋的雙重作用，可以在預定時間迅速或緩慢釋放藥物，從而降低鹽酸青藤堿的毒副作用，提高其療效。除了以上緩控釋片劑外，目前還有鹽酸青藤堿胃滯留型擇時釋藥片[8]、漂浮型脈沖釋放片[9]等處于研發階段。

1.2 緩控釋微丸 近年來隨著藥物制劑新技術的不斷發展，緩控釋釋藥體系由一個單元(如片劑)向多單元(如微丸)釋藥體系發展。緩控釋微丸作為一種劑量分散性制劑，是藥物與阻滯劑混合制成小丸或者先制成普通丸芯后再包緩控釋膜而成的小型丸劑，其直徑為0.5～1.5 mm，可裝入膠囊、壓制成片劑等其他固體制劑供臨床使用[10]。按其釋藥機理可分為3種類型，分別為骨架型微丸、膜控型微丸和骨架與膜控結合型微丸。與其他口服固體制劑相比，微丸具有粒徑均勻、流動性好、受胃的排空影響較小使藥物生物利用度高、與胃腸道的接觸面積大從而降低藥物對局部的刺激性等優點[11]，因而倍受藥學研究者們青睞。李世根等[12]按骨架與膜控結合型釋藥機理將鹽酸青藤堿以EC和HPMC作為緩釋骨架材料制備成腸溶緩釋微丸，體外釋放結果顯示微丸體外釋放符合Higuchi釋藥模型，且在人工胃液中釋放度<10%，在人工腸液12 h釋放度>75%，緩釋效果明顯。故將鹽酸青藤堿制備成緩控釋微丸是最理想治療類風濕關節炎的新劑型之一。

1.3 脂質體緩釋片 脂質體作為一種新型藥物載體，是由磷脂和膽固醇等組成的類似于生物膜結構的雙分子層微小囊泡，具有靶向性、緩釋性、良好的生物相容性及生物可降解性，因其磷脂結構的特殊性既可以作為脂溶性藥物載體又可以作為水溶性藥物載體，故其被廣泛的應用于藥物劑型當中[13]。因鹽酸青藤堿具有較強的水溶性，故以脂質體為載體結合藥劑學制劑技術將鹽酸青藤堿制備成脂質體緩釋片，可作為一種新型的緩釋制劑用于治療類風濕關節炎。馬延升等[14]將其制備的鹽酸青藤堿脂質體緩釋片與普通片在健康人體中進行生物等效性研究，結果表明2種制劑的AUC0～24 h、AUC0～∞具有生物等效性和口服吸收程度等效，且脂質體緩釋片的達峰時間明顯滯后普通片劑，顯示該劑型具有緩釋特征。同時，亦可將鹽酸青藤堿借助于長循環脂質體制備成其他口服制劑(如片劑、膠囊劑等)，可增加鹽酸青藤堿體內循環時間，延長消除半衰期，比一般脂質體具有更好的緩釋特性。

1.4 其他 王銳等[15]利用微型包囊技術將鹽酸青藤堿制備成緩釋微囊，并對其體外釋藥特性進行研究，發現其制備的鹽酸青藤堿緩釋微囊穩定性好、成囊率高及載藥量穩定。此外，將鹽酸青藤堿作為模型藥物，以納米材料為載體，使其結合納米技術可以制備出粒徑小、穩定性好、可緩控釋的納米制劑。郭留城等[16]以固體脂質納米粒為載體，并以HPMC為骨架緩釋材料，制備了鹽酸青藤堿固體脂質納米粒凝膠骨架緩釋片，研究表明其體外釋放符合一級釋藥模型，累積釋放度在12 h內可達90.15%，體外具有良好的緩釋特征。因此，結合目前對鹽酸青藤堿口服制劑的研究發現其多以緩控釋制劑為研究目標，以期提高口服給藥的生物利用度，減少類風濕關節炎患者的服藥次數。故現將各類緩控釋口服制劑所用的載體材料進行歸納總結，比較各緩控釋載體材料所存在的優缺點(表1)，為制備具有更好緩控釋性、靶向性的鹽酸青藤堿口服給藥新劑型奠定基礎。

表1 鹽酸青藤堿口服緩控釋制劑載體材料及其優缺點差異性比較

2 注射給藥制劑

2.1 緩釋微球注射劑 注射用緩釋微球是一種誕生于20世紀末的藥物新劑型[19]，它可以通過炎癥部位直接給藥從而避免藥物的首過效應、增加藥物的穩定性，進一步提高治療效果。因此，將鹽酸青藤堿制備成微球注射劑用于類風濕關節炎關節腔注射，可直接將藥物輸送至炎癥部位，改變其在體內的分布形式，提高關節部位的藥物濃度，進而減少給藥劑量。研究證實，微球注射劑的緩釋功能是通過載體輔料實現的，這些載體輔料通常無毒、可降解并具有良好生物相容性。常用的微球制劑載體材料包括天然材料(如明膠、淀粉、白蛋白等)、半合成材料(多為纖維素衍生物)以及合成材料(如聚乳酸、聚羥基丁酸酯、聚乙交酯-丙交酯共聚物等)[20]。目前應用最廣的注射用微球骨架材料為聚乙交酯-丙交酯共聚物，其在生物體內可降解為羥基乙酸和乳酸，最終形成水和CO2排出體外[21]。鹽酸青藤堿微球注射劑與普通注射劑相比，除具有緩釋作用之外，該劑型靶向性強、組織相容性良好。關節腔注射易被腔內的巨噬細胞吞噬，延緩藥物的清除，減少因濃度過高而引起的局部刺激作用，且長期使用不會對各關節組織造成損害[22]。

2.2 多囊脂質體注射劑 相對于單室脂質體來說，多囊脂質體是一種包封率高、粒徑大以及具有良好的緩釋作用和儲庫效應的非同心脂質體，其主要用于運載親水性藥物，且藥用途徑廣泛，已成為國內外學者研究的熱點[23]。目前將多囊脂質體作為鹽酸青藤堿的載體，經局部注射給藥用于類風濕關節炎是最理想的一種新療法[24]。受類風濕關節炎病變部位的特殊性，可將鹽酸青藤堿結合新型納米載體(如微球、脂質體、納米粒、微乳等)制備成關節腔注射給藥制劑或靜脈注射給藥制劑，起到主動或被動靶向給藥，且納米新型材料多具有緩釋性能進而延長鹽酸青藤堿的作用時間。

3 經皮給藥制劑

3.1 凝膠劑 凝膠劑作為近年來迅速發展的一種新型經皮給藥制劑，其不僅載藥率高、包封率高、比表面積大易于涂展，也具有較強的穩定性以及良好的生物相容性[25]。將鹽酸青藤堿制備成凝膠劑通過關節炎癥部位直接給藥，可以減少給藥次數、提高患者的依從性。同時，借助于納米材料(如脂質體、醇質體、傳遞體、微乳及納米粒等)，可將鹽酸青藤堿制備成不同類型的新型凝膠劑。姜素芳等[26]以醇質體為納米載體將鹽酸青藤堿制備成凝膠劑，以HPLC測定鹽酸青藤堿含量，其在5～80 μg/mL范圍內線性關系良好(r=0.999 9)，平均回收率98.5%；制備的凝膠涂展性好，醇質體形態圓整，粒徑小而均勻，平均包封率為62.8%。藥效學研究表明，鹽酸青藤堿凝膠劑對大鼠佐劑型關節炎的預防和治療有明顯作用，與口服給藥制劑相比具有相同的抗炎效果；同時將研制的鹽酸青藤堿凝膠劑借助于透皮促滲技術可提高其皮膚的透過性，使其在類風濕關節炎炎癥部位大量聚集，從而發揮顯著療效。

3.2 貼劑 貼劑是目前經皮給藥制劑中最常用的劑型，其多以壓敏膠為基質，按其結構組成可分為貯庫型和骨架型。貼劑作為一種薄片狀制劑，每1片貼劑都有背襯層、藥物貯庫層、黏粘層以及臨用前需除去的保護層[27]。將鹽酸青藤堿制備成貼劑，可以通過類風濕關節炎患病區域直接定位傳遞藥物至病灶部位，從而穩定血藥濃度、改善患者的適應性和依從性。王嬰等[28]將青藤堿包封于脂質體內制成透皮貼劑并對其含量及釋放度進行測定，制備的青藤堿透皮貼劑平均回收率為98.97%，RSD為1.90%，其釋藥系統為骨架型，釋放度隨時間變化符合Higuchi動力學方程。透皮貼劑最大屏障是皮膚，其局限性在于其透皮速率，因此在制備鹽酸青藤堿透皮貼劑時不僅要利用納米材料良好的透皮性能，亦要結合現有的經皮給藥促滲技術，以期制備具有較強透皮性能的鹽酸青藤堿貼劑，使其能夠廣泛的應用于類風濕關節炎。

3.3 微乳液 微乳作為一種新型納米載體，是由水相、油相、表面活性劑及助表面活性劑以適當的比例自發形成的透明或半透明、低黏度、各向同性且熱力學穩定的油水分散體系，粒徑一般為10～100 nm，故又稱為納米乳[29]。因其具有良好的局部給藥和透皮能力，現已作為一種新型經皮給藥制劑技術，結合其具有促滲作用、緩釋作用、減少藥物的刺激性和副作用等優點[30]，可以將鹽酸青藤堿制備成微乳液，通過局部病灶給藥，使其成為治療類風濕關節炎的新劑型。微乳的制備通常采用偽三元相圖進行工藝研究，首先以偽三元相圖確定每個體系(包括表明活性劑、油相、水相)的最佳Km值，采用均勻設計法篩選鹽酸青藤堿微乳處方，考察其體外透皮能力，最終優選的鹽酸青藤堿微乳處方工藝簡單，透皮性能良好，其經皮滲透符合零級模式，平均粒徑為85 nm[31-32]。因類風濕關節炎病理特征的特殊性可將制備的鹽酸青藤堿微乳液直接涂抹于關節炎癥部位，從而避免鹽酸青藤堿的首過效應及對皮膚的刺激性。

3.4 巴布劑 巴布劑是將藥物與適宜的親水性高分子材料基質混勻后，涂布于背襯材料上制成的貼膏劑，2015年版《中國藥典》四部通則已將其名字統一為凝膠貼膏[33]。巴布劑作為近年來流行的中藥新型外用制劑，目前對鹽酸青藤堿巴布劑的研究主要集中在基質與處方的優化方面。將鹽酸青藤堿借助于新型納米材料為載體如脂質體、醇質體，使其再與水凝膠膏劑基質結合，可以制備成一種新型的鹽酸青藤堿水凝膠膏劑[34]，該制劑具有較強的緩釋性，可以提高鹽酸青藤堿在類風濕關節炎炎性關節局部的藥物濃度，增強其鎮痛、抗炎作用，降低鹽酸青藤堿血藥濃度的波動性。除以上劑型用于經皮給藥外，還有鹽酸青藤堿乳膏劑、噴霧劑等經皮給藥制劑正處于研制當中[35]。近年來，隨著新型納米材料(包括脂質體、醇脂體、微乳、傳遞體及固體脂質納米粒)不斷涌現，中藥經皮給藥制劑迅速發展。現對研制的鹽酸青藤堿經皮給藥制劑所用到的基質材料及其優缺點進行比較(表2)，以期為中藥經皮給藥新劑型的研究提供科學依據。

表2 鹽酸青藤堿經皮給藥制劑載體材料及其優缺點差異性比較

4 總結與展望

青藤堿來源于中藥青風藤，而中醫應用青風藤及其復方治療風濕類疾病已有千年歷史。明代李時珍在《本草綱目》中記載青風藤“治風濕流注，歷節鶴膝，損傷腫”[41]。類風濕關節炎作為一種病因未明的系統性自身免疫性疾病，因其致殘率高且臨床上無特效藥，倍受醫學研究者關注。本課題組前期對用于治療類風濕關節炎的鹽酸青藤堿制劑進行研究，發現其具有顯著療效，但因普通制劑生物半衰期短、生物利用度較低；臨床治療類風濕關節炎時，需要長期大劑量服用，極易引起機體皮疹、胃腸道等毒副作用，進而限制臨床廣泛使用。近年來，隨著藥物制劑新技術的不斷發展將鹽酸青藤堿通過劑型改進的方法制備出了不同的緩控釋制劑和靶向制劑，以期提高鹽酸青藤堿治療類風濕關節炎的生物利用度、生物半衰期，避免因長期大劑量服用導致的毒副作用[42]。

目前，結合傳統的藥物制劑理論與新型納米技術，將鹽酸青藤堿以納米材料為載體并結合不同的給藥途徑可制備成不同的納米靶向緩控釋制劑。然而，將鹽酸青藤堿制備成緩控釋制劑時，需對處方進行優化，而其又對設備要求高，藥用輔料一般都比較昂貴，限制了鹽酸青藤堿緩控釋制劑的工業化生產，因此需要尋找成本低廉、對設備要求低及產品收率更高的緩控釋制劑新型輔料。在經皮靶向給藥制劑的研制中因受皮膚屏障及鹽酸青藤堿理化性質的影響，限制了鹽酸青藤堿的滲透性，使其以新型納米材料為載體，再與經皮滲透技術(如透皮吸收促進劑、離子導入、電致孔、超聲促滲等)相結合，從而促使鹽酸青藤堿具有較強滲透作用，能夠起到良好的經皮治療效果[43]。現已除鹽酸青藤堿緩釋片用于類風濕關節炎外，其他新型制劑仍處于研制當中，相信隨著藥物制劑新技術的不斷發展，以及國內外藥用高分子載體材料的不斷出現，將鹽酸青藤堿研制成不同途徑給藥的新劑型，使其廣泛應用于類風濕關節炎指日可待。