喘息急性發作期兒童腸道微生態學改變及其與血漿Th1/Th2 的相關性

陳夢凡 張傳新 倪霞紅 王強

紹興市柯橋區婦幼保健院兒科，浙江紹興 312030

喘息急性發作期患兒會出現支氣管收縮和痙攣，氣道出現狹窄，呼吸氣流經過時受到阻礙，從而可出現胸悶、氣喘、呼吸困難，造成呼吸系統絮亂。當腸道菌群發生紊亂會促使炎癥反應加劇，對機體細胞造成損傷，導致人體免疫力下降，無法抵御侵入體內各種細菌和病毒。Th1 細胞參與細胞免疫和遲發性超敏反應；Th2 可介導B 細胞分化，參與體液免疫應答，Th1 細胞/Th2 細胞（Th1/Th2）的失衡代表體內炎癥反應加劇，細胞因子和炎癥介質大量釋放導致機體免疫損傷。本研究旨在探討喘息急性發作期兒童腸道微生態學改變及其與血漿Th1/Th2 的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2019 年6 月～2020 年10 月于紹興市柯橋區婦幼保健院兒科就診的兒童下呼吸道感染患兒85例做為研究對象，根據患兒的臨床癥狀分為喘息組（45 例）和非喘息組（40 例）。納入標準：①患兒均符合下呼吸道感染的診斷標準；②能夠配合診療。排除標準：①支原體肺炎；②肺部腫瘤；③心肺功能不全；④哮喘、鼻炎史。選擇同期在筆者所在醫院體檢后的35名健康兒童作為對照組。三組兒童的基線資料比較，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。見表1。本研究已取得兒童的父母知情同意，經紹興市柯橋區婦幼保健院醫學倫理委員會批準。

表1 三組基線資料比較[n（%），（）]

1.2 觀察指標

①腸道微生態：三組兒童分別提取一份2 mg 糞便樣本放入無菌玻璃瓶并編號，然后將標本種植在培養基內進行培養，觀察培養基中的菌落的生長情況，采用16SrDNA 熒光定量PCR 的方法對雙歧桿菌、大腸桿菌的數量進行檢測，并計算雙歧桿菌/大腸桿菌（B/E）的比值；②肺功能：采用HI-801 肺功能儀測定三組兒童的第1 秒最大呼氣容積（FEV）、FEV與用力肺活量比值（FEV/FVC）%、最大呼氣流量（PEF）的水平；③血漿Th1/Th2：三組兒童采用酶聯免疫吸附法（ELISA）測定血漿干擾素-γ（IFN-γ）、白細胞介素-4（IL-4）的表達水平。

1.3 統計學方法

2 結果

2.1 三組的腸道微生態指標比較

三組兒童的大腸桿菌數量組間比較，差異無統計學意義（P＞0.05）；喘息組患兒的雙歧桿菌數量、B/E 水平均明顯低于非喘息組和對照組，非喘息組患兒雙歧桿菌數量、B/E 水平均低于對照組（均P＜0.05）。見表2。

表2 三組的腸道微生態指標比較（）

2.2 三組的肺功能比較

喘息組患兒的FEV、FEV/FVC、PEF 水平均明顯低于非喘息組和對照組，非喘息組的FEV、FEV/FVC、PEF 水平均低于對照組（均P＜0.05）。見表3。

表3 三組肺功能比較（）

2.3 三組的血漿Th1/Th2 比較

喘息組患兒的血清IFN-γ、IL-4 水平均明顯高于非喘息組和對照組，IFN-γ/IL-4 明顯低于非喘息組和對照組；非喘息組的患兒血清IFN-γ、IL-4 水平均明顯高于對照組，IFN-γ/IL-4 明顯低于對照組（均P＜0.05）。見表4。

表4 三組的血漿Th1/Th2 比較（）

2.4 B/E 比值與IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4 的相關性

經Pearson 相關分析結果顯示，B/E 比值與IFNγ、IL-4 水平均呈負相關，與IFN-γ/IL-4 呈正相關（均P＜0.05）。見表5。

表5 B/E 比值與IFN-γ、IL-4、IFN-γ/IL-4 的相關性

3 討論

兒童下呼吸道系統和機體免疫功能由于身體發育所影響極易受到各種病原菌感染，常見病原體有細菌、病毒、支原體等，下呼吸系統被病原體感染后釋放炎癥因子，導致免疫系統絮亂，直接影響病情的發展。

腸道中的雙歧桿菌屬于益生菌，雙歧桿菌具有抑制腸道內腸桿菌各種細菌過量繁殖、調整腸道菌群平衡、增加有益細菌的吸收和促進胃腸道消化的作用。機體Th1、Th2 細胞數量處于動態平衡狀態，其中IFN-γ 主要由Th1 細胞和NK 細胞合成，可增強吞噬細胞介導的抗感染機制，抵抗細胞內寄生菌的感染，從而參與機體的免疫調節。IL-4 主要由T 細胞產生，能促進Th0 細胞向Th2 細胞的分化，抑制其向Th1 分化。

本研究結果顯示，喘息組患兒的血清IFN-γ、IL-4 水平均明顯高于非喘息組和對照組，B/E、IFNγ/IL-4 比值明顯低于非喘息組和對照組，分析其原因是由于喘息組患兒肺部的炎癥反應加劇及腸道微生態中的菌群相互作用和制衡的狀態被雙歧桿菌數量的降低所打破，損害機體的細胞免疫，導致T、B 淋巴細胞比例出現紊亂，造成患兒免疫功能低下，直接導致IFN-γ、IL-4 水平的升高，而IFN-γ、IL-4 的升高可加劇氣道的炎癥反應和高反應。經Pearson 相關分析結果顯示，B/E 比值與IFN-γ、IL-4 均呈負相關，與IFN-γ/IL-4 呈正相關，分析原因可能是因B/E 下降由腸道微生態系統的紊亂失衡間接影響機體免疫功能的調節作用削弱，激活巨噬細胞釋放炎性因子，IFN-γ、IL-4 均被機體炎癥反應所誘發而升高，IFNγ/IL-4 因此降低。本研究的不足之處在于未分析藥物治療前后消化系統、免疫系統、呼吸系統指標的變化，因此有待攜手其他中心進行全方位深入研究。

綜上所述，喘息急性發作期兒童腸道菌群紊亂導致B/E 值降低，血漿Th1/Th2 免疫狀態失衡，對其檢測有助于評估患兒病情的嚴重程度。