聶興玉 張鐵耀 郝 昌
垂體腺瘤是比較常見的顱內腫瘤,大多為良性,手術切除能夠取得較好的治療效果。然而,部分垂體腺瘤表現為侵襲性生長,可累及周圍組織,手術徹底切除難度非常大,術后復發風險較高。垂體腺瘤的發生機制較復雜,可能與免疫功能低下、轉錄因子、基因突變等有關。研究表明微小核糖核酸(microRNA,miRNA)與腫瘤形成密切相關。miR-26b-5p能通過沉默轉錄因子表達,調控膠質瘤細胞凋亡、侵襲。miR-26b-5p 還可靶向調節人類Jagged1 基因,抑制腫瘤細胞增殖。本文探討垂體腺瘤組織miR-26b-5p 表達變化及其與術后復發的關系,為臨床提供參考。
1.1 標本來源 收集2018 年1 月~2020 年1 月月手術切除的124例垂體腺瘤組織,其中男67例,女57例;年齡25~55 歲,平均(40.65±13.11)歲;吸煙史31 例,飲酒史28例。本研究方案獲倫理委員會批準。
1.2 納入與排除標準 納入標準:術后病理證實為垂體腺瘤;年齡≥18歲;術前無免疫治療、放/化療史;知曉研究目的與意義,簽署同意書。排除標準:有腦膜炎、腦梗死等病史;合并心臟、肝臟等重要臟器功能不全;有自身免疫疾病、血液系統疾病病史;患其他原發性腫瘤;長期使用激素、免疫抑制劑;患可影響免疫功能的疾病(例如結核病、類風濕性疾病等)。
1.3 miR-26b-5p 表達水平的檢測 利用實時逆轉錄聚合酶鏈反應法(quantitative real-time reverse tran?scription polymerase chain reaction,qRT-PCR)檢測垂體腺瘤組織miR-26b-5p相對表達水平。利用Trizol法提取總RNA,逆轉錄反應合成cDNA,然后行PCR反應,反應條件:94 ℃、10 min(預變性);94 ℃、30 s(變性),60 ℃、30 s(退火),72 ℃、30 s(延伸),循環30次。引物序列:miR-145-5p 上游引物為5′-CTA?AATGCAGAAGTGCAC- 3′ ,下 游 為 5′- TTTG?GAAAGTCAGGTGCAATT-3′;內參U6上游引物序為5′-GGAAATTCGTGTCGGTCT-3′,下游為5′-GTA?AGACACGGGTACGAAA-3′。利用2計算miR-26b-5p 的相對表達量。……