松葉的藥理作用、臨床應用及用藥規律研究進展

岳鈺茗 ,單 淇 ,楊 冰 ,王澤凡 ,周鈺通 ,付 慶 ,徐 旭*,周福軍*

1.天津中醫藥大學,天津 300193;2.釋藥技術與藥代動力學國家重點實驗室,天津 300301;3.天津市中藥質量標志物重點實驗室,天津 300301;4.天津藥物研究院,天津 300301

松葉別名豬鬃松葉、松毛、山松須及松針[1],為松科植物馬尾松(PinusmassonianaLamb.)、黑松(PinusthunbergiiParl.)、油松(PinustabulaeformisCarr.)、云南松(PinusyunnanensisFranch.)以及紅松(PinuskoraiensisSiedetZucc.)等的針狀葉。《本草綱目(金陵本)》[2]記載“松葉,又名松毛,性味苦溫,無毒”。朝(東)醫的經典醫藥典籍《東醫寶鑒》[3]記載“松為仙人之食物,能夠延年益壽”。《苗族醫藥學》[4]記載“馬尾松的葉為馬尾松,分布于黔南各地,性溫、味甜、苦,可用于止血、治療精衰弱(畢節)和栓性脈管炎(松桃)”。

本文通過查閱文獻典籍,總結分析了松葉的藥理作用及其相關作用機制,展示了松葉在臨床方藥中的應用,并通過古今醫案云平臺對松葉的用藥規律進行了探討,旨在為松葉的進一步研究提供理論基礎和科學依據。

松葉屬于祛濕藥[5-6],歸心、肝經,具有祛風燥濕、殺蟲止癢、活血安神之功效,臨床上用于治療慢性腎炎、高血壓、高脂血癥、神經衰弱以及鉤蟲病等腸道寄生蟲病;外用治療因風濕所致的關節疼痛、肢體麻木、跌打損傷、疥瘡和凍瘡;還可預防乙腦、流感等。現代研究[7-8]表明,松葉中含有豐富的化學成分,如黃酮、莽草酸、多糖、揮發油和木脂素等,具有鎮痛抗炎、降血脂、降血壓、抗氧化、抗腫瘤、抗菌及控制肥胖等藥理作用。因松葉中含有豐富的營養物質,如蛋白質、纖維素、礦物質及維生素等,常被用作牲畜的飼料和保健食品[9]。

1 藥理作用

1.1 鎮痛抗炎

炎癥是機體對各種致炎因素的局部損傷作出反應的主要病理性自衛機制之一。導致炎癥的炎癥介質[10]主要有白細胞介素-1β(IL-1β)、白細胞介素-6(IL-6)、一氧化氮(NO)和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)等。KWON J H 等[11]通過四唑鹽(MTT)細胞實驗發現,松葉中的提取物槲皮素3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷和5,7,8,4′-四羥基-3-甲氧基-6-甲基黃酮8-O-β-D-吡喃葡萄糖苷能有效抑制脂多糖(LPS)誘導RAW 264.7巨噬細胞釋放NO(抑制NO 50%生成的質量濃度為26.8、27.1 μg·mL-1)和前列腺素E2(PGE2)(抑制PGE250%生成的質量濃度為56.2、24.8 μg·mL-1)。CHIU H F 等[12]研究發現,發酵松針乙酸乙酯提取物(EAE-FPN)能夠顯著提高LPS誘導的RAW 264.7巨噬細胞的抗氧化活性和自由基清除活性,此外,呈劑量依賴性地抑制活性氧(ROS)、NO、PGE2、TNF-α、IL-1β、IL-6以及誘導型一氧化氮合酶(iNOS)、環氧合酶2(COX-2)和核因子-κB(NF-κB)(阻斷活化p65 從細胞質進入細胞核)蛋白的表達水平。松葉能通過調節NF-κB信號通路,發揮抗氧化和抗炎作用。RABELO T K 等[13]研究發現,莽草酸(松葉中含量較高的化學成分[14])能通過降低脂多糖(LPS)刺激的巨噬細胞內TNF-α和PGE2的表達水平,進而減輕炎癥反應的強度。林潔等[15]采用扭體實驗和溫浴實驗,研究莽草酸對小鼠的抗炎鎮痛作用,結果發現,莽草酸組的鎮痛作用顯著高于生理鹽水組(P＜0.05),而與阿莫西林組比較差異無統計學意義(P＞0.05),表明莽草酸可以提高小鼠的疼痛閾值,延長小鼠的痛閾潛伏期,從而發揮鎮痛作用。但是目前對松葉的具體鎮痛機制尚未明確。

1.2 降血脂、降血壓

黃靜等[16]將高脂模型的清潔級近交系雄性Wistar大鼠隨機分為3組,分別灌胃高脂飲食、高脂飲食+松針提取物100 mg·kg-1·d-1、高脂飲食+松針提取物300 mg·kg-1·d-1,共8周,檢測血清總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)以及低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)水平。結果顯示,含松針提取物的高脂飲食組中大鼠體內TC、TG及LDL-C的含量顯著低于高脂飲食組,而HDL-C 顯著高于高脂飲食組。表明松針能夠有效調節高血脂大鼠的血脂代謝,加強血脂在血管中的流動性,進而防止其在內壁沉積,穩定血壓,發揮降血脂的作用。洪靜純[17]將200例單純性高脂血癥患者分為2組,對照組服用阿托伐他汀鈣片,觀察組服用質量濃度為5 g·mL-1的鮮松針液,分別在治療后4、8、12周檢測TC、TG、HDL-C和LDL-C水平,結果表明,以上各水平均顯著優于治療前(P＜0.05)。但是松葉降血脂的具體作用機制并未明確。

研究表明,松葉提取物的主要成分是原花青素(以不同數量的兒茶素和表兒茶素為單元縮合而成的多酚類聚合物[18]),它通過刺激一氧化氮-環鳥苷酸(cGMP)信號釋放,減少細胞內游離的鈣離子(Ca2+)濃度,增加血管彈性,降低總外周阻力,從而發揮降低血壓的功效[19]。楊澤填等[20]取10只SPF級SD 大鼠作為假手術組(9 g·L-1NaCl溶液),建立腎性高血壓模型的50只SPF級SD 大鼠隨機分為模型組(9 g·L-1NaCl溶液)、陽性藥組(1 kg·L-1的卡托普利懸濁液)以及松針提取液高、中、低劑量組(50、30、20 kg·L-1),連續灌胃4周后采用雙抗體夾心酶聯免疫吸附(ABC-ELISA)法檢測NO 和血管內皮素(ET)水平,并監測大鼠舒張壓(DBP)和收縮壓(SBP),結果發現,松針各提取液給藥組大鼠體內的DBP(P＜0.05)、SBP(P＞0.05)和ET(P＜0.05)的含量均低于模型組,而NO 的含量高于模型組(P＞0.05)。松針各提取液給藥組DBP、SBP、ET 和NO 與陽性藥組比較差異均無統計學意義(P＞0.05)。結果表明,松葉具有降血壓的作用,并推測其發揮作用的機制可能是通過調節ET 和NO 間的平衡狀態,減少回心血量發揮作用。研究[21]表明,松葉制劑松齡血脈康膠囊(松葉為君藥[22])也可以降低高血脂、高血壓。趙英強等[23]采用24只SHR 大鼠,隨機分為3組(空白組、松齡血脈康膠囊組和雷米普利組),灌胃給藥(空白組:等體積生理鹽水;松齡血脈康膠囊組:20 mg·kg-1松齡血脈康;雷米普利組:1 mg·kg-1雷米普利)4周后,測定大鼠肝臟中的過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ,參與血壓的調節)、血管緊張素Ⅱ1型受體(AT1R)的mRNA 表達量和蛋白含量,結果發現,松齡血脈康膠囊能夠通過增加PPARγ信號因子上調其mRNA 的表達,下調AT1R mRNA 的表達,從而增加合成的PPARγ蛋白質量和減少所合成的AT1R 蛋白質量,增強血管的彈性能力,發揮降血壓的作用。另有研究[24]表明,腎素-血管緊張素-醛固酮系統 (RAAS) 在調節血壓中也發揮著重要作用,李杰等[25]在對肝陽上亢型高血壓的大鼠實驗研究中證實了松齡血脈康膠囊能有效干預RAAS 的關鍵環節,可以對血壓進行有效的調控。

1.3 抗氧化

細胞中的電子被奪會對人體造成損傷,因自由基含有游離的電子,所以狀態極不穩定,進入人體后,會從相鄰近的細胞分子(包括脂肪、蛋白質和DNA)中奪取電子而穩定自身,致使人體的細胞結構和功能發生改變。人體內常見的自由基均為氧氣在參與人體能量代謝時所產生的,有超氧陰離子、羥基自由基及烷氧自由基等,統稱為活性氧(ROS)[26-27]。凡是能夠抑制或阻止自由基奪走人體正常細胞中電子的物質均為抗氧化物,其可以直接對自由基產生作用,也可以通過間接反應來消耗易產生自由基的物質,降低其奪電子的能力。人體在產生自由基的同時也產生著可以消除自由基的物質,這些物質可降低自由基對人體細胞的破壞能力,維持機體的健康生長。多項研究[28-30]表明,松針中的黃酮類化合物因其強還原性而具有抗氧化能力。付文鵬等[29]通過硫代巴比妥酸法觀察不同濃度云南松松針的黃酮溶液對SD 昆明大鼠的肝勻漿MDA(脂質過氧化終產物)的抑制效果,得出其質量濃度在0.1～5.0 mg·mL-1范圍時,對MDA 的抑制率為66.36%～74.33%,呈良好的量效關系。此外,張霞[31]研究發現,松針中黃酮類化合物的抗氧化作用機制為通過刺激抗氧化酶,有效抑制自由基的生成,從而降低脂質過氧化。閆琳娜[32]通過酶解修飾實驗發現,經過β-葡萄糖苷酶的酶解修飾可以增加松葉中黃酮的抗氧化能力。

1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)是一種穩定的自由基,當它接受抗氧化劑分子的電子時會由紫色變為黃色或無色。亞硝酸鹽自由基能與人體內的胺結合為亞硝胺,對人體產生危害,而亞硝酸鹽清除物質如抗壞血酸、α-生育酚、硫氧化物、美拉德反應物和多酚可以抑制亞硝胺的產生。PARK J S等[33]采用DPPH 自由基清除法和亞硝酸鹽清除法對松葉揮發油抗氧化活性進行了評價,結果表明,抗氧化活性可歸因于松葉中的單萜烯碳氫化合物、含氧單萜烯或倍半萜的存在,如α-蒎烯、β-蒎烯等。李曉嬌等[34]采用DPPH 法考察云南松針精油的抗氧化活性,結果發現,松針精油質量濃度在3.19～102.20 mg·mL-1范圍時,DPPH 的清除率隨質量濃度的增加而增大,呈良好的量效關系,且其半數抑制率(IC50)值為47.294 mg·mL-1。KOUTSAVITI A 等[35]在評估松針精油中酚類化合物的作用時,結果顯示,兒茶素具有顯著的抗氧化活性。另有研究表明[36],松針和嫩枝精油的抗氧化作用是由揮發油中的α-蒎烯和月桂烯引起的。綜上所述,可認為松葉的抗氧化活性可能是由于其單萜和倍半萜的存在,可有效地清除自由基,可以被用作天然的抗氧化劑。

1.4 抗腫瘤

研究表明,松針黃酮類成分可以用來體外抗腫瘤,SHI X等[37]通過MTT 法實驗證明了松針黃酮類提取物質量濃度在5～100 μg·mL-1的范圍內呈劑量依賴性地抑制肝癌HepG2細胞的增殖,總黃酮在G0/G1期阻滯HepG2細胞增殖,促進HepG2細胞凋亡。雷艷萍[38]通過CCK8法顯示松針總木脂素對人肺癌細胞株A549(IC50:39.82±1.74 μg·mL-1)、人宮頸癌HeLa細胞株(IC50:62.01±1.37 μg·mL-1)、人肝癌細胞株HepG2(IC50:67.67±2.64 μg·mL-1)、人結腸 癌細胞HT-29(IC50:99.17±1.67 μg·mL-1)及人胃癌細胞株MKN-45(IC50:115.84±2.08 μg·mL-1)5種腫瘤細胞的增殖均有明顯的抑制作用,且抑制作用隨劑量的加大而增強,呈明顯的正相關關系。董朱等[39]通過查閱資料,認為松葉抗腫瘤的機制主要為:(1)抑制腫瘤細胞的增殖,誘導腫瘤細胞的凋亡以及對細胞產生選擇性的毒性和不良反應;(2)抑制脂質過氧化保護DNA,抑制相關酶的表達防止細胞突變,增強自身免疫功能提高機體耐受力。

1.5 其他

PARK J S等[33]采用紙片瓊脂擴散法和肉湯微量稀釋法研究紅松和黑松松葉的揮發油對8株革蘭氏陰性菌和5株革蘭氏陽性菌的抑制效果,結果表明,2種松葉揮發油均具有抑菌作用,尤其是對肺炎桿菌、普通變形桿菌和福氏志賀氏菌的抑制作用尤為顯著。其主要因為α-蒎烯是揮發油的主要成分(23.73%),具有很強的抗菌活性,通過破壞細菌的完整性對微生物產生毒性作用。KIM E A 等[40]研究發現,松葉提取物可以明顯降低肥胖型小鼠的體質量和脂肪量且不影響小鼠正常進食,主要是松葉提取物中的多酚類物質原花青素作用于下丘腦前阿黑皮素(POMC)神經元,參與脂肪組織代謝的調節,抑制脂肪生成,從而具有控制肥胖的作用。

2 臨床應用

根據中醫藥整體觀和辨證論治的治療思路,松葉常以復方的形式入藥,因而現代醫者常通過辨證將其配伍成方藥應用于鎮痛、抗炎、降血脂、降血壓、祛風濕、治療失眠以及治療血小板減少性紫癜,用以增強松葉的藥效,降低其不良反應。

2.1 鎮痛作用

(1)松針正腦丸[41]:由松毛(鮮品)、紅參、螞蟻、萬年蒿、地龍、大黃與雞血藤制成;具有清熱益氣、活血止痛之效;臨床上用于治療氣血血瘀、熱毒內盛所致的頭痛以及緊張性頭痛、偏頭痛、血管神經性頭痛、老年癡呆、腦萎縮和腦退化等。

(2)將1.5 kg松葉切細,用適量水煎煮,取3.8 L釀2.8 kg米;另外煮松葉汁以漬米并饋飯,泥釀封頭,七日發。澄飲之,用于治療腳弱十二風、痹不能行[42]。

(3)取馬尾松葉30 g,加適量水煎煮,過濾去渣,加冰糖30 g調服,可有效治療腰痛[43]。

(4)松葉浸酒服用,其渣加蛤仔1只,捶爛敷于患處,用于治療跌打腫痛[44]。

(5)桂附膏[45]:鮮側柏葉5 kg,鮮松毛1.5 kg,生天雄0.5 kg,麻油3 kg,炒黃丹1.8 kg,肉桂0.5 kg。用于治療臀脊腰腹因寒痰、淤血阻滯所導致的疼痛。

2.2 抗炎作用

(1)取適量的鮮馬尾松葉,剪去兩頭,搗爛取汁,每次用溫開水送服50 g,用于治療慢性腎炎[46]。

(2)松葉2.5 kg,甘草60 g,加水50 L 煎煮濃縮至40 L,可用于預防流腦。

(3)松葉、扁柏各90 g(鮮用250 g),洗凈,切碎,加適量水煮沸1 h,過濾,共2次;將2次濾液合并濃縮至200 mL,加糖漿100 mL或蜂蜜60 g,共成300 mL(1 mL含生藥1.5 g)。每日服用3次,每次100 mL,10 d為1個療程,可有效治療慢性氣管炎[47]。

(4)復方松葉提取液[48],商品名為“祛風濕靈”,主要成分為馬尾松葉的提取物,治療炎癥所引起的水腫及纖維結締組織的形成。

2.3 降血脂、降血壓

(1)松針液:采用生物納米膜分離技術制備而成的松針提取濃縮液軟膠囊,用于降血壓、降血脂和降血糖;抗癌;抗衰老;治療關節炎等。

(2)松齡血脈康膠囊[49]:由鮮松葉、葛根、珍珠層粉制成的軟膠囊制劑,具有養血息風、活血化瘀、平肝潛陽及鎮靜安神之功效。(3)松針露:用松針葉蒸餾而成,具有雙項調節血壓的作用,可軟化血管,治療糖尿病,降低高血脂。

2.4 祛風濕

(1)松葉4.5 kg,酒70 kg,浸泡三七日,服180 g,用于治療歷節風[42]。

(2)松葉500 g,搗爛,取汁液,用清酒2 L 浸泡二宿,近火一宿,初服100 mL,漸至400 mL,頭面汗出即止,對中風面目相引口偏僻、牙車急、舌不可轉[42]有良好的效果。

(3)松葉(炒黑)30 g,輕粉、樟腦各9 g。濕則干摻,燥則用油調搽,如癢極者,以米醋調敷,治療風濕頑癬[50],還可以治療凍瘡。

2.5 治療失眠

(1)鮮松葉50～100 g,水煎服,治失眠、維生素丙缺乏、營養性水腫[47]等。

(2)腦寧糖漿[51]:由鮮松針、大棗、靈芝制成。具有補益氣血、養心安神之效,治療由心神不寧所造成的失眠,焦慮等。

2.6 治療血小板減少性紫癜

健脾涼血止血湯[52]:黨參6 g,白術6 g,骨碎補6 g,茯苓5 g,炙甘草5 g,法半夏3 g,廣陳皮3 g,松針10 g,北黃芪10 g,黃精10 g,枸杞6 g,桂圓肉10 g,雞內金3 g,仙鶴草6 g,鹿角霜8 g,水牛角30 g(先煎),白芍8 g,藕節5個。

2.7 治療脫發

(1)復方松針育發液[53]:以松針、茶葉清熱解表,為君藥;以人參、紅景天與靈芝溫補氣血,滋養肝腎,為臣藥;花椒、生姜活血化淤、疏通經絡,為佐藥;肉桂溫補回陽,為使藥。

(2)禤氏生發湯[54]:生地黃20 g,松針15 g,側柏葉15 g,蒲公英20 g,丹參(后下)20 g,赤芍15 g,甘草5 g。

2.8 殺蟲

松針精油[55]:將浸提后的松針加入蒸餾釜內進行水蒸汽蒸餾,蒸汽經過冷凝、油水分離。

3 用藥規律分析

為了解松葉在配伍方藥中的用藥規律,通過古今醫案云平臺建立了經驗方藥數據庫,通過對數據庫中23個醫案進行統計分析,得出與松葉聯用的中藥有132個,其中甘草主要用于調和諸藥,不計算在內,頻數≥4的聯用中藥共有17個,其中聯用白芍頻數為8次,茯苓、白術和地黃為6次,茯神為5次,旱蓮草、女貞子、當歸、桂枝、牡蠣、半夏、桑葉、丹參、菟絲子、薏苡仁、大棗和黃芪均為4 次。頻數≥6 的聯用中藥所處醫案的具體主治及松葉在其中的作用見表1。由表1可知,松葉常用來與其他藥配伍治療各種類型的脫發,其主要通過“以形補形”,輕身益氣,安五臟,生毛發,兼以清熱燥濕、補虛固本。現代藥理研究表明,松葉含大量低聚原花青素,其具有清除自由基活性、免疫調節等功效,還可促進毛發上皮細胞生長,誘導休止期毛發再生;松葉祛濕、殺蟲止癢,用于治療癢癥;松葉活血散瘀、止血消斑,用于治療血小板減少性紫癜。

表1 聯用中藥、處方主治及松葉作用Tab.1 Combined use of traditional Chinese medicine,prescription and indications,and the effect of pine leaf

4 小結

松葉作為民間常用藥之一,資源豐富,在全年任意時間均可采收,以臘月采收的松葉為最佳。為了對松葉藥材的進一步開發利用,本文對松葉的現代藥理和臨床應用進行了總結和歸納,研究表明,松葉具有鎮痛抗炎、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂以及抗腫瘤等諸多功效,臨床上被開發成多種制劑類型,包括膠囊劑(松齡血脈康膠囊)、丸劑(松針正腦丸)以及湯劑等,廣泛用于鎮痛、抗炎、降血脂、降血壓、祛風濕、殺蟲以及治療失眠、血小板減少性紫癜和脫發等疾病。此外,本文還通過對古今醫案云平臺中的臨床用藥進行分析,為松葉在傳統中醫理論下的用藥規律提供了一定的客觀數據,為充分合理地開發利用松葉提供了科學依據。