劉 歡,趙巨堂,羅海濤,任周營,邵燈寅,
(1.南昌大學食品科學與技術國家重點實驗室,江西南昌 330047;2.江西中煙工業有限責任公司,江西南昌 330096)
百里香(L.)是唇形科(Labiatae)百里香屬()雙子葉植物,因其植株具有濃郁的芳香而聞名,別名地椒、山椒、麝香草等。百里香原產于歐洲南部,在我國主要分布在甘肅、陜西等黃河以北地區,被作為食品的調味品而廣泛種植,是一種重要的烹飪香料,可以去除食品中的腥味,給予其清香和草香味。百里香中除了含有大量揮發性香味成分外,還有碳水化合物、蛋白質和鈣、鐵、鋅、硒等微量元素,具有很高的食用價值。百里香精油作為主要生物活性成分,其分析和應用正在不斷研究與發展。
百里香精油的用途十分廣泛,由于其具有愉悅、宜人的香氣在香精香料和化妝品工業被用作芳香劑、增味劑。同時百里香精油還表現出優良的抑菌、防腐和抗氧化性能,亦可有望成為人工合成添加劑的替代品。研究表明,精油的質量與提取方法息息相關,不同提取方法所展現出的物化性質有可能差異很大,直接關系著精油的應用效果。目前有關于百里香精油的研究多集中于對其抗氧化性和抗菌保鮮方面的探索,對于不同提取方法的考察鮮有報道。在各種提取方法中水蒸氣蒸餾法(SD)是指將植物原料浸泡在容器中的水中,然后將混合物煮沸的過程,是一種傳統而且最為常用的精油獲取方式。同時蒸餾萃取(SDE)結合了水蒸氣蒸餾與有機萃取兩種方法的優點,在少量萃取溶劑存在的條件下便可制得更多的樣品,更好地濃縮了香氣成分,一定程度上避免了水蒸氣蒸餾法提取后收集微量精油時因粘壁而損失的情況。兩種方法最主要的區別是SDE 法可以將有機蒸汽和樣品蒸汽交匯后同時冷凝下來,即在不斷的水蒸氣蒸餾過程中進行溶劑萃取,對于精油的交換萃取更為徹底。等離子體輔助提取(CPAE)則是一種較為新穎的非熱加工提取技術,等離子是由自由電子、離子、自由基、激發態粒子構成的整體呈電中性的導電流體,含有多種活性物質,主要用于殺菌保藏和組分改性,這種準中性電離氣體會導致果皮表面蝕刻,這有助于使存在于角質層下方的油腺破裂,便于浸出。Ebadi 等利用冷等離子體輔助提取檸檬馬鞭草精油時,發現短時間的處理檸檬馬鞭草對于得率的提高有著積極的影響,而且一定程度上改變了精油中揮發性成分的種類和含量。雖然近年來我國有文獻報道過百里香精油的成分及提取工藝的影響,但是嘗試的提取方法多為較常規的溶劑提取、微波提取等,在百里香精油提取上,對于同時蒸餾萃取和等離子體這種新型非熱處理方法輔助提取精油的研究還有待拓展。
本研究采用SD 法、SDE 法和CPAE 法制備百里香精油,綜合比較了傳統和新興提取方法對于百里香精油得率、揮發性成分、抗氧化性的影響,考察百里香精油的主要活性物質與抗氧化能力的相關性,旨在獲得更為科學有效的方法,為百里香精油的工業生產和綜合利用提供理論依據和文獻參考。
百里香葉 品種為銀葉百里香,產地為廣西玉林。樣品預處理:用蒸餾水將百里香清洗后,在60 ℃烘箱中干燥6 h,室溫冷卻后用粉碎機粉碎,然后過60 目篩,收集后于干燥陰涼處保存備用。
無水硫酸鈉、水楊酸、30%過氧化氫、過硫酸鉀、抗壞血酸、氯化鈉、正己烷、二氯甲烷、氯化鉀、三氯化鐵、無水乙酸鈉、冰醋酸、無水乙醇、甲醇、七水合硫酸亞鐵、氫氧化鈉、亞硝酸鈉、氯化鋁、無水碳酸鈉 分析純,西隴科學股份有限公司;福林酚試劑、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)、2,2-聯氮-二(3-乙基-苯并噻唑-6-磺酸)二銨鹽(2,2'-Azinobis-(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonate),ABTS)均為分析純;2,4,6-三吡啶基三嗪(TPTZ)、蘆丁標準品、沒食子酸標準品、2-茨醇標準品、百里香酚標準品、香芹酚標準品均為色譜純 索萊寶生物科技有限公司。
DZF-6055 鼓風干燥箱 上海一恒科學儀器有限公司;HWS-24 型電熱恒溫水浴鍋 上海一恒科學儀器有限公司;DFY-500 中藥粉碎機 大德中藥機械有限公司;KE-52AA 旋轉蒸發器、SHZ-III 型循環水真空泵 上海亞榮生化儀器廠;Agilent7890-7000A氣相色譜-三重串接四極桿質譜聯用儀 美國安捷倫科技有限公司;ZNHW 型智能恒溫電熱套 上海錦岐儀器設備有限公司;LE2202E 電子天平 梅特勒托利多儀器有限公司;U-T6 紫外可見分光光度計屹譜儀器制造有限公司;BD/BC-218E 冰柜 浙江星星冷鏈集成股份有限公司;WBFY-205 型微波化學反應器 上海秋佐科學儀器有限公司;VORTEX 3 旋渦振蕩器 艾卡(廣州)儀器設備有限公司;非平衡性大氣壓下介質阻擋放電(DBD)冷等離子體系統實驗室自主開發。
1.2.1 水蒸氣蒸餾法(SD)提取百里香精油 稱取50 g 百里香粉后添加1000 mL 蒸餾水以及1% NaCl,在組裝好的揮發油提取器及冷凝裝置中微沸條件下反應3 h,提取結束后冷卻至室溫,取10 mL 正己烷把百里香精油萃取出來,之后添加3 g NaSO,然后置于-18 ℃冰箱冷凍8 h,濾除固體后旋蒸除去溶劑,將百里香精油收集備用。
1.2.2 同時蒸餾萃取(SDE)百里香精油 稱取50 g百里香粉后添加500 mL 蒸餾水以及1% NaCl,在另一個容器中加入50 mL 二氯甲烷(分析純)并放入60 ℃的水浴鍋中,通過同時蒸餾萃取裝置將兩個容器連接起來,等兩邊蒸汽都開始冷凝后打開計時器,提取3 h 后再把二氯甲烷收集起來并添加適量無水NaSO除去少量水分,然后置于-18 ℃冰箱冷凍8 h,濾除固體后旋蒸除去溶劑,將百里香精油收集備用。
1.2.3 冷等離子體輔助提取(CPAE)百里香精油 稱取50 g 百里香粉放入直徑18 cm,高度3 cm 的等離子體反應室中用等離子體處理,冷等離子體的產生是由非平衡性大氣壓下介質阻擋放電(DBD)冷等離子體系統實現的,該反應室由上下兩個平面銅電極組成,電極之間的距離(放電空間)和電極兩端的電勢(電壓)可以根據需要變化。所采用的系統利用大氣(O、N)作為等離子體放電的來源,介質阻擋材料為聚氯乙烯(PVC),百里香粉在45 kV 的高壓和50 Hz的頻率處理5 min 結束,在原料中添加1000 mL 蒸餾水以及1% NaCl,組裝好揮發油提取器及冷凝裝置在微沸條件下反應3 h,提取結束待收集管冷卻后取10 mL 正己烷把百里香精油萃取出來,之后加3 g NaSO,然后置于-18 ℃的冰箱冷凍8 h,濾除固體后旋蒸除去溶劑,將百里香精油收集備用。
1.2.4 百里香精油得率的計算

1.2.5 GC-MS 分析條件
1.2.5.1 色譜條件 色譜柱:HP-5MS 石英毛細管柱(30 m×0.25 mm×0.25 μm);升溫程序:初始溫度60 ℃,保持3 min,以6 ℃/min 升溫至240 ℃,保持3 min,再以10 ℃/min 升溫至280 ℃,保持3 min。進樣口溫度250 ℃,載氣為氦氣,流量:1 mL/min,進樣量:1 μL;分流比:20:1。
1.2.5.2 質譜條件 電離方式EI,電離能量70 eV;離子源溫度230 ℃;四級桿溫度150 ℃,溶劑延遲4 min;掃描離子質量范圍35~550 amu。對照質譜庫NIST08 結合標準品進行成分定性,使用面積歸一化法計算百里香精油各組分的相對含量。
1.2.6 總酚、總黃酮、總花青素含量的測定
1.2.6.1 精油中總酚含量的測定 參考文獻[11]的方法,將3 種精油配制為1 mg/mL 乙醇-精油溶液,將0.5 mL 的乙醇-精油溶液與2.5 mL 的Foline-Ciocalteu 試劑(用蒸餾水1:10 稀釋)和2 mL 的7.5%碳酸鈉溶液在試管中混合,搖勻。將混合物在45 ℃的熱水浴中保持15 min。由試劑空白作為參比,在765 nm 處測量吸光度。以沒食子酸(Gallic acid,GA)作為標準品并按上述方法繪制標準曲線,得到回歸方程y=9.17619x+0.03195(=0.99903),總酚含量以每克精油中沒食子酸的毫克數表示。
1.2.6.2 精油中總黃酮含量的測定 參照文獻[12]的方法,將三種精油配為1 mg/mL 乙醇-精油溶液,吸取1.0 mL 乙醇-精油溶液于10 mL 試管中,加蒸餾水4.4 mL,加5%亞硝酸鈉溶液0.3 mL,混勻,靜置5 min;再加入10%氯化鋁溶液0.3 mL,搖勻,靜置6 min;然后加4%氫氧化鈉溶液2.0 mL,搖勻,靜置15 min。由試劑空白作為參比,在510 nm 處測定吸光度。以蘆丁(Rutin)作為標準品并按上述方法繪制標準曲線,得到回歸方程y=1.09702x+0.00752(=0.99979),總黃酮含量以每克精油中蘆丁的毫克數表示。
1.2.6.3 精油中花青素含量的測定 參考文獻[13]的方法,將三種精油配成1 mg/mL 乙醇-精油溶液,取1 mL 樣品溶液加入到試管中,然后加入2 mL 氯化鉀緩沖液(pH1.0),充分混合,室溫下放置30 min。用蒸餾水作空白調零,在510 和700 nm 下測量混合物的OD 值。然后樣液與乙酸鈉緩沖液(pH4.5)類似地合并,并分別在相同波長下測量這些溶液的吸光度。測量重復3 次。總花青素含量計算公式如下:

式中,C 為花青素含量,mg/g;A 為兩種緩沖液吸光度的差值;A表示樣品在520 nm 處測得的吸光度;A表示樣品在700 nm 處測得的吸光度;V 為精油溶液體積,mL;M 為矢車菊-3-葡糖苷的相對分子質量,449.2 ;n 為稀釋倍數;為摩爾消光系數,26900(矢車菊素-3-葡萄糖苷的摩爾消光系數);m 為樣品質量,g。
1.2.7 DPPH 自由基清除能力測定 參考文獻[14]的方法,將1 mL 精油稀釋液用移液槍轉移到5 mL 離心管中,再移取1 mmol/L 的DPPH 反應液2 mL,渦旋后在陰暗條件下反應30 min,測得混合液在517 nm下的吸光值A,無水乙醇代替精油測得A,無水乙醇代替DPPH 反應液測得A,用無水乙醇調零,以抗壞血酸作為陽性對照,平行操作重復3 次。清除率按下式計算:

式中,R:清除率,%;A:空白組吸光值;A:樣品組吸光值;A:無水乙醇代替DPPH 反應液所得吸光值。
1.2.8 ABTS 自由基清除能力測定 參考文獻[15]的方法,分別用10 mL 容量瓶配制好7 mmol/L ABTS 溶液與2.5 mmol/L 過硫酸鉀溶液后在燒杯中混合,避光保存16 h 后即為ABTS 儲備液,然后用無水乙醇將其稀釋成734 nm 下OD 值為0.70±0.02 即得淡綠色的ABTS 工作液。將1 mL 精油-無水乙醇稀釋液與3 mL 上述工作液在5 mL 離心管中混合后于陰暗條件下反應30 min,在734 nm 處測定吸光值A,無水乙醇代替精油測得A,無水乙醇代替ABTS 工作液測得A,用無水乙醇調零,以抗壞血酸為陽性對照,平行操作重復3 次。清除率按下式計算:

式中,R:清除率,%;A:空白組吸光值;A:樣品組吸光值;A:無水乙醇代替ABTS 工作液所得吸光值。
1.2.9 總抗氧化能力測定(FRAP 法)參考文獻[16]的方法測定總抗氧化能力。FRAP 工作液的配置:將0.3 mol/L 醋酸緩沖溶液(用1 mol/L HCl 調至pH3.6)、10 mmol/L 2,4,6-三吡啶基三嗪(TPTZ)鹽酸溶液和20 mmol/L FeCl溶液按10:1:1 體積比配制,現用現配。分別取0.2~1.6 mmol/L FeSO0.1 mL,加入1.8 mL FRAP 工作液和3.1 mL 的蒸餾水,37 ℃下水浴30 min,在593 nm 處測定吸光度,繪制標準曲線,得到回歸方程為y=0.4990x+0.0223(=0.9990)。分別取0.1 mL 精油-乙醇溶液(0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2 mg/mL),同法處理,用無水乙醇調零,測定吸光度。以抗壞血酸作為陽性對照,樣品的總抗氧化能力以FRAP 值表示,1 FRAP=1 mmol/L FeSO,即樣品的抗氧化能力相當于FeSO濃度。
利用Excel(2010 版本,美國微軟公司)和SPSS(25.0 版本,美國IBM 公司)進行數據處理和分析,方差分析(ANOVA)采用鄧肯多重比較(=0.05),相關性分析以Pearson 相關系數表示;使用Origin(2018 版本,美國IBM 公司)對實驗數據進行作圖。所有測定重復三次,結果以平均值±標準差表示。
所有樣品的色狀均一,呈現淡黃色。不同提取方法下的百里香精油得率如圖1 所示,可以看出在三種提取方法下百里香精油的得率有顯著差異(<0.05),得率從高到低依次是SDE(1.30%)>CPAE(1.17%)>SD(0.98%)。本研究中,SDE 法相比SD法萃取更為完全,所以提取效果更好,而CPAE 可能是通過等離子體的作用引起離子和電子的轟擊,導致百里香表面的刻蝕,使油腺體破裂,從而提高了得率。精油得率受原料生長環境因素和提取方法的影響很大。徐世千等采用了水蒸氣蒸餾法、有機溶劑萃取法和超臨界CO萃取法來提取百里香精油,得率在0.19%~0.27%,其中,超臨界CO萃取法的產量最高,但是質量較差,不利于進一步利用。也有研究者優化超高壓提取和微波提取百里香精油,最佳條件下得率在1.04%~1.11%之間。

圖1 不同提取方法對百里香精油得率的影響Fig.1 Effect of different extraction methods on yield of essential oil from Thymus vulgaris L.
2.2.1 百里香精油揮發性成分分析 本實驗采用GC-MS 對三種方法提取的百里香精油進行了揮發性成分分析,結果如表1 所示,總計鑒定出36 種化合物,占總成分的98.670%~99.774%,其中,萜烯化合物含量占總成分的6.368%~9.976%,醇類化合物含量占總成分的50.348%~51.575%,酮類化合物含量占總成分的1.448%~1.744%,酚類化合物占總成分的30.296%~35.200%,其他化合物占總成分的4.395%~7.681%。

表1 百里香精油成分的 GC-MS 分析Table 1 GC-MS analysis of essential oil from Thymus vulgaris L.
百里香精油中的主要成分(含量超過10%)有4 個,含量最高的是2-茨醇(32.194%~32.515%),又稱為龍腦、冰片,它具有一定清熱明目的功效和類似薄荷和胡椒的香氣特征;其次是香芹酚(17.265%~19.998%)和百里香酚(13.031%~15.202%),它們是從葉綠體中產生的含氧單萜,有著濃郁的麝香味被廣泛用于制作香料,也是評估百里香精油質量的重要參數;然后是-松油醇(11.296%~12.012%),它有著較強的抑菌、抗氧化和驅蚊活性。百里香精油是這些高含量化合物的天然來源。與已發表的報道相比,本研究百里香精油的揮發性成分中,2-茨醇代替百里香酚成為精油中含量最高的組分,這種差異主要是由于原料產地和生長條件的不同而導致的。Miguel 等的研究也給出了較為接近的結果,觀察到不同采收期、采集地的百里香精油的2-茨醇含量在10.7%~30.8%范圍內,Borges 等也發現百里香精油(原料產地為巴西)的揮發性成分中以2-茨醇為主要化合物,而更多文獻顯示出用該品種百里香所提的精油其百里香酚含量在39.5%~71.29%之間,占據主導地位,2-茨醇含量則在1.19%~2.14%之間。在其他組分中,p-聚傘花烴和-萜品烯是所有百里香品種都具有的成分,也有研究者報道-萜品烯可以通過中間產物p-聚傘花烴來合成百里香酚。
研究表明,提取參數中的許多因素,如溫度、時間、提取過程的類型以及原料產出的地點、土壤成分、濕度、海拔等許多其他環境因素都會影響精油的含量和組成。三種方法在成分上所表現出的差異可以歸因于SDE 法中有機蒸汽與樣品蒸汽可以進行更徹底的交換和萃取,從而獲取更多有效成分;而在CPAE 法中等離子體的應用會產生活性物質和自由基,可能導致精油化合物的氧化降解或異構化。
總體而言,與傳統的SD 法相比,SDE 法和CPAE法得到更高的2-茨醇、百里香酚和香芹酚含量,精油質量更高。
2.2.2 百里香精油總酚、總黃酮、花青素含量分析目前為止進行的研究已經證實,百里香不僅被認為是酚類和類黃酮的重要來源,而且還具有作為天然抗氧化劑的前景。總酚、總黃酮和花青素含量是廣泛用于評估樣品中抗氧化活性的重要指標。不同提取方法得到的百里香精油抗氧化活性含量如表2 所示,水蒸氣蒸餾法相比其他方法總酚當量最低,只有129.51 mg 沒食子酸當量,SDE 法的精油總酚含量最高,可達133.67 mg 沒食子酸當量,但兩者并無顯著差異(>0.05)。這與GC-MS 結果分析里三種樣品酚類含量的比較結果相一致。總黃酮的含量在47.53~54.82 mg Rutin/g EO 之間,SDE 法與CPAE 法得到的精油在總黃酮含量上有顯著差異(<0.05)。花青素的含量在0.08~0.32 mg/g EO,其中,SDE 法提取的百里香精油中含量最高,其次是CPAE 法和SD 法,而且SDE 法與其他方法相比有顯著性差異(<0.05)。

表2 百里香精油中總酚、總黃酮、花青素含量Table 2 Contents of total phenols,flavonoids and anthocyanins in Thymus vulgaris L.essential oil
2.3.1 百里香精油對DPPH 自由基的清除能力DPPH 自由基清除活性測試是最常用的抗氧化活性評估方法。由圖2 可以看出,在0.5~5 mg/mL 濃度范圍內,隨著濃度的增大,三種精油對DPPH 自由基都有著良好的清除能力,呈現出明顯的量效關系。SDE 法提取的精油在2 mg/mL 時清除率便可達到95%以上,此時已接近同濃度V的清除活性,但總體上抗氧化活性要弱于V。SDE 法、CPAE 法、SD法精油的IC分別為0.57、0.86、1.28 mg/mL,所以DPPH 抗氧化活性排序為:SDE>CPAE>SD。

圖2 百里香精油對DPPH 自由基的清除能力Fig.2 Scavenging activity of Thymus vulgaris L.essential oil on DPPH free radicals
不同精油間抗氧化性的差異可能歸因于酚類化合物含量的不同。因此,表現出較高抗氧化活性的精油其總酚含量可能更高。近年來,百里香精油的抗氧化能力已經得到深入研究。百里香精油里富含的百里香酚和香芹酚與它們較高的自由基清除活性密切相關。酚類化合物的抗氧化原理可以解釋為由于其化學結構允許它們向自由基供氫,從而使自由基被還原。此外,由單萜酚和倍半萜組成的精油已被認為具有更高的抗氧化能力。
2.3.2 百里香精油對ABTS 自由基的清除能力 由圖3 可知,在0.02~1 mg/mL 濃度范圍內,隨著濃度的增大,三種精油對ABTS 自由基都有著良好的清除能力,呈現出明顯的量效關系。SDE 法提取的精油在1 mg/mL 時已接近同濃度V的清除活性,CPAE 法相比SD 法抗氧化效果略有提高,但差距并不明顯。SDE 法、CPAE 法、SD 法精油的IC分別為0.018、0.022、0.028 mg/mL,所以ABTS 抗氧化活性排序為:SDE>CPAE>SD。Mayara 等也報道了百里香精油極強的ABTS 自由基清除活性,除此之外還研究了百里香精油主要揮發性成分的單體抗氧化性,發現只有百里香酚和香芹酚具有高效清除自由基的功能(IC分別為3.7 μg/mL 和3.4 μg/mL),而單體松油烯和芳樟醇并沒有表現出抗氧化活性。也有報道稱-松油醇對于ABTS 自由基也具有可觀的清除效果。總體而言,百里香精油對ABTS 自由基的清除活性主要來自其酚類物質。

圖3 百里香精油對ABTS 自由基的清除能力Fig.3 Scavenging activity of Thymus vulgaris L.essential oil on ABTS free radicals
2.3.3 百里香精油總抗氧化能力 金屬離子的存在會加速活性氧化物的形成同時激發氧化反應的產生。將金屬離子還原可以阻止這一反應并提供氧化穩定性。因此,本實驗采用鐵離子還原法測定百里香精油的還原能力。由圖4 可知,在0.2~1.2 mg/mL濃度范圍內,V和百里香精油的總抗氧化能力呈明顯的劑量依賴效應,V的FRAP 值在2.795~5.593 mmol/L 之間,三種方法所得精油的總抗氧化能力沒有明顯的差異,其中,SDE 法的精油FRAP 值在0.275~1.053 mmol/L 范圍內,相比SD 法(0.244~1.022 mmol/L)和CPAE 法(0.283~0.998 mmol/L)精油的FRAP 值略高。總抗氧化能力順序為:SDE>SD>CPAE。百里香的高還原力與其百里香酚和香芹酚的含量有著密切關系,主要是由于芳香環上的羥基具有很強的供氫能力。

圖4 百里香精油總抗氧化能力Fig.4 Total antioxidant capacity of Thymus vulgaris L.essential oil
2.3.4 百里香精油的化學成分與抗氧化性相關性分析 精油的生物活性組分與其抗氧化性之間有著明顯的相關性。如表3 所示,DPPH 自由基清除能力與總酚呈顯著性正相關(<0.05),與2-茨醇、百里香酚、香芹酚、-松油醇含量呈極顯著正相關(<0.01),相關系數分別為0.838、0.818、0.820、0.843,可見這幾種成分是百里香精油中清除DPPH 自由基的關鍵物質。ABTS 自由基清除能力與2-茨醇、-松油醇含量呈顯著正相關(<0.05),與花青素含量呈極顯著正相關(<0.01),相關系數達到了0.990,可知2-茨醇、-松油醇和花青素在清除ABTS 自由基時起到重要作用。總抗氧化能力與總酚含量呈極顯著正相關(<0.01),相關系數為0.821。除此之外,可以看出百里香酚和香芹酚的含量呈現出極強的相關性,而且香芹酚含量高的精油,百里香酚含量也較高,這可能是因為它們之間具有生物合成關系,Thompson等的研究也得出了與本文類似的結果。經過Pearson 相關性分析也進一步證實,百里香精油的抗氧化活性與酚類物質的含量密切相關。

表3 不同方法提取的百里香精油抗氧化性與主要化學成分的相關系數Table 3 Correlation coefficients between antioxidant activity and main chemical components of essential oil extracted by different methods
本研究采用SD 法、SDE 法和較為新穎的CPAE法制得了三種百里香精油,從得率上看,CPAE 法比SD 法有了一定的提高,但SDE 法可以在同樣的時間里獲得最多的精油且有著顯著差異(<0.05)。通過GC-MS 分析了三種百里香精油的揮發性成分,共鑒定出了36 種組分,組分和含量上三種精油有著一定差異,在主要活性成分上SDE 法和CPAE 法都展現出比SD 法更高的含量。對百里香精油進行了總酚、總黃酮和花青素含量的測定,SDE 法的精油中三種活性物質也呈現出較高的含量,這與三種精油的GC-MS 分析結果中酚類物質的含量水平相一致。三種精油對于DPPH、ABTS 自由基都有很強的清除能力,也具有一定的總抗氧化能力。總體上來說,三種精油的抗氧化能力順序為SDE>CPAE>SD。通過活性成分和抗氧化能力的相關性分析表明,百里香精油的自由基清除能力與酚類物質的含量呈現很強的正相關性。綜合來看,SDE 法不論是在品質和效率上都是制備百里香精油的最優方法。百里香精油作為有前景的天然抗氧化劑,如何開發出更加安全、穩定的遞送載體從而更廣泛、高效地應用于食品和醫療事業將會是未來研究的重點。