SCNN1B、YAP1、ABCG2在非小細胞肺癌組織中的表達及相關性

丁家寶,高 鯤,張 倩

(秦皇島市第一醫院 1.胸外科；2.風濕免疫科,河北 秦皇島066000)

非小細胞肺癌具有較高的惡性生物學特性，嚴重威脅著患者的生命健康[1]。目前臨床上對于非小細胞肺癌的具體發病機制尚不完全明確，研究發現，非小細胞肺癌的發生與多種細胞因子表達相關[2]。既往研究證實，SCNN1B、YAP1、ABCG2均參與惡性腫瘤的發生發展[3-5]。本研究分析SCNN1B、YAP1、ABCG2在非小細胞肺癌組織中的表達，報道如下。

1 對象與方法

1.1 研究對象

2019年7月—2020年7月秦皇島市第一醫院收治的120例非小細胞肺癌患者，男70例，女50例，年齡40-67歲，平均年齡(50.83±10.15)歲，≥60歲30例，<60歲90例；腫瘤直徑：≥3 cm 59例，<3 cm 61例；TNM分期：Ⅰ+Ⅱ期60例，Ⅲ+Ⅳ期60例；有淋巴結轉移42例；分化程度：中低分化46例，高分化74例；病理類型：鱗癌61例，腺癌59例。另外收集通過手術切除的肺組織良性病變標本120例，其中包括炎性假瘤78例，肺結核31例，其他11例。患者及家屬均知情同意本次研究，且經醫院倫理委員會審核批準。

納入標準：符合《中華醫學會肺癌臨床診療指南(2018版)》[6]中關于非小細胞肺癌的診斷標準，且經細胞學、病理學及影像學確診，自愿參與本次研究，未經放化療治療。

排除標準：合并肝癌、胃癌等其他惡性腫瘤者；合并先天性免疫缺陷病者；合并糖尿病、高血壓等嚴重內科疾病者；心、腎、肝等臟器功能障礙者；合并精神障礙、溝通障礙者。

1.2 樣本采集

取所有患者手術切除的癌組織、良性病變組織，采用40 g/L多聚甲醛固定后行石蠟包埋、切片，作后續指標檢測。

1.3 實時熒光定量PCR(RT-PCR)法檢測SCNN1B、YAP1、ABCG2表達量

取所制備的癌組織、良性病變組織標本，提取組織RNA(Trizol法)，之后使用紫外分光光度儀、聚丙烯酰胺凝膠電泳鑒定RNA純度，利用PCR試劑盒合成cDNA。逆轉錄：模板RNA 14 μl，Enzyme mix 2 μl，5×RT緩沖液4 μl，使用蒸餾水補至20 μl，之后在PCR檢測儀上做42℃ 1 h、95℃ 5 min的處理后，將所合成的cDNA在-20℃下保存。反應體系：0.4 μl上下游引物，cDNA模板 8 μl，SYBRP Green mix 10μl，PCR Primer mix 2 μl。反應條件：95℃ 10 min；95℃ 10 s；60℃ 1 min；40個循環。以β-actin為內參，采用2-△△Ct方法計算表達量。SCNN1B上游引物序列：5’-GAGCGGGACCAAAGCAC-3’，下游引物序列：5’-GCAGCCAGACGATGTTATT-3’；YAP1上游引物序列：5’-ACCCACAGCTCAGCATCTTC-3’，下游引物序列：5’-TCATGGCAAAACGAGGGTCA-3’；ABCG2上游引物序列：5’-GGTCAGAGTGTGGTTTCTGTAGCA-3’，下游引物序列：5’-GTGAGAGATCGATGCCCTGCTTA-3’；β-actin上游引物序列：5’-CACTGTGCCCATCTACGAGG-3’，下游引物序列：5’-TAATGTCACGCACGATTTCC-3’。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 SCNN1B、YAP1、ABCG2在非小細胞肺癌組織、良性病變組織中的表達

如表1所示，與良性病變組織相比，癌組織中SCNN1B、YAP1、ABCG2表達量均較高，差異具有統計學意義(P<0.05)。

表1 SCNN1B、YAP1、ABCG2在非小細胞肺癌組織、良性病變組織中的表達

2.2 SCNN1B、YAP1、ABCG2與非小細胞肺癌患者臨床特征的關系

如表2所示，SCNN1B、YAP1、ABCG2表達與非小細胞肺癌患者性別、年齡、病理類型無關，差異無統計學意義(P>0.05)；SCNN1B、YAP1、ABCG2表達與非小細胞肺癌患者腫瘤直徑、TNM分期、有無淋巴結轉移、分化程度相關，腫瘤直徑≥3 cm、Ⅲ+Ⅳ期、有淋巴結轉移、中低分化患者SCNN1B、YAP1、ABCG2表達量較高，差異具有統計學意義(P<0.05)。

表2 SCNN1B、YAP1、ABCG2與非小細胞肺癌患者臨床特征的關系

2.3 SCNN1B、YAP1、ABCG2之間相關性分析

如圖1所示，Pearson相關性分析顯示，SCNN1B與YAP1之間呈正相關(r=0.301，P<0.001)；SCNN1B與ABCG2之間呈正相關(r=0.277，P=0.002)；YAP1與ABCG2之間呈正相關(r=0.372，P<0.001)。

圖1 SCNN1B、YAP1、ABCG2之間相關性

2.4 SCNN1B、YAP1、ABCG2對非小細胞肺癌的預測價值

如表3所示，與SCNN1B、YAP1、ABCG2單項相比，3項聯合對非小細胞肺癌的預測價值較高(P<0.05)。

表3 SCNN1B、YAP1、ABCG2對非小細胞肺癌的預測價值

3 討論

SCNN1B屬于一種具有穩定鈉通道的β亞單位的編碼基因，控制不同器官中水和電解質的跨上皮轉運，參與惡性腫瘤的發生發展[7]。Karacan Kü?ükali G[8]、Fan P等[9]分別在其研究中發現SCNN1B與假性醛固酮增多癥、高血壓相關，另外柯東平等[10]認為SCNN1B與胃癌細胞上皮間質轉化相關。本研究中，SCNN1B在非小細胞肺癌組織中表達升高，與雷銳等[11]研究中認為SCNN1B基因與非小細胞肺癌相關的研究結果一致。

臨床研究顯示，HIPPO信號轉導通路屬于由不同的蛋白質所組成的通路，其與組織再生、器官大小相關，參與惡性腫瘤的發生發展，而YAP1屬于HIPPO信號轉導通路的核心因子，在多種惡性腫瘤中表達均較高，與惡性腫瘤患者的轉移和預后生存密切相關[12]。報道顯示，正常活化的YAP1可修復生物體創傷，但在其處于超激活狀態下時為異常高表達的狀態，可在一定程度上提高細胞增殖能力，促進惡性腫瘤的形成[13]。目前已有多數研究顯示，YAP1在多種惡性腫瘤中表達異常。本研究顯示，YAP1在非小細胞肺癌組織中表達升高，且與多種病理特征相關，此結果提示YAP1可能參與非小細胞肺癌的發生發展。

ABCG2為一種近年來新發現的藥泵蛋白，臨床研究顯示，ABCG2主要在內質網中生成，在正常肝細胞、小腸黏膜細胞、腎上皮細胞、神經細胞的腔膜面等均微量或者低表達，但在癌變細胞中表達明顯升高[14]。胡凱等[15]在其研究中認為ABCG2在非小細胞肺癌中表達明顯升高，參與此病的發生發展。本文結果顯示，ABCG2在非小細胞肺癌高表達，且與患者腫瘤直徑、TNM分期、有無淋巴結轉移、分化程度相關，提示其可能參與此病的發生發展。