CRNN 在食管鱗癌癌化區(qū)域的表達(dá)研究

鄭鳳長(zhǎng) 熊海科 趙海龍 朱小康 薛繼軍 袁繼寶 李瑩 陳靜 朱自江

甘肅省腫瘤醫(yī)院，甘肅 蘭州730050

區(qū)域癌化理論證實(shí)病理形態(tài)結(jié)構(gòu)正常但Lugol’s染色異常的食管上皮即是食管上皮中的癌化區(qū)域，此區(qū)域中必然存在食管鱗癌早期的基因改變［1，2］。基于這一理論基礎(chǔ)，我們初步建立了食管癌早期癌化區(qū)域與食管癌組織、正常食管組織間差異表達(dá)的基因文庫(kù)，用于進(jìn)行后期研究工作。抑制性消減雜交技術(shù)（SSH）是基于抑制性PCR 的未知差異表達(dá)基因篩選技術(shù)，目前已廣泛應(yīng)用于差異表達(dá)基因的篩選，SSH 具有快速、高效、高特異性、高敏感性的優(yōu)點(diǎn)。本研究探討應(yīng)用SSH法篩選獲得的CRNN 基因在早期食管癌變中的潛在價(jià)值，并初步評(píng)估其在早期食管癌發(fā)生發(fā)展中的作用。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取我院2016 年1～12 月病理診斷的食管癌鱗癌切除標(biāo)本。納入標(biāo)準(zhǔn)：無(wú)其他惡性腫瘤既往病史、未接受放療或化療，且癌組織距上切緣大于5cm 的患者標(biāo)本。排除標(biāo)準(zhǔn)：上切緣陽(yáng)性或存在其他病理類型標(biāo)本、患者拒絕收集標(biāo)本者。共納入符合要求患者標(biāo)本68 例，對(duì)標(biāo)本進(jìn)行Lugol's 液染色處理。

1.2 組織標(biāo)本收集 食管癌切除標(biāo)本離體20 分鐘內(nèi)進(jìn)行取材。縱向剖開食管腔，用醫(yī)用生理鹽水充分噴洗食管黏膜，噴灑Lugol's 液，5 分鐘后用醫(yī)用生理鹽水洗去食管黏膜表面Lugol's 液后觀察染色情況。依次收集主癌灶、主癌灶外Lugol's 液染色陽(yáng)性區(qū)及正常食管黏膜染色區(qū)的小片或點(diǎn)狀食管黏膜，將所取標(biāo)本分為三份，其中一份用于病理診斷（取10%中性福爾馬林溶液適量，固定組織，石蠟包埋后4 μm 切片，HE 染色）；……