MS-222對細鱗鮭和美洲紅點鮭的麻醉效果研究

彭思博 高春山 李玲雪 杜曉燕 鄭偉 柳鵬

(吉林省水產科學研究院，吉林長春 130000)

細鱗鮭(Brachymystaxlenok)隸屬于鮭形目、鮭科、細鱗鮭屬,是名貴的陸封型冷水魚類，國家二級保護水生野生動物，其營養價值高，含脂率低，養殖效益好[1]。美洲紅點鮭(Salvelinusfontinalis)是鮭科、紅點鮭屬魚類，俗稱七彩鮭，為廣鹽性淡水三文魚，其體色鮮艷，肉質堅實，味道鮮美，生長速度快，經濟價值高，市場潛力極大，是紅點鮭屬魚類中養殖最為廣泛的品種[2-4]。這兩種魚均有著較強的應激反應，當研究人員在進行繁殖授精、標志放流、生物學研究等操作時，試驗魚會產生分泌黏液、跳躍掙扎等應激反應，影響相關操作的實施，同時魚體也會受到一定的傷害[5-6]。魚類麻醉劑能有效降低人為操作帶來的魚類應激，減少操作后研究對象的死亡率，從而被廣泛應用于科研試驗和漁業生產中[7-8]。MS-222是國內外廣泛應用于水產動物的安全可靠的麻醉藥物之一，被美國食品藥品監督管理局(FDA)批準為漁用安全麻醉劑，具有使用安全、操作便捷，麻醉和復蘇快等優點[9-10]。目前，MS-222對細鱗鮭和美洲紅點鮭的麻醉效果尚未見研究報道。本研究通過測定不同質量濃度MS-222對細鱗鮭和美洲紅點鮭的麻醉效果，檢測麻醉時魚的呼吸頻率以及空氣暴露時長對魚體復蘇的影響，探究兩種魚類的最適麻醉劑濃度，以期為今后在細鱗鮭和美洲紅點鮭人工繁殖中規范使用麻醉劑提供參考。

1 材料和方法

1.1 材料

試驗用細鱗鮭和美洲紅點鮭于2021年11月購自吉林省臨江市金鯊冷水魚養殖農民專業合作社。細鱗鮭全長(35.53±2.20)cm，體長(31.06±2.00)cm，體質量(448.71±92.38)g。美洲紅點鮭全長(34.67±2.60)cm，體長(31.92±2.30)cm，體質量(542.24±109.20)g。

間氨基苯甲酸乙酯甲磺酸鹽(MS-222)由上海易恩化學技術有限公司生產，為白色粉末，易溶于水。

1.2 麻醉試驗

經預試驗，確定麻醉劑濃度梯度。在水溫(8.5±0.7)℃條件下，MS-222麻醉劑質量濃度梯度設置為20、40、60、80、100、120、140、160 mg/L，并設對照組。每個濃度梯度設3個平行試驗組，每組試驗魚5尾。

試驗在100 L的塑料水箱中進行，試驗用水為山泉水。試驗前細鱗鮭和美洲紅點鮭停食24 h，試驗期間不投飼，不充氧，仔細觀察試驗魚的活動狀態，記錄其達到麻醉5期(深度麻醉)所需的時間。將麻醉后的試驗魚撈出放在清水中使之蘇醒，記錄其復蘇至正常游動所需的時間及復蘇率。

1.3 呼吸頻率影響試驗

呼吸頻率：將鰓蓋一張一合作為1次呼吸，統計連續10 s的呼吸次數，換算成1 min的呼吸次數，即為呼吸頻率。

統計試驗魚在正常情況下和在各麻醉劑濃度梯度下1、2、3、4、5 min時的呼吸頻率。每組3尾試驗魚，取各組呼吸頻率的平均值作為各濃度組的呼吸頻率。

1.4 空氣暴露復蘇試驗

將試驗魚放入質量濃度為160 mg/L的MS-222溶液中進行深度麻醉(達到麻醉5期)，麻醉相同時長后將魚從麻醉液中取出，用濕毛巾包裹深度麻醉的試驗魚，使其暴露在空氣中2、3、4、5 min后分別放入清水中，記錄復蘇所需的時間。試驗重復3次，每組試驗魚5尾。

1.5 數據處理

試驗所得數據使用EXCEL和SPSS 17.0軟件進行統計分析，數據以“平均值±標準差”表示，設P<0.05為統計學檢驗的顯著性水平。

2 結果

2.1 麻醉、復蘇的分期及行為特征

根據細鱗鮭和美洲紅點鮭在麻醉試驗中的實際行為表現，可將兩種魚的麻醉程度分為6期，復蘇過程分為4期。各分期及相應的行為特征見表1～表4。

表1 細鱗鮭麻醉分期及行為特征

表2 美洲紅點鮭麻醉分期及行為特征

表3 細鱗鮭復蘇分期及行為特征

表4 美洲紅點鮭復蘇分期及行為特征

2.2 不同濃度MS-222的麻醉效果

當水溫為(8.5±0.7)℃時，在不同質量濃度的麻醉劑作用下，細鱗鮭和美洲紅點鮭麻醉及復蘇過程中各階段所需的時間見表5～表6。當MS-222的質量濃度為20 mg/L時，細鱗鮭和美洲紅點鮭均只進入輕度麻醉或鎮靜狀態；當MS-222質量濃度為80、100 mg/L時，細鱗鮭進入深度麻醉所需的時間顯著少于40 mg/L和60 mg/L濃度組，并顯著多于120、140和160 mg/L濃度組(P<0.05)；當MS-222的質量濃度為100 mg/L時，其復蘇所需的時間顯著少于其余試驗組(P<0.05)。

表5 不同濃度MS-222對細鱗鮭的麻醉效果

表6 不同濃度MS-222對美洲紅點鮭的麻醉效果

當MS-222質量濃度為80 mg/L時，美洲紅點鮭麻醉所需的時間顯著少于40、60 mg/L濃度組，而顯著多于100、120、140和160 mg/L濃度組(P<0.05)；當MS-222的質量濃度為100 mg/L時，美洲紅點鮭復蘇所需的時間顯著多于40、60和80 mg/L濃度組，且顯著少于120、140和160 mg/L濃度組(P<0.05)。對比兩種魚的麻醉效果，美洲紅點鮭較細鱗鮭對MS-222更為敏感。

2.3 不同濃度MS-222對試驗魚呼吸頻率的影響

在低濃度(質量濃度20、40 mg/L)麻醉劑中，細鱗鮭和美洲紅點鮭的呼吸頻率均表現為先略微上升，隨后下降并趨于穩定；在MS-222質量濃度為90～120 mg/L時，2種試驗魚的呼吸頻率均表現為隨麻醉時間的延長而下降的趨勢；在MS-222質量濃度為140～160 mg/L時，2種試驗魚的呼吸頻率均迅速下降為0。總體而言，在MS-222的麻醉試驗中，試驗魚的呼吸頻率均隨著麻醉時間的延長而呈下降趨勢(見圖1～圖2)。

圖1 不同質量濃度MS-222對細鱗鮭呼吸頻率的影響

圖2 不同質量濃度MS-222對美洲紅點鮭呼吸頻率的影響

2.4 空氣暴露時長對復蘇的影響

由表7～表8可知，當細鱗鮭深度麻醉后，空氣暴露時長在1～2 min時，復蘇所需的時長隨暴露時長的增加而減少，且當暴露時長為2 min時細鱗魚復蘇所需的時間最少(P<0.05)。當暴露時長為3～5 min時，復蘇所需時間隨暴露時長的增加而增加；美洲紅點鮭深度麻醉后，在1～5 min內，復蘇所需時間隨暴露時長的增加而減少，且當暴露時長為5 min時，美洲紅點鮭復蘇所需的時間最少(P<0.05)。

表7 不同空氣暴露時長對細鱗鮭復蘇的影響

表8 不同空氣暴露時長對美洲紅點鮭復蘇的影響

3 討論

3.1 最適麻醉劑濃度

試驗結果表明，MS-222對細鱗鮭和美洲紅點鮭都具有較好的麻醉效果。一般來說，能讓魚在3 min內麻醉、5 min內復蘇的可視為理想的麻醉劑[11]。本研究中，當MS-222質量濃度為80～100 mg/L時，細鱗鮭能夠在3 min內進入深度麻醉狀態，并且能在5 min內100%復蘇；當MS-222質量濃度為80 mg/L時，美洲紅點鮭能夠在3 min內進入深度麻醉狀態，并且能在5 min內100%復蘇。這與黃顙魚[8]、鱖魚[5]、秦嶺細鱗鮭[12]、長薄鰍[13]等成魚的最適麻醉劑濃度不同。麻醉劑的麻醉效果與魚類的自身因素以及外部環境密切相關，根據魚的種類、生長階段以及水體環境的不同而發生相應的改變[7]。當水溫在10.5 ℃時，秦嶺細鱗鮭的最適MS-222麻醉劑質量濃度為50 mg/L，與本研究中細鱗鮭的最適麻醉濃度相比較低[12]。陳細華等[14]研究發現，同一種魚，規格越小，對MS-222的反應也越敏感。在相同的麻醉濃度下，魚的規格越大，進入深度麻醉狀態所需的時間越長。本試驗中細鱗鮭的規格為(448.71±92.38)g，較秦嶺細鱗鮭[12][(160±52)g]大，可能是其最適麻醉濃度更高的原因。在溫度和水源相同的情況下，MS-222對細鱗鮭和美洲紅點鮭的麻醉效果相似，但不完全相同，這可能與魚類品種不同有關。

3.2 MS-222對魚呼吸頻率的影響

呼吸頻率是衡量魚體麻醉程度的重要指標。魚的呼吸頻率與麻醉程度、水體環境以及魚的種類密切相關[7]。在MS-222對大鱗鲃[7]和吉富羅非魚[15]的麻醉研究中，魚的呼吸頻率在整個麻醉期間總體呈下降趨勢。但另有報道表明，赤眼鱒[16]等魚類在麻醉狀態較淺時，其呼吸頻率呈上升趨勢，而在深度麻醉時，其呼吸頻率下降。本研究中，細鱗鮭和美洲紅點鮭的呼吸頻率在淺麻醉狀態初期上升，隨后下降，而在深麻醉狀態下則快速下降，具有獨特性。

3.3 空氣暴露時長對魚體復蘇的影響

本研究顯示，進入深度麻醉的細鱗鮭，經空氣暴露1～2 min，其復蘇所需的時間隨暴露時長的增加而減少。暴露時長在3～5 min時，復蘇所需的時間隨暴露時長的增加而增加，這與布氏鯛[17]、長鰭吻魚句[18]的研究結果類似。美洲紅點鮭進入深度麻醉后，經空氣暴露1～5 min，其復蘇所需的時間隨暴露時長的增加而減少。復蘇所需時間隨暴露時長增加而減少的原因，可能是當試驗魚暴露在空氣中，其體內不再繼續富集麻醉劑，且其神經系統中的麻醉劑隨著血液循環向身體其他部位擴散，經皮膚排出，由此形成神經系統-肌肉-外部濕潤環境之間的麻醉劑排出通道，降低了神經系統的麻醉程度，魚體呼吸部分恢復，因而在暴露前期，復蘇所需的時間逐漸減少。復蘇所需的時間隨暴露時長的增加而增加的原因，可能是當試驗魚的麻醉程度降低后，由于其耗氧量增加、暴露時間過長而導致窒息或者昏迷，因而在暴露后期，復蘇所需的時間逐漸增加。本研究中，兩種試驗魚進入深度麻醉后，隨著空氣暴露時長的增加，復蘇所需的時間增減趨勢不同，可能是兩種魚對MS-222麻醉劑的敏感度不同所致。

4 結論

本研究結果表明，MS-222對細鱗鮭和美洲紅點鮭均有良好的麻醉效果，具有入麻快、復蘇快、安全邊界寬等特點，是一種較為理想的水產用麻醉劑。建議在漁業生產和科研實驗中對美洲紅點鮭和細鱗鮭使用質量濃度為80 mg/L的MS-222。