病理特殊染色聯合病理免疫組化在鑒別腫瘤病理中的臨床意義

付銀娜 孫春霞 閆伍玲 劉偉 李瑞琴

（1. 河南中醫藥大學第三附屬醫院病理科，河南 鄭州 450000；2. 河南中醫藥大學基礎醫學院，河南 鄭州 450000；3. 河南中醫藥大學中醫藥科學院，河南 鄭州 450000）

隨著經濟水平提高及生活方式改變，近年來臨床腫瘤發病率隨之提高，大多數腫瘤早期無明顯臨床特征，就診時已處于中晚期，導致無法進行手術治療，需進行長時間放化療，對患者身心健康造成嚴重影響，因此，臨床應盡早對患者腫瘤性質進行定性診斷，以制定相應治療方案，改善預后[1]。

超聲、磁共振、CT 等影像學方法目前已廣泛應用于腫瘤相關檢查中，雖操作簡便且無創傷性，但均存在一定漏診、誤診現象。活檢穿刺等病理診斷為診斷腫瘤的“金標準”，可有效觀察腫瘤分期、分型等，但病理診斷均具有一定創傷性，致使患者產生抵觸情緒，對檢查依從性造成影響。免疫組化目前已逐漸應用于腫瘤檢查中，可通過化學反應對腫瘤組織內抗原進行定性分析，從而進行診斷[4]。病理特殊染色可以有效顯示腫瘤組織的分化程度等信息，為臨床早期的診斷提供有效依據[5]。

目前臨床對于二者聯合診斷腫瘤相關研究較少，本研究選取86 例我院腫瘤患者，旨在探討病理特殊染色法、病理免疫組化在腫瘤診斷中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取86 例我院2019 年8 月至2021 年8 月就診的腫瘤患者，其中男52 例，女34 例，年齡46~73 歲，平均年齡58.73±3.26 歲；體質量指數20.4~26.8 kg?m-2，平均體質量指數23.72±1.05 kg?m-2；本研究經我院倫理委員會審核批準。

納入標準：均可接受手術穿刺活檢；病理組織均保存完好；知情本研究并簽署知情同意書。排除標準：合并精神疾病依從性較差；合并慢性、急性感染疾病；合并造血系統疾病；合并腎、肝功能異常；合并自身免疫系統疾病。

1.2 方法

所有患者入院后均進行手術穿刺檢查，在超聲下根據腫瘤位置、類型行針對性穿刺，對比病灶組織與標準組織，進一步行病理特殊染色法、病理免疫組化檢查。

病理組織修剪為1 cm×2 cm×0.2 cm，浸泡于甲醛溶液中2 h，浸泡完畢后采用透明液處理1 h后進行脫水。蠟液中浸泡1 h 后切片處理，厚度為2 μm。

1.2.1 病理特殊染色

采用二甲苯脫蠟處理后，行Mallory 磷鎢酸蘇木素染色，所有操作均嚴格按照試劑盒、儀器相關說明進行。

1.2.2 病理免疫組化

脫蠟處理后，采用高壓抗原法進行修復，于壓力鍋中加入配置好的檸檬酸抗原修復液，加熱至沸騰狀，將切片固定于耐高溫架上，放置于沸騰修復液中，扣緊壓力閥，待沸騰2 min 后，室溫冷卻，采用PBS 溶液沖洗兩次，每次3min，沖洗完成后加入Glypican-3 抗體，置于室溫下孵育60 min，采用PBS 溶液沖洗3 次，每次4 min，去除PBS 液滴后加1 滴MaxVisionTM 試劑，常溫孵育15 min 后，采用PBS 溶液沖洗3 次，每次3 min，去除PBS 液滴后加1 滴DAB 顯色液，觀察后水洗，水沖返藍，酒精透明處理，樹膠封固。

1.3 診斷標準

1.3.1 病理特殊染色

根據觀察陽性細胞數目與染色體強度乘積進行計分診斷。0 分：陽性細胞數目＜1%，無染色體強度；1 分：陽性細胞數目＜10%，具有弱染色體強度；2 分：陽性細胞數目為10%~35%，具有中染色體強度；3 分：陽性細胞數目為35%~65%，具有強染色體強度；4 分：陽性細胞數目為65%以上。經陽性細胞數目與染色體強度分數乘積進行診斷，0 分為陰性；1~4 分為1+；6~8 分為2+；9~12 分為3+。

1.3.2 病理免疫組化

經免疫組化特殊染色后采用GLypican-3 判定結果，染色后顯示為棕黃色即診斷為陽性。

1.4 觀察指標

統計病理特殊染色、免疫組化單獨、聯合診斷結果、病理診斷結果一致性，聯合診斷結果采用并聯原則。比較病理特殊染色、免疫組化單獨、聯合診斷效能。

1.5 統計學方法

采用SPSS22.0 統計學軟件處理數據，計數資料用例或率（n（%））表示，兩組間比較行χ2檢驗，采用Kappa 值檢驗特殊染色、免疫組化診斷結果與病理診斷結果一致性，其中Kappa 值＜0.4為差，0.4～0.75 為較好，＞0.75 為好。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 病理特殊染色法、免疫組化單獨、聯合診斷結果

經術后病理診斷結果顯示，86 例腫瘤患者中，惡性62 例，良性24 例；經病理免疫組化診斷結果顯示，86 例腫瘤患者中，惡性48 例，良性38例；經病理特殊染色法、免疫組化聯合診斷結果顯示，86 例腫瘤患者中，惡性61 例，良性25 例；經一致性分析結果顯示，病理特殊染色法、免疫組化聯合診斷與術后病理診斷結果Kappa 指數值為0.743，見表1。

表1 病理特殊染色法、免疫組化聯合診斷結果

2.2 單獨、聯合診斷準確率比較

病理特殊染色、免疫組化單獨診斷靈敏度、準確率、漏診率比較差異無統計學意義（P＞0.05）。與病理特殊染色單獨診斷比較，病理特殊染色、免疫組化聯合診斷靈敏度、準確率較高，漏診率較低（P＜0.05）；與病理免疫組化單獨診斷比較，病理特殊染色、免疫組化聯合診斷靈敏度、準確率較高，漏診率較低（P＜0.05），見表2。

表2 單獨、聯合診斷效能比較（n（%））

3 討論

腫瘤是目前臨床多發疾病，大多數腫瘤發病初期無典型特征，易被患者忽視，且常出現漏診、誤診現象，當出現腫瘤特征時已進入中晚期，導致無法進行手術治療，對預后恢復造成嚴重影響。因此，早發現、早治療為腫瘤治療的關鍵所在，從而改善患者生存質量。

近年來病理特殊染色、免疫組化已逐漸應用于腫瘤病理診斷中，其中免疫組化可通過觀察患者腫瘤切片結合臨床表現，了解腫瘤具體形態及在機體內轉化途徑，從而根據腫瘤特征制定治療方案[8]。本研究結果顯示，病理免疫組化診斷準確率為74.42%，與術后病理診斷結果Kappa 指數值為0.461，說明病理免疫組化診斷對于腫瘤檢查具有一定價值，與術后病理診斷結果一致性良好，可用于臨床初步診斷。病理特殊染色為腫瘤檢查時常用的輔助診斷措施，可有效觀察腫瘤病變組織網狀纖維數量、密集程度、粗細等情況，從而彌補病理診斷的不足[12]。本研究結果顯示，病理特殊染色、免疫組化聯合診斷準確率顯著高于單獨診斷，與術后病理診斷結果Kappa 指數值為0.743，提示臨床可通過聯合應用病理特殊染色、免疫組化進行早期診斷，以制定相應治療方案。

綜上所述，病理特殊染色聯合病理免疫組化可有效提高腫瘤診斷準確率，為臨床早期診斷及制定相應治療方案提供可靠依據。