血清Tim-3、IL-17及IFN-γ在兒童糖尿病中的臨床意義

王清清 蘇衛(wèi)東 薛慧芬

兒童糖尿病指15歲前出現(xiàn)糖尿病，主要是由于胰島素分泌不足導(dǎo)致的，可表現(xiàn)為多飲、多食及消瘦等癥狀，可引起多種并發(fā)癥，嚴重影響患兒生長發(fā)育［1-2］。當(dāng)出現(xiàn)血糖增高時，胰島β細胞70%~80%已被破壞，患兒常需要長期胰島素治療，但兒童屬特殊群體，依從性較差，導(dǎo)致臨床治療效果不佳，因此對兒童糖尿病的早期診斷有重要意義［3］。Tim-3是新型免疫調(diào)控分子，在細胞毒性T淋巴細胞、NK等細胞上均有表達，具有導(dǎo)致Th1細胞凋亡的作用，有利于清除病毒，參與多種疾病的發(fā)展過程［4］。IL-17是由中性粒細胞、嗜酸性粒細胞等釋放的促炎細胞因子，與組織炎癥反應(yīng)和自身免疫性疾病密切相關(guān)；IFN-γ是免疫調(diào)節(jié)因子，當(dāng)受到外界刺激時，IFN-γ會進入核內(nèi)，產(chǎn)生生物活性［5-6］。有研究顯示，抑制IL-17及IFN-γ的分泌可阻止1型糖尿病［7］。但Tim-3在糖尿病中的表達還有待進一步研究，本研究觀察兒童糖尿病血清Tim-3、IL-17及IFN-γ的表達，并分析其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇2016年2月至2020年2月本院兒童糖尿病患兒83例為觀察組，男52例，女31例；年齡2~14（7.62±2.14）歲；病程1~5（2.85±0.46）年；BMI（18.49±2.75）kg/m2。其中，超重患兒3例，肥胖患兒2例。1型糖尿病（T1DM）78例，2型糖尿病（T2DM）4例，新生兒糖尿病1例。糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)：①糖化血紅蛋白≥6.5%；②空腹血糖≥7.0 mmol/L；③口服葡萄糖耐量試驗2 h血糖≥11.1 mmol/L；④有典型糖尿病癥狀且隨機血糖≥11.1 mmol/L；⑤典型糖尿病癥狀包括多尿、多飲和不可解釋的體重減輕［8］。納入標(biāo)準(zhǔn)：符合上述糖尿診斷標(biāo)準(zhǔn)；年齡＜14歲；臨床資料完整；無長期服用影響檢測結(jié)果的藥物。排除標(biāo)準(zhǔn)：①先天免疫性疾病者；②監(jiān)護人不同意；③合并惡性腫瘤；④血液疾病；⑤嚴重肝腎疾病；⑥嚴重感染；⑦急慢性炎癥疾病；⑧內(nèi)分泌性疾病者。另選擇同期本院體檢健康者60例為對照組，男38例，女22例；年齡2~15（7.65±2.15）歲，BMI（17.45±2.81）kg/m2。兩組性別、年齡、BMI比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。

1.2 方法 所有患兒入院后開始禁食禁水，并采集6 mL靜脈血，采用酶聯(lián)免疫分析法檢測血清Tim-3、IL-17及IFN-γ，檢測儀器為德國IFP全自動酶標(biāo)儀，試劑盒購自上海江萊生物科技有限公司，操作均按試劑盒和相關(guān)儀器說明書進行；采用OLYMPUSAU 5400型全自動生化分析儀進行空腹血糖、HbAlc測定。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法 SPSS22.0統(tǒng)計軟件。計量資料用（±s）表示，兩組比較用t檢驗，計數(shù)資料以%表示，用χ2檢驗，相關(guān)性分析采用Spearman相關(guān)系數(shù)，使用受試者工作特征曲線（ROC）分析血清Tim-3、IL-17及IFN-γ的診斷效能，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清Tim-3、IL-17及IFN-γ水平比較 見表1。

表1 兩組血清Tim-3、IL-17及IFN-γ水平比較（±s）

表1 兩組血清Tim-3、IL-17及IFN-γ水平比較（±s）

組別 n Tim-3 IL-17（ng/L） IFN-γ（pg/mL）觀察組 83 2.83±0.35 287.56±77.67 153.52±30.12對照組 60 0.67±0.11 134.25±79.56 112.31±27.65 t值 46.145 11.530 8.354 P值 ＜0.001 ＜0.001 ＜0.001

2.2 兩組患兒血糖指標(biāo)比較 見表2。

表2 兩組患兒血糖指標(biāo)比較（±s）

表2 兩組患兒血糖指標(biāo)比較（±s）

組別 n FPG（mmol/L） HbAlc（%）觀察組 83 9.51±1.52 13.17±2.12對照組 60 5.14±0.79 5.11±0.78 t值 20.357 28.084 P值 ＜0.001 ＜0.001

2.3 血清Tim-3、IL-17及IFN-γ與血糖指標(biāo)的相關(guān)性分析 血清Tim-3、IL-17及IFN-γ水平與FPG、HbAlc呈正相關(guān)（P＜0.05），見表3。

表3 血清Tim-3、IL-17及IFN-γ與血糖指標(biāo)水平的相關(guān)性分析

2.4 血清Tim-3、IL-17及IFN-γ在兒童糖尿病中的預(yù)測價值 血清Tim-3預(yù)測兒童糖尿病的曲線下面積（AUC）為0.983，95%CI：0.966~1.000，敏 感 度80.25%，特異度83.08%，截斷值為1.43；IL-17預(yù)測兒童糖尿病的AUC為0.932，95%CI：0.893~0.972，敏感度75.00%，特異度79.53%，截斷值為225.46 ng/L；IFN-γ預(yù)測兒童糖尿病的AUC為0.876，95%CI：0.821~0.932，敏感度82.50%，特異度83.14%，截斷值為129.59 pg/mL；聯(lián)合檢測預(yù)測兒童糖尿病的AUC為0.999，95%CI：0.965~1.000，敏感度88.59%，特異度93.45%，見圖1。

圖1 血清Tim-3、IL-17及IFN-γ檢測糖尿病的ROC曲線

3 討論

兒童糖尿病多為1型，是糖尿病中較為特殊的類型，主要是由于胰島素分泌不足、胰島β細胞損失和破壞導(dǎo)致的。肥胖是引發(fā)T2DM的高危因素，隨著肥胖兒童的增多，T2DM的發(fā)病率在較多國家也呈上升趨勢［9］，如美國從2002年的9.0/10萬上升至2011年的12.5/10萬［10］，我國近20余年兒童T2DM發(fā)病率明顯增加［11］。糖尿病發(fā)病機制較為復(fù)雜，有研究顯示，多種細胞因子參與兒童糖尿病的發(fā)展，尋找與疾病相關(guān)因子，可對疾病進行早期預(yù)測，可減少兒童糖尿病的發(fā)生率［12］。FPG、HbAlc是血糖常用指標(biāo)，F(xiàn)PG能反映胰島B細胞功能，代表基礎(chǔ)胰島素的分泌功能；HbAlc是紅細胞中的血紅蛋白與血清中的糖類相結(jié)合的產(chǎn)物，可有效反映糖尿病患兒過去8~12周平均血糖水平［13］。本資料結(jié)果顯示，兒童糖尿病患兒血清FPG、HbAlc水平高于健康人群，提示，血清FPG、HbAlc在兒童糖尿病中表達較高。

Tim-3由281個氨基酸組成，是一種新型免疫調(diào)節(jié)分子，在自身免疫性疾病及感染性疾病中具有重要作用，有研究顯示，Tim-3在慢性乙肝中表達較高，可誘導(dǎo)Thl細胞凋亡并抑制Thl型免疫反應(yīng)，從而調(diào)節(jié)慢性乙肝患兒的免疫平衡［14］。本資料結(jié)果顯示，兒童糖尿病血清Tim-3明顯高于健康人群，且與FPG、HbAlc呈正相關(guān)，提示Tim-3在兒童糖尿病中呈高表達，且隨著血糖水平的升高而升高。黃曉燕等［15］研究也顯示，Tim-3水平升高可促使炎癥因子比值增大，導(dǎo)致免疫失衡，損傷胰島β細胞，從而加重兒童糖尿病的病情。IL-17是炎癥反應(yīng)重要因子，活化多種細胞產(chǎn)生炎性介質(zhì)［16］。有研究顯示，IL-17與胰島素抵抗呈正相關(guān)，其水平變化在糖尿病進程中發(fā)揮重要作用［17］。本資料結(jié)果顯示，兒童糖尿病血清IL-17明顯高于健康人群，且和FPG、HbAlc呈正相關(guān)，表明IL-17在兒童糖尿病中表達較高，可作為預(yù)測疾病的標(biāo)志物。王為等［18］研究也顯示，IL-17參與1型糖尿病的發(fā)生，可能是通過誘導(dǎo)胰島β細胞免疫炎癥損傷促進疾病的發(fā)生，與本研究結(jié)果相似。

IFN-γ是一種來自淋巴細胞培養(yǎng)的干擾素，可增加自然殺傷細胞，起到免疫調(diào)節(jié)作用，具有抗病毒和免疫調(diào)控的作用，產(chǎn)生多種的細胞反應(yīng)［19］。本資料結(jié)果顯示，兒童糖尿病血清IFN-γ明顯高于健康人群，且與FPG、HbAlc呈正相關(guān)，提示IFN-γ在糖尿病中表達較高，且可隨著血糖水平的升高而升高，可作為預(yù)測兒童糖尿病的標(biāo)志物。分析其原因可能是當(dāng)兒童發(fā)生糖尿病時患兒已處于高血糖環(huán)境下，引起細胞免疫功能障礙，導(dǎo)致Th1型細胞因子分泌減少，而IFN-γ的高表達能促進糖尿病中Th1細胞的活化，使患兒無法啟動有效免疫應(yīng)答，從而加重疾病的發(fā)生。進一步分析發(fā)現(xiàn)，血清Tim-3、IL-17、IFN-γ的截斷值分別為1.43 ng/L、225.46 ng/L、129.59 pg/mL，且三種指標(biāo)聯(lián)合檢測具有較高的敏感度和特異度，證實血清Tim-3、IL-17及IFN-γ在兒童糖尿病中的預(yù)測價值。

綜上所述，血清Tim-3、IL-17及IFN-γ在兒童糖尿病中表達較高，且與FPG、HbAlc之間存在著密切關(guān)系，對兒童糖尿病具有較高的預(yù)測價值。