子宮內膜癌中雌孕激素受體、Ki-67、C-erbB-2表達與病理的相關性分析

張躍

商河縣人民醫院病理科，山東商河 251600

子宮內膜癌（endometrial carcinoma,EC）是發生在子宮內膜的上皮性惡性腫瘤，多見于絕經后或圍絕經期女性，其發病率位列婦科惡性腫瘤的第2位，而病死率僅次于宮頸癌與卵巢癌，為第3位，嚴重危及女性的健康與生命安全[1]。目前，病理學是診斷EC的金標準，近年來研究發現，EC的形成、進展、預后不僅與體內雌、孕激素水平有關，也與原癌基因異常激活與細胞異常增殖密切相關[2-3]。為進一步完善EC患者的診療方案，2020年8月—2021年7月2.商河縣人民醫院對52例患者病灶組織內孕激素受體(PR)、雌激素受體(ER)、表皮生長因子受體2(CerbB-2)、增殖細胞核抗原67(Ki-67)表達情況進行測定，并分析與病理的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取本院收治的52例EC患者作為研究組，年齡33~70歲，平均（50.45±7.52）歲；產次0~5次，平均（2.60±0.80）次；32例絕經，20例未絕經；國際婦產科聯盟(Federation International o f Gynecology and Ob‐stetr,FIGO)分期為Ⅰ期18例，Ⅱ期12例，Ⅲ期14例，Ⅳ期8例；分化程度為高分化15例，中分化13例，低分化24例；20例有淋巴結轉移，32例無淋巴結轉移；25例肌層浸潤程度<1/2，27例肌層浸潤程度≥1/2。另選擇同期于本院行手術切除或刮宮的48例子宮內膜不典型增生患者作為對照組，年齡34~72歲，平均（50.39±8.50）歲；產次0~5次，平均（2.62±0.65）次；30例絕經，18例未絕經。兩組患者年齡、產次、絕經情況等一般資料比較，差異無統計學意義（P>0.05），具有可比性。本研究方案取得商河縣人民醫院倫理委員會批準。患者與其家屬均知情同意。

1.2 納入與排除標準

納入標準：符合《婦產科學》9版[4]中對EC與子宮內膜不典型增生的診斷標準，且經病理檢查證實；本研究已向患者與其家屬進行充分告知。排除標準：近3個月內接受過雌、孕激素治療者；有放療或化療史；患有精神疾病者。

1.3 方法

檢測兩組患者病灶組織中的ER、PR、Ki-67、CerbB-2表達情況。選用上海超研生物科技術有限公司提供的即用型單克隆抗體ER、PR試劑，以及CerbB-2試劑盒、Ki-67試劑盒。通過40 g/L的甲醛對樣本固定1 d以上，石蠟包埋，4μm厚度連續切片，脫蠟至水，以3%過氧化氫溶液溫孵育，時間為10 min，水洗，通過7.4pH值的0.01 mol/L的乙二胺四乙酸熱修復，室溫水洗，在0.05 mol/L的磷酸鹽緩沖液（phosphate buffered solution,PBS）中浸泡5 min，以血清A封閉。采用蘇木精-伊紅與免疫組化染色。行免疫組化S-P檢測，加入一抗1：50的ER、PR、CerbB-2與Ki-67工作液，置入冰箱內存放過夜，完成后恢復室溫。通過PBS 3次，5 min/次，加入二抗孵育35 min，溫度控制在37℃，PBS3次，5 min/次，以二氨基聯苯胺顯色5 min，水洗，行蘇木素比較染色10 min，30 min后水洗反藍，最后脫水封片。

1.4 觀察指標

①根據《婦產科診斷病理學.第2版》[5]中標準，比較兩組患者病灶組織中雌激素受體(estrogen re‐ceptor,ER)、孕激素受體(progesterone receptor,PR)、增殖細胞核抗原67(proliferating cell nuclear antigen,Ki-67)、表皮生長因子受體2(epidermal growth factor receptor 2,C-erbB-2)陽性表達率。Ki-67、ER、PR陽性表達在細胞核分布，呈黃色；C-erbB-2陽性表達在細胞膜分布，呈棕黃色。陽性細胞<10%為陰性，10%~25%為弱陽性，26%~50%為陽性，>50%為強陽性。陽性率=（陽性例數+強陽性例數）/總例數×100.00%。②比較不同臨床病理特征（病理分期、肌層浸潤程度、分化程度、淋巴結轉移情況）研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽性表達情況。③針對研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽性表達與不同臨床病理特征進行相關性分析。

1.5 統計方法

通過SPSS23.0統計學軟件分析數據，計數資料[n(%)]表示，組間差異比較采用χ2檢驗，以Spearman進行數據相關性分析，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者病灶組織中ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽性表達率對比

研究組ER、PR陽性表達率低于對照組，差異有統計學意義（P<0.05），Ki-67、C-erbB-2陽性表達率高于對照組，差異有統計學意義（P<0.05）。見表1。

表1 兩組患者病灶組織中ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽性表達率對比[n(%)]

2.2 不同臨床病理特征研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽性表達情況

研究組EC患者病理分期Ⅲ~Ⅳ期、肌層浸潤程度≥1/2、中低分化、有淋巴結轉移的ER與PR陽性表達率低于Ⅰ~Ⅱ期、肌層浸潤程度<1/2、高分化與無淋巴結轉移者，差異有統計學意義（P<0.05）。研究組EC患者病理分期Ⅲ~Ⅳ期、肌層浸潤程度≥1/2、中低分化、有淋巴結轉移的Ki-67與C-erbB-2陽性表達率高于Ⅰ~Ⅱ期、肌層浸潤程度<1/2、高分化與無淋巴結轉移者，差異有統計學意義（P<0.05）。見表2。

表2 不同臨床病理特征研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽性表達情況[n(%)]

2.3 研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽性表達與不同臨床病理特征的相關性分析

經Spearman相關性分析顯示，ER、PR與EC患者病理分期、肌層浸潤程度、分化程度、淋巴結轉移呈負相關性（P<0.05），Ki-67、C-erbB-2陽性表達與EC患者病理分期、肌層浸潤程度、分化程度、淋巴結轉移呈正相關性（P<0.05）。見表3。

3 討論

EC是女性常見的生殖系統惡性腫瘤，每年約20萬新發病例，近年來隨著我國生活水平的改善，該病發病率也逐年攀升，給女性的健康與生命安全帶來嚴重影響[6]。目前，如何通過有效的措施保障EC患者的診療質量已成為臨床病理學者研究的重點[7]。

孕激素與雌激素均為人體重要的調節物質，主要存在于女性生殖道內，其中子宮、陰道、垂體組織中存在大量激素受體[8]。EC屬于激素依賴性疾病，當細胞癌變后患者生殖道內雌孕激素受體形成與作用，隨著病情不斷進展，激素受體則不斷降低，甚至消失[9-10]。Ki-67是存在于組織增殖基因中的核蛋白，主要在10號染色體上進行基因定位，其半衰期較短，一旦脫離增殖周期就快速降解，是檢測腫瘤增殖活性的可靠指標[11-12]。C-erbB-2的表皮因子受體與結構相近，是17號染色體的蛋白基因[13]。研究發現，C-erbB-2升高說明腫瘤侵襲作用更強，這可能與腫瘤進展、形成及預后有關[14]。陳菁[15]對154例EC患者進行病灶組織檢測，結果發現本組ER、PR陽性率53.2%、44.2%低于子宮內膜不典型增生組（80.0%、76.7%），Ki-67陽性率（59.7%）高于子宮內膜不典型增生組（33.3%）。本文結果與上述結果相近，研究組ER、PR陽性表達率（53.85%、50.00%）低于對照組（83.33%、83.33%）（P<0.05），Ki-67、CerbB-2陽性表達率（76.92%、75.00%）高于對照組（20.83%、25.00%）（P<0.05）。張鵬等[16]選擇77例EC患者的病灶組織蠟塊進行研究，發現浸潤程度>1/2的PR、ER陽性率（18.60%、25.58%）低于浸潤程度≤1/2的（76.47%、88.24%）（P<0.05），Ki-67、C-erbB-2陽性率（62.79%、48.84%）高于浸潤程度≤1/2的（55.88%、55.88%）（P<0.05）。本文研究中，研究組EC患者浸潤程度>1/2的PR、ER陽性率25.93%、29.63%低于≤1/2的76.00%、80.00%（P<0.05），Ki-67、C-erbB-2陽性率96.30%、100.00%高于浸潤程度≤1/2者的56.00%、48.00%（P<0.05），Ki-67陽性表達率與CerbB-2陽性表達率高于Ⅰ期~Ⅱ期、肌層浸潤程度<1/2、高分化與無淋巴結轉移者（P<0.05）。此外，經Spearman相關性分析顯示，ER、PR與EC患者病理特征呈負相關性（P<0.05），Ki-67、C-erbB-2與EC患者病理特征呈正相關性（P<0.05）。上述結果可見，Ki-67、C-erbB-2為陽性，ER、PR為陰性惡性程度更高，分化較差，反之惡性程度低，分化較佳。ER與PR的存在說明EC細胞對激素具有一定反應性，不僅為雌激素治療方案提供重要理論依據，且激素失表達也成為評估EC激素治療效果的可靠標志[17]。Ki-67、C-erbB-2則可以用于EC增殖狀態與分化狀態的評估，有效識別出腫瘤侵襲程度，預測治療效果，以及病情的惡化與復發情況[18]。

表3研究組EC患者ER、PR、Ki-67、C-erbB-2陽性表達與不同臨床病理特征的相關性分析

綜上所述，EC患者病灶組織中ER、PR、Ki-67、C-erbB-2表達與病理密切相關，為臨床診療與預后評估提供可靠參考。