華中五味子藤莖中苯丙素類化學(xué)成分研究

楊潔，孫琛，郭東艷，劉銀環(huán)（. 陜西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院，陜西省中藥基礎(chǔ)與新藥研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，陜西 咸陽 72046；2. 咸陽市中心醫(yī)院藥劑科，陜西 咸陽 72000）

華中五味子（Schisandra sphenanthera）為五味子科（Schisandraceae）五味子屬（Schisandra）多年生落葉木質(zhì)藤本[1]，又稱“南五味子”。文獻(xiàn)報道其主要化學(xué)成分為苯丙素、三萜和黃酮等[2-4]，具有保肝、抗炎和抗腫瘤等多種藥理作用[5-7]。目前關(guān)于華中五味子的化學(xué)成分研究多集中于果實(shí)和根皮，而關(guān)于其藤莖的化學(xué)成分研究鮮有報道[3-5]，為進(jìn)一步明確華中五味子藤莖的化學(xué)成分，本文對其80%乙醇提取物進(jìn)行了系統(tǒng)分離純化，從中共鑒定了9 個簡單的苯丙素類化合物（結(jié)構(gòu)見圖1），分別為肉桂酸（1），3，4，5-三甲氧基肉桂酸（2），erythro-7-methoxyguaiacylglycerol（3），3-（4-hydroxy-3-methoxy-phenyl）propan-1，2-diol（4），3-羥基-1-（3-甲氧基-4-羥基-苯基）-丙基-1-酮（5），對羥基苯丙醇（6），3-甲氧基-4-羥基苯丙醇（7），1-（3-methoxy-4-hydroxy-phenyl）-propan-1，2-diol（8），C-veratroylglycol（9），其中，化合物1 ～6 為首次從該植物中分離鑒定。

圖1 化合物1 ～9 的化學(xué)結(jié)構(gòu)圖Fig 1 Chemical structures of compounds 1 ～9

1 材料

Bruker-AVANCE400 型核磁共振儀（布魯克公司，400 MHz）；HH-4 型數(shù)顯恒溫水浴鍋（江蘇省金壇市環(huán)宇科學(xué)儀器廠）；BT125D 型賽多利斯電子分析天平（上海皖衡電子儀器有限公司，精密度0.01 mg）；Sephadex LH-20 葡聚糖凝膠（Pharmacia 公司）；GF254薄層色譜硅膠、柱色譜用硅膠（青島海洋化工廠）；色譜甲醇和色譜乙腈（科密歐化學(xué)試劑有限公司）；甲醇、二氯甲烷、石油醚、乙酸乙酯等均為分析純（天津市天力化學(xué)試劑有限公司），水為實(shí)驗(yàn)室自制超純水。

華中五味子的藤莖于2019年8月購于陜西省眉縣天源中草藥開發(fā)有限公司，經(jīng)陜西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院楊潔實(shí)驗(yàn)師鑒定為五味子科Schisandraceae 五味子屬Schisandra華中五味子Schisandra sphenantheraRehd. et Wils 的藤莖，標(biāo)本（No. SS2019-2）保存于陜西中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院中藥標(biāo)本館。

2 提取分離

稱取干燥的華中五味子藤莖8.6 kg，粉碎后經(jīng)80%的乙醇回流提取3 次，每次2 h。減壓回收乙醇至浸膏，分散于水中，分別用石油醚和乙酸乙酯萃取3 次，得石油醚部位103.4 g，乙酸乙酯部位269.1 g。取乙酸乙酯部位260 g，經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇100∶0、80∶1、60∶1、40∶1、20∶1、10∶1、5∶1、3∶1 和1∶1梯度洗脫，TLC 檢測，合并相同流分，得到組分F1 ～F10。F3（14.2 g）經(jīng)葡聚糖凝膠柱色譜，二氯甲烷∶甲醇＝1∶1 洗脫，得到化合物1（30.4 mg）。F4（10.3 g）經(jīng)葡聚糖凝膠柱色譜，二氯甲烷∶甲醇＝1∶1 洗脫，TLC 檢測，合并相同流分，得到F4-1 ～F4-4；F4-2 經(jīng)葡聚糖凝膠柱色譜，二氯甲烷∶甲醇＝1∶1 洗脫，得到化合物2（8.0 mg）；F4-3（0.6 g）經(jīng)半制備HPLC，乙腈∶水＝38∶62 洗脫，流速2 mL·min-1，得到化合物6（12.6 mg，tR＝22.2 min）和化合物7（17.1 mg，tR＝25.7 min）。F5（22.5 g）經(jīng)硅膠柱色譜，以二氯甲烷-甲醇100∶0 ～5∶1 梯度洗脫，TLC檢測，合并相同流分，得到F5-1 ～F5-8；F5-2（0.9 g）經(jīng)半制備液相色譜，乙腈∶水＝30∶70洗脫，流速2 mL·min-1，得到化合物4（12.4 mg，tR＝28.5 min）和化合物5（8.3 mg，tR＝19.9 min）；F5-3（0.4 g）經(jīng)半制備液相色譜，甲醇∶水＝35∶65 洗脫，流速1.5 mL·min-1得到化合物8（16.9 mg，tR＝30.5 min）；F5-5（0.8 g）經(jīng)半制備液相色譜，乙腈∶水＝25∶75 洗脫，流速2 mL·min-1，得到化合物3（6.9 mg，tR＝41.1 min）和化合物9（13.7 mg，tR＝30.7 min）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物1：白色粉末（甲醇），ESI-MSm/z149 [M + H]+。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δH：7.61 ～7.34（5H，overlap，H-Ar），6.48（1H，d，J＝15.9 Hz，H-α），7.67（1H，d，J＝15.9 Hz，H-β）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δC：170.4（-COOH），146.1（C-1），129.0（C-2，C-6），129.8（C-3，C-5），135.8（C-4），119.5（C-α），131.1（C-β）。化合物1 鑒定為肉桂酸[8]。

化合物2：白色粉末（甲醇），ESI-MSm/z237 [M - H]-。1H-NMR（CD3OD，400 MHz）δH：6.90（2H，s，H-2，6），7.58（1H，d，J＝15.8 Hz，H-7），6.37（1H，d，J＝15.8 Hz，H-8），3.87（6H，s，3，5-OCH3），3.78（3H，s，4-OCH3）；13C-NMR（CD3OD，100 MHz）δC：126.4（C-1），107.0（C-2，6），149.8（C-3，5），140.1（C-4），147.2（C-7），115.7（C-8），169.9（C-9），52.1（3，5-OCH3），57.1（4-OCH3）。化合物2 鑒定為3，4，5-三甲氧基肉桂酸[9]。

化合物3：白色粉末（甲醇），ESI-MSm/z229 [M + H]+。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δH：6.80（1H，d，J＝7.9 Hz，H-2），6.74（1H，dd，J＝7.9，1.8 Hz，H-5），6.90（1H，d，J＝1.8 Hz，H-6），4.07（1H，d，J＝6.7 Hz，H-7），3.65（1H，dd，J＝6.7，3.8 Hz，H-8），3.40（1H，dd，J＝11.3，3.8 Hz，H-9a），3.32（1H，m，H-9b），3.86（3H，s，3-OCH3），3.20（3H，s，7-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：131.4（C-1），111.7（C-2），149.0（C-3），147.4（C-4），116.1（C-5），121.5（C-6），77.0（C-7），85.5（C-8），63.8（C-9），56.7（3-OCH3），56.2（7-OCH3）。 化合物3 鑒定為erythro-7-methoxyguaiacylglycerol[10]。

化合物4：白色粉末（甲醇），ESI-MSm/z199 [M + H]+。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：6.80（1H，d，J＝1.8 Hz，H-2），6.71（1H，d，J＝8.0 Hz，H-5），6.64（1H，dd，J＝8.0，1.8 Hz，H-6），2.72（1H，dd，J＝13.8，5.8 Hz，H-7a），2.56（1H，dd，J＝13.8，7.4 Hz，H-7b），3.75（1H，m，H-8），3.47（1H，dd，J＝11.1，4.5 Hz，H-9a），3.42（1H，dd，J＝11.1，6.3 Hz，H-9b），3.82（3H，s，3-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：131.2（C-1），114.0（C-2），148.7（C-3），146.2（C-4），116.0（C-5），122.6（C-6），40.4（C-7），74.6（C-8），66.4（C-9），56.2（3-OCH3）。 化合物4 鑒定為3-（4-hydroxy-3-methoxy-phenyl）propan-1，2-diol[11]。

化合物5：白色粉末（甲醇），ESI-MSm/z195 [M - H]-。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δH：3.80（1H，t，J＝6.2 Hz，H-2a），3.04（1H，t，J＝6.2 Hz，H-2b），3.72（2H，t，J＝6.2 Hz，H-3），7.43（1H，d，J＝1.8 Hz，H-2'），6.85（1H，d，J＝8.0 Hz，H-5'），7.50（1H，dd，J＝8.0，1.8 Hz，H-6'），3.81（3H，s，OCH3）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δC：197.2（C-1），40.8（C-2），57.1（C-3），128.8（C-1'），110.9（C-2'），147.4（C-3'），151.4（C-4'），114.8（C-5'），123.0（C-6'），55.5（3'-OCH3）。化合物5 為3-羥基-1-（3-甲氧基-4-羥基-苯基）-丙基-1-酮[12]。

化合物6：白色粉末（甲醇），ESI-MSm/z151 [M - H]-。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δH：6.93（2H，d，J＝8.2 Hz，H-2，6），6.63（2H，d，J＝8.2 Hz，H-3，5），2.46（2H，t，J＝6.5 Hz，H-7），1.64（2H，m，H-8），3.38（2H，t，J＝6.5 Hz，H-9）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δC：132.1（C-1），129.0（C-2，6），115.1（C-3，5），155.1（C-4），30.7（C-7），34.6（C-8），60.0（C-9）。化合物6 為對羥基苯丙醇[13]。

化合物7：白色粉末（甲醇），ESI-MSm/z183 [M+H]+。1H-NMR（DMSO-d6，400 MHz）δH：6.73（1H，d，J＝1.9 Hz，H-2），6.66（1H，d，J＝7.8 Hz，H-5），6.58（1H，dd，J＝7.8，1.9 Hz，H-6），2.51（2H，t，J＝7.1 Hz，H-7），1.66（2H，m，H-8），3.40（2H，t，J＝6.6 Hz，H-9），3.75（3H，s，3-OCH3）；13C-NMR（DMSO-d6，100 MHz）δC：133.0（C-1），112.5（C-2），147.4（C-3），144.4（C-4），115.3（C-5），120.3（C-6），31.3（C-7），34.7（C-8），60.2（C-9），55.5（3-OCH3）。化合物7 為3-甲氧基-4-羥基苯丙醇[14]。

化合物8：白色粉末（甲醇），ESI-MSm/z199 [M + H]+。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：4.22（1H，d，J＝7.1 Hz，H-1），3.80（1H，m，H-2），0.94（3H，d，J＝6.4 Hz，H-3），6.73 ～6.76（2H，overlap，H-2'，H-6'），6.93（1H，d，J＝1.8 Hz，H-5'），3.82（3H，s，3'-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：72.9（C-1），80.2（C-2），19.2（C-3），134.7（C-1'），111.5（C-2'），148.8（C-3'），147.1（C-4'），115.6（C-5'），121.1（C-6'），56.3（3'-OCH3）。化合物8 鑒定為1-（3-methoxy-4-hydroxy-phenyl）-propan-1，2-diol[15]。

化合物9：白色粉末（甲醇），ESI-MSm/z213 [M + H]+。1H-NMR（400 MHz，CD3OD）δ：5.10（1H，dd，J＝5.4，3.6 Hz，H-2），3.74（1H，dd，J＝11.7，5.4 Hz，H-3a），3.86（1H，d，J＝3.6 Hz，H-3b），7.55（1H，d，J＝1.7 Hz，H-2'），6.87（1H，d，J＝8.1 Hz，H-5'），7.57（1H，dd，J＝8.1，1.7 Hz，H-6'），3.90（3H，s，3'-OCH3）；13C-NMR（100 MHz，CD3OD）δ：199.4（C-1），75.4（C-2），66.1（C-3），128.0（C-1'），112.3（C-2'），149.1（C-3'），153.7（C-4'），115.7（C-5'），125.0（C-6'），56.4（3'-OCH3）。化合物9 鑒定為C-veratroylglycol[16]。

4 討論

本試驗(yàn)從華中五味子的藤莖中共分離鑒定了9 個簡單的苯丙素類化合物，其中，化合物1 ～6為首次從該植物中分離鑒定。目前關(guān)于華中五味子藤莖的化學(xué)成分和藥理活性研究較少，僅有零散的文獻(xiàn)報道，本研究進(jìn)一步豐富了華中五味子藤莖的化學(xué)成分，為其藥理活性研究的開展提供了物質(zhì)基礎(chǔ)。