球孢白僵菌對雞皮刺螨體外殺滅效果試驗

林 琳 吳勝會 江 斌 張世忠 福建省農業科學院畜牧獸醫研究所 福州 350013

雞皮刺螨是雞場（尤其是規模化蛋雞場）的重要體外寄生蟲，在飼養條件簡陋的陳舊雞舍更為常見，是引起蛋雞場減蛋和雞只衰竭死亡的主要原因。 目前雞場多采用體外殺蟲劑（如溴氫菊脂、雙甲脒、敵百蟲等） 進行定期噴殺或采用伊維菌素拌料飼喂來防控雞皮刺螨病[1]。 由于體外殺蟲劑耐藥性及藥物在禽肉產品或雞蛋內殘留問題， 化學殺螨劑的使用越來越受到限制， 探索采用生物方法來防控雞場體外寄生蟲病是未來必由之路。 球孢白僵菌是廣泛應用于農林害蟲的一種高效、環保生物殺蟲劑，國內外研究證實球孢白僵菌對柑橘木虱、 綿羊癢螨等昆蟲有較好的殺蟲效果[2-7]，對雞皮刺螨也有一定的驅殺效果，且對雞、羊等畜禽無任何毒副反應。 為評價球孢白僵菌對雞皮刺螨的殺滅效果， 設計不同濃度的球孢白僵菌懸浮液對雞皮刺螨進行體外殺滅效果評價，以期篩選出理想濃度的懸浮液應用于生產。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 球孢白僵菌 由廣西農保生物工程有限公司提供，每克孢子粉含孢子1×1010個。

1.1.2 雞皮刺螨 采集于福州市郊區某蛋雞場，成蟲數量約1 500 只。 每批5 組，每組100 只，重復3 次試驗。

1.1.3 其他材料 培養皿、濾紙、透明塑料袋、細毛筆、一次性注射器等。

1.2 方法

1.2.1 試驗時間與條件 2021 年5~6 月，室溫20~28 ℃。

1.2.2 球孢白僵菌孢子懸液配制 A 組： 取1 g 球孢白僵菌+10 mL 生理鹽水混勻， 即1 mL 含1×109個孢子；B 組： 取A 組懸浮液1 mL+9 mL 生理鹽水混勻，即1 mL 含1×108個孢子；C 組：取B 組懸浮液1 mL+9 mL 生理鹽水混勻， 即1 mL 含1×107個孢子；D 組：取C 組懸浮液1 mL+9 mL 生理鹽水混勻，即1 mL 含1×106個孢子。

1.2.3 試驗方法 取5 個潔凈的培養皿， 分別放入100 只皮刺螨成蟲，分別取A、B、C、D 組不同濃度菌液2 mL 采用一次性注射器均勻噴灑在100 只蟲體上，對照組噴灑生理鹽水2 mL，蓋上皿蓋，外套一個透明的塑料袋（防止蟲體逃逸），扎緊袋口，在室內試驗臺靜置觀察15 d。 每天早上8:00 松開袋口，觀察各組蟲體活動情況（用毛筆尖拔動蟲體，若蟲體不動則判定為死亡），并清點死亡蟲體數量，觀察后再扎緊袋口。統計5 d 內、10 d 內、15 d 內死亡蟲體數量。重復3 次試驗。

1.2.4 統計方法 用DPS 對不同濃度白僵菌導致每天雞皮刺螨累計死亡數量做線形回歸分析， 建立直線回歸模型， 計算LT50。 試驗數據采用SPSS22.0進行統計和顯著性分析， 數據均用三次試驗平均值±標準差表示[2]。

2 結 果

2.1 不同組螨蟲死亡情況 經過15 d 試驗觀察，A組在5 d 內、10 d 內及15 d 內死亡蟲體數量分別為27.667±5.503 只、94.333±2.082 只、100 只；B 組 在5 d 內、10 d 內及15 d 內死亡蟲體數量分別為26.333±3.786 只、95.000±1.000 只、100 只；C 組 在5 d 內、10 d 內及15 d 內死亡蟲體數量分別為11.333±0.577 只、43.667±0.577 只、95.000±1.528 只；D 組在5 d 內、10 d 內及15 d 內死亡蟲體數量分別為10.677±1.000 只、42.667±1.508 只、85.333± 3.512只； 對照組在組在5 d 內、10 d 內及15 d 內死亡蟲體數量分別為4.333±0.577 只、20.667± 2.080 只、50.000±9.539 只（見表1、圖1）。

圖1 不同濃度白僵菌對雞皮刺螨的殺滅效果曲線圖

表1、 圖1 可以看出，4 個試驗組與對照組之間差異都極顯著（P<0.01），A 組與B 組之間差異不顯著（P>0.05），C 組與D 組之間差異不顯著（P>0.05），A 組、B 組 與C 組、D 組 之 間 差 異 都 極 顯 著 （P<0.01）。表明A 組（菌液濃度1×109個/mL）和B 組（菌液濃度1×108個/mL）對雞皮刺螨有較好殺滅效果；C組、D 組對雞皮刺螨也有一定的殺滅效果，但起效時間比較慢。

表1 不同濃度球孢白僵菌對雞皮刺螨的體外殺滅效果

2.2 不同濃度白僵菌對雞皮刺螨的致死中時比較從表2 可以看出，A 組和B 組的致死中時 （LT50）分別為5.70 d 和5.57 d， 兩組之間差異不顯著 （P>0.05），C 組和D 組的LT50分別為9.78 d 和10.02 d，兩組之間差異不顯著 （P>0.05）， 但A 組、B 組與C組、D 組之間差異極顯著（P<0.01）。

3 分析與討論

從試驗結果看，1×109個/mL 和1×108個/mL 白僵菌濃度在10 d 內可殺滅90%以上蟲體，LT50分別為5.70 d 和5.57 d； 而1×107個/mL 和1×106個/mL濃度要15 d 時間殺滅85%以上的蟲體，LT50分別為9.78 d 和10.02 d。 表明不同濃度的球孢白僵菌對雞皮刺螨有不同程度的殺滅效果， 在臨床上應用效果有待于對發病雞場進一步應用驗證。

球孢白僵菌是自然界中廣泛存在的特異性寄生型真菌，可寄生于蛛形綱、昆蟲綱中的鞘翅目、鱗翅目、膜翅目等多個綱目的蟲體，是一種廣泛應用于農林害蟲防治的微生物[3]。 其殺蟲機理是白僵菌孢子在接觸害蟲后產生芽管侵入蟲體， 并在蟲體內大量繁殖，產生的代謝產物對昆蟲體內角質層、細胞層、細胞核都會產生不利影響， 最終導致害蟲因代謝紊亂而死亡[3]。 雖然球孢白僵菌能侵害多種昆蟲，但不同菌株對害蟲寄生有一定的專一性或選擇性， 據張艷璇等[2]報道，白僵菌CQBb111 菌株對柑橘木虱有92.68%的殺滅效果， 而對胡瓜新小綏螨只有4.05%的殺滅效果。 環境因素對球孢白僵菌的致病力影響也較大，曹藝瀟等[8]測試了不同溫度、濕度下球孢白僵菌對草地螟幼蟲的致病力，結果表明：室溫26 ℃時致死率最高，死亡時間最短，而相對濕度越高，幼蟲死亡率也越高，在相對溫度95%時，幼蟲死亡率可達100%。

表2 不同濃度白僵菌對雞皮刺螨的致死中時

雞皮刺螨在適宜環境下不吃食可以存活3 個月，其生存適宜溫度為17~32 ℃，適宜濕度為40%~80%[9]，本試驗中對照組也有部分成蟲死亡，分析與環境不良有關（特別是高濕度）。 不同階段蟲體對白僵菌的易感性是否存在差異，有待進一步證實。