可溶性青梅果膠的表征及其對脂多糖誘導的RAW246.7 巨噬細胞炎癥的抑制作用

侯佳麗，朱珍珠，謝旻浩，楊 倩，劉 琴

（南京財經大學食品科學與工程學院/江蘇省現代糧食流通與安全協同創新中心，江蘇南京 210023）

青梅（，薔薇科杏屬植物）是一種在中國廣泛種植的重要觀賞植物。近年來，隨著青梅種植面積的逐漸擴大，青梅果的產量也不斷增多，青梅果加工業發展需求日益增加。青梅果在傳統的醫學中可被用來治療腹瀉、咳嗽等疾病，具有藥食同源的特性。目前對于青梅果的營養功能研究主要集中在對其多酚、萜類、有機酸等生物活性物質上，對于其主要多糖成分——果膠的研究還未見報道。果膠主要存在于植物細胞壁中，通常與纖維素、半纖維素等大分子相結合，一部分果膠以游離形式存在于果汁中（可溶性果膠），這部分果膠作為可溶性膳食纖維對腸道健康起著促進作用。為深入了解青梅果的功能特性，有必要對青梅果中的可溶性果膠進行研究。

植物多糖一般具有抗氧化、抗炎、抗腫瘤和改善腸道健康等多種生物功能，果膠作為多糖的一種，抗炎活性是其主要生物活性之一。如Li等從豆腐柴葉子中提取果膠，結果表明堿法提取的果膠具有較強的抗氧化性，并能對LPS 誘導的RAW264.7 細胞的炎癥具有顯著的抑制作用。多糖的抗炎機理與細胞內的多種信號通路相關，其中包括重要的炎癥轉導通路Janus 激酶/信號轉導與轉錄激活子（Janus kinase/signal transducer and activator of transcription，JAK/STAT）信號通路。Le 等對從豆渣中提取的多糖（MESP）的抗炎作用及其機理進行了研究，他們發現MESP 可抑制細胞JAK/STAT 信號通路中JAK2 和STAT3 蛋白的磷酸化水平，從而抑制促炎細胞因子的表達進而發揮抗炎作用。已有文獻報道果膠寡糖對結腸炎癥的緩解作用也與JAK/STAT 信號通路相關。青梅果膠作為天然植物多糖的一種，可能通過相似的抗炎機制發揮抗炎活性。

本研究從青梅果汁中提取可溶性果膠（WSP），并對其結構和組成進行分析，同時采用LPS 誘導的RAW264.7 細胞炎癥模型，從細胞水平評估青梅果中可溶性果膠對LPS 誘導的RAW264.7 細胞炎癥反應的影響，并探討它對JAK/STAT 通路的影響，為揭示果膠的抗炎機制，全面了解青梅果的健康促進功能，推動青梅果加工業的發展，以及進一步提高青梅果加工附加值提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與儀器

RAW264.7 細胞 中國科學院上海生命科學研究院細胞庫；青梅果 南京農力佳農業發展有限公司提供，2020 年5 月收獲于南京溧陽；DMEM 培養基、標準牛胚胎血清（FBS）美國Gibco 公司；青霉素-鏈霉素混合溶液 北京索萊寶科技有限公司；ELISA 試劑盒（IL-6、IL-10、TNF-和IFN-）北京四正柏生物科技有限公司；TRIzol試劑 Invitrogen 公司；逆轉錄試劑盒、BCA 試劑盒、-actin、STAT3、p-STAT3、抗體辣根過氧化物標記山羊抗鼠和山羊抗兔IgG（HRP）上海碧云天生物技術有限公司；實時熒光定量聚合酶鏈式反應試劑盒 南京諾唯贊生物科技股份有限公司；JAK1 英國abcam 公司；p-JAK1 美國Cell Signaling Technology 公司；葡聚糖T 系列標品（T-300、T-150、T-10、T-5）、脂多糖（LPS）、咔唑等其余化學試劑 阿拉丁試劑（上海）有限公司；單糖標品（≥99%）上海源葉生物有限公司；其他試劑均為國產分析純。

SKG 大口徑原汁機 廣東艾詩凱奇智能科技有限公司；TM-3000 掃描電子顯微鏡、U-3900 紫外可見分光光度計 日本日立公司；X 射線衍射儀 德國Bruker AXS；Freezone 2.5 真空冷凍干燥機 美國LABCONCO 公司；Agilent 1260 高效液相色譜儀美國Agilent 公司；Waters 1525 高效凝膠過濾色譜儀 美國Waters 公司；Tensor 27 傅里葉紅外光譜儀 德國Bruker 公司；Heracell 240i CO培養箱微量、U-3900 紫外分光光度計 日本日立公司；Axio Vert.A1 倒置式生物顯微鏡 北京Precise 儀器有限公司；SpectraMax? M2/M2e 全波長酶標儀 美國Molecular Devices 公司；Archimed-X4 實時熒光定量PCR 儀 北京鯤鵬基因科技有限責任公司；EPS-300 電泳儀、Tanon-5200 化學發光凝膠成像儀 上海天能科技有限公司。

1.2 實驗方法

1.2.1 可溶性青梅果膠（WSP）的提取 根據Wellala等的方法提取果汁中的可溶性果膠，具體如下：新鮮的青梅果用榨汁機榨汁，將果汁過濾并減壓濃縮。濃縮后的青梅果汁中加入6 倍體積95%的乙醇，攪拌2 h，得到果膠粗提物的沉淀，將沉淀用丙酮洗滌，經過濾、干燥后重新用超純水溶解，并使用透析袋（3.5 kDa）在蒸餾水中透析72 h，得到進一步純化后的果膠溶液，經濃縮后在3.0 Pa，-80 ℃條件下進行真空冷凍干燥，得到WSP 凍干粉。

1.2.2 可溶性青梅果膠（WSP）的表征

1.2.2.1 果膠中半乳糖醛酸（GalA）的測定 參照Zhou 等的方法并略有修改。將WSP 凍干粉配成1 mg/mL 的溶液。將果膠溶液與濃硫酸按體積比1:6 在冰浴下混勻，隨后在85 ℃水浴中加熱15 min，冷卻至室溫后加入0.5 mL 0.15%咔唑無水乙醇搖勻，并在暗處放置1.5 h。測定其在528 nm下的吸光度。以半乳糖醛酸為標品，計算果膠樣品中半乳糖醛酸含量。

1.2.2.2 果膠中單糖的組成測定 WSP 中的單糖組成按照Zhang 等的方法測定。

色譜條件：采用ZORBAX Eclipse XDB-C（4.6 mm × 250 mm,5 μm）色譜柱，設定檢測波長為250 nm，進樣體積為10 μL，流速1 mL/min，用流動相A 和B（分別為含15%和40%乙腈的pH7.0 的磷酸緩沖溶液）按如下梯度進行洗脫：0～10 min，0～15% B；10～30 min，15%～25% B，洗脫時間為30 min。以果膠中常見的單糖標品（甘露糖，鼠李糖，葡萄糖醛酸，半乳糖醛酸，葡萄糖，半乳糖，阿拉伯糖和巖藻糖）為對照，通過它們的保留時間和標準曲線來對WSP 中的單糖進行定性和定量分析。

1.2.2.3 果膠分子量測定 配制2 mg/mL WSP 水溶液，用高效凝膠過濾色譜（HPGFC）與示差折光檢測器（RID）測定果膠樣品的分子量（Mw）和分布。具體方法如下：采用兩個色譜柱（Ultrahydrogel TM Linear 300 mm×7.8 mmid）串聯進行分離，設定柱溫40 °C，流速0.8 mL/min，用含有0.05% NaN的NaNO（0.1 mol/L）溶液為流動相進行洗脫，進樣體積為20 μL，洗脫時間為30 min。以葡聚糖（Dextran）T-300（Mw=300600）、DextranT-150（Mw=135030）、Dextran T-10（Mw=9750）和Dextran T-5（Mw=2700）為標準品進行分子量計算。

1.2.2.4 傅里葉紅外光譜檢測 青梅果膠粉末與溴化鉀按1:200 混合壓片，用傅里葉變換紅外光譜儀測定樣品在4000～400 cm范圍的吸收光譜。

1.2.2.5 掃描電鏡（SEM）用導電膠帶將果膠粉末固定在樣品架上，并在真空下濺射金粉，然后在兩種放大倍數下（×0.5 k 和×1.5 k）通過15 kV 的加速電壓照相，來獲取果膠形態的圖片。

1.2.2.6 X 射線衍射（XRD）果膠粉末樣品的結構用X 射線衍射儀進行測定，掃描范圍為0～80 度衍射角，Cu-K輻射，電壓設置為40 kV，電流為40 mA。

1.2.3 細胞培養 取對數生長期的RAW 264.7 細胞以1×10個/mL 的密度接種于96 孔板中，用含有10%胎牛血清（FBS）、1%抗生素（100 U/mL 青霉素、100 μg/mL 硫酸鏈霉素和0.25 μg/mL 兩性霉素B）的DMEM 全培養基進行培養。控制溫度為37 ℃，CO濃度為5%。24 h 后給藥預處理4 h，然后加入5 μL LPS 的磷酸緩沖溶液（PBS），使其在1 μg/mL的LPS 刺激下培養24 h，具體分組如下：

樣品組：分別用含50、100、200 μg/mL WSP 的DMEM 溶液預處理4 h，然后加入LPS 繼續培養24 h；模型組（LPS 組）：用DMEM 培養基培養4 h 后加入LPS 繼續培養24 h；正常組（Control 組）：用DMEM 培養基培養4 h 后加入5 μL PBS 繼續培養24 h。

1.2.4 果膠的毒性評價（MTT 法）按照1.2.3 進行細胞培養和分組實驗，WSP 的濃度設置為50、100、200、500 μg/mL，經4 h 給藥處理和24 h LPS 刺激培養后，將培養液換成5 mg/mL 的噻唑藍（MTT）溶液繼續培養4 h，然后去掉上清液，加入150 μL 二甲基亞砜（DMSO），在37 ℃下振蕩15～20 min，用酶標儀在490 nm 處讀取各孔的OD 值。

1.2.5 LPS 誘導RAW264.7 細胞分泌的細胞炎癥因子含量測定 收集按1.2.3 中方法處理的各實驗組細胞上清液，按照ELISA 試劑盒的操作說明，分別測定上清液中TNF-、IL-6、IL-10 和IFN-的含量。

1.2.6 RAW264.7 細胞中JAK/STAT 通路相關基因mRNA 表達測定 取對數生長期的細胞以2×10～4×10個/mL 的密度接種至12 孔板，分組同1.2.3，24 h 后用Trizol 試劑提取細胞中的RNA，微量紫外分光光度計檢測RNA 濃度。用逆轉錄試劑盒將RNA 逆轉錄為cDNA。按照實時熒光定量聚合酶鏈式反應試劑盒的說明操作，置于實時熒光定量PCR 儀中，進行循環反應，反應完畢后采用差異倍數2計算mRNA 的相對表達水平，至少進行3 次平行實驗。相關引物序列如表1 所示。

表1 內參β-actin 和JAK/STAT 通路相關基因引物序列Table 1 The sequence of the primer of reference β-actin and relative genes in JAK/STAT pathway

1.2.7 RAW264.7 細胞中JAK/STAT 通路相關蛋白表達測定 取對數生長期的細胞以1×10個/mL 的密度接種至6 孔板中，按1.2.3 中的方法分組培養，孵育24 h 后移除上清，用PBS 清洗后加入200 μL的裂解液進行裂解，然后在4 ℃和12000 r/min 下離心15 min，用BCA 試劑盒測定上清的蛋白含量，在95 ℃下加熱5 min 使蛋白質變性。用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳儀（SDS-PAGE）進行電泳，先在80 V 恒電壓下電泳30 min，然后在120 V 恒電壓下電泳60 min，電泳結束后將膠片轉移到聚偏氟乙烯（PVDF）膜（Millipore，美國）上，用5%脫脂牛奶4 ℃封閉40 min；PBST 中沖洗后，分別加入JAK1、STAT3、p-JAK1、p-STAT3 和-actin 抗體，4 ℃下孵育過夜，回收一抗。PBST 沖洗后4 ℃孵育二抗1 h，回收二抗，用PBST 清洗PVDF 膜洗4 次后將用化學發光顯影液滴加在PVDF 膜上，反應1 min后用化學發光凝膠成像儀進行顯影。

1.3 數據處理

數據用平均值±標準差表示，采用SPSS、GraphPad Prism 7.0 和Origin 軟件進行數據分析和作圖，以ANOVA 進行顯著性分析，＜0.05 表示差異顯著。

2 結果與分析

2.1 可溶性青梅果膠（WSP）的純度、單糖組成及分子量

半乳糖醛酸含量是果膠純度指標，按照果膠標準（GB 25533-2010），用作食品添加劑的果膠中半乳糖醛酸含量不低于65%。根據紫外可見分光光度法得到WSP 的半乳糖醛酸含量為78.93%，說明所提取的WSP 具有較高的純度。

果膠的單糖及其結構域組成是其表征中的重要指標，有研究表明，果膠的結構與它的功能特性之間有著密切的聯系。圖1 是WSP 酸解后的單糖PMP衍生物的HPLC 色譜圖，可以看到WSP 中共檢測出七種單糖，定量分析結果見表2，果膠中的主要單糖是半乳糖醛酸（GalA）占總單糖含量的69.72%。而半乳糖（Gal）為主要的中性單糖，占單糖含量的18.36%，其次是阿拉伯糖（Ara）和鼠李糖（Rha），分別占6.31%和4.63%。有研究從蘋果、胡蘿卜和秋葵中提取水溶性果膠，發現其主要中性單糖也是半乳糖，與本研究結果一致，而Marcclin 等從番石榴中提取的水溶性果膠的主要中性單糖是阿拉伯糖。不同來源的果膠其中性糖組成有明顯差異。果膠主要是由同型半乳糖醛酸聚糖（HG）、鼠李半乳糖醛酸聚糖I 和II（RG-I 和RG-II）三個結構區域組成。根據單糖的組成，計算得到WSP 主要含HG 和RG-I 結構域，占比分別為65.09%和33.93%。在抑制炎癥方面，果膠的HG 結構域是緩解急性炎癥的優先區域，而RG-I 區域的側鏈與半乳糖凝集素-3（Gal-3）可以緊密結合，對其抗炎作用也具有重要貢獻。

表2 WSP 的單糖和結構域組成Table 2 Monosaccharide and region constitution of WSP

圖1 WSP 中單糖PMP 衍生物的高效液相色譜圖Fig.1 High performance liquid chromatogram of monosaccharide PMP derivate of WSP

果膠的分子量不僅與其乳化和凝膠特性等物理性質有關，還與其生物功能，如抗氧化活性和對腸道健康的影響有關。通過高效凝膠過濾色譜與示差折光檢測器聯用（HPGFC-RID），以不同分子量的葡聚糖（Dextran）為標品，對WSP 的分子量進行了測定。圖2 為WSP 的高效凝膠過濾色譜，表3 為測定結果。由圖2 可以看到，WSP 高效凝膠過濾色譜分離出現兩個色譜峰，第一個峰的保留時間為15.60 min，其對應的重均分子量（Mw）和數均分子量（Mn）分別為370.27 和45.91 kDa；而在19.60 min時出現第二個峰，其對應的Mw 和Mn 分別是1.17和0.88 kDa；按照峰面積比和儀器自帶軟件ASTRA 7.3.2 計算得到WSP 的平均Mw 為353.73 kDa，平均Mn 為31.16 kDa，分散指數（PDI=Mw/Mn）為11.35。Zhou 等從山楂、蘋果、桃子和胡蘿卜中分別提取水溶性果膠，發現這四者的Mw 分別是80.6、128、396 和198 kDa，Li 等從秋葵莖中提取的水溶果膠其Mw 為178.4 kDa，本研究中WSP 的分子量與桃子中可溶性果膠的分子量接近。

圖2 WSP 的高效凝膠過濾色譜Fig.2 High performance gel filtration chromatogram of WSP

表3 WSP 的分子量分布Table 3 The molecular weight distribution of WSP

2.2 可溶性青梅果膠（WSP）紅外光譜特征及酯化度

WSP 的FTIR 光譜見圖3A。由圖3A 可以觀察到在3500～2900 cm處有一個大的包峰，該峰對應的是羥基和羧基的O-H 伸縮振動峰，由于氫鍵作用而形成了寬峰。在1736.89 cm處的吸收是由甲基酯化羧基的CO 伸縮振動引起的，而1637.45 cm處的吸收峰是由游離羧基的CO 伸縮振動引起的，在1529.17 cm處存在芳香環振動峰。在950～1200 cm之間的吸收區中存在強烈的峰，可能是由于與糖苷鍵和吡喃環相關的振動所致。通過計算1736.89 cm（COO-R）的峰面積與1637.45 cm（COO-）的峰面積之和的比值，可以得到WSP 的酯化度為18.89%，屬于低酯果膠。

2.3 可溶性青梅果膠（WSP）的形貌特征

為了分析WSP 的形貌特征，本研究采用X-射線衍射（XRD）和掃描電鏡（SEM）對其進行了測定，結果分別見圖3B 和圖4。XRD（圖3B）結果顯示，WSP在21.78°處顯示出非常細小的尖峰，其余地方無明顯的峰，因此可以判斷它是含有少量微晶的無定型結構。

圖3 WSP 的傅里葉紅外光譜（A）和X-射線衍射（B）Fig.3 Fourier transforms infrared spectrum (FTIR) (A) and Xray diffraction (XRD) (B) of WSP

圖4A 和4B 是用掃描電鏡在不同放大倍數下測得的WSP 的表面形態，由圖4A 可以看到，WSP表面是絲狀和片狀交聯的結構，為非晶型結構，與Pan 等從甜瓜中提取的水溶性果膠形態相似。放大后可以觀察到表面有少量凹凸的顆粒（圖4B），與XRD 測得有少量微晶結構的結果一致。

圖4 WSP 的掃描電鏡Fig.4 Scanning electron microscope (SEM) of WSP

2.4 可溶性青梅果膠（WSP）對LPS 誘導的RAW264.7細胞活性的影響

MTT 法對細胞存活率的測定結果如圖5 所示，WSP 在50～200 μg/mL 范圍內不會對RAW264.7細胞存活率產生影響，而當果膠濃度為500 μg/mL時，RAW264.7 細胞的存活率顯著降低（＜0.05）。因此選取50、100 和200 μg/mL 作為WSP 的低中高三個濃度進行后續實驗。

圖5 WSP 對LPS 誘導RAW264.7 細胞存活率的影響Fig.5 Effect of WSP on viability of LPS-induced RAW264.7 cells

2.5 可溶性青梅果膠（WSP）對LPS 誘導的RAW264.7細胞炎癥的影響

脂多糖（Lipopolysaccharide，LPS）作用于細胞表面會促進大量的細胞因子如TNF-、IFN-、IL-6和IL-1等的釋放，導致炎癥細胞浸潤，而IL-10 是一種重要的抗炎因子，它可以拮抗其他細胞因子（如TNF-、IL-6）的促炎作用，從而控制炎癥。本研究采用ELISA 法測定細胞培養液中細胞因子水平，探究WSP 對LPS 誘導的RAW264.7 細胞炎癥的緩解作用，結果見圖6。由圖6 可以看到，LPS 刺激下RAW 264.7 細胞的TNF-、IFN-、IL-6 和IL-10 的釋放量分別由正常組的5.62±0.06 ng/mL，69.01±4.43 pg/mL，15.75±9.17 pg/mL和 116.99±1.74 pg/mL 增加至39.02±2.55 ng/mL，274.22±1.77 pg/mL，386.79±31.97 pg/mL 和521.24±12.57 pg/mL，即RAW264.7細胞在LPS 誘導作用下產生了較強的炎癥反應。而用WSP 預處理顯著抑制了促炎因子TNF-（＜0.05）、IFN-＜0.05）和IL-6（＜0.001）的產生，促進抗炎因子IL-10 的分泌（＜0.01），并具有劑量依賴關系，說明WSP 可顯著緩解LPS 誘導的RAW264.7細胞的炎癥。研究表明果膠的抗炎活性與其酯化度相關，與高酯果膠相比，低酯果膠具有更好的抗炎活性。前面的分析表明，WSP 屬于低酯果膠，其酯化度僅為18.89%，因此WSP 的結構有利于其發揮抗炎活性。

圖6 WSP 對LPS 誘導的RAW264.7 細胞炎癥因子表達水平的影響Fig.6 The effect of WSP on the expression of inflammatory factors in LPS-induced RAW264.7 cells

2.6 可溶性青梅果膠（WSP）對LPS 誘導的RAW264.7細胞JAK/STAT 通路的影響

JAK/STAT 信號通路參與調節多種生物功能。JAK 家族中JAK1、JAK2、JAK3 和STAT 家族成員中的STAT1，STAT2 和STAT3 與炎癥反應密切相關。在本研究中，首先考察了WSP 對JAK1、JAK2、JAK3 及STAT1，STAT2 和STAT3 的mRNA 表達的影響。從圖7 可以看到，LPS 處理后上述mRNA的表達量明顯下調。與LPS 組相比，高濃度組（200 μg/mL）WSP 預處理可顯著上調RAW264.7細胞上述所有JAK 及STAT 的mRNA 表達（＜0.01）。在低濃度WSP（50 μg/mL）的處理條件下，僅JAK1（＜0.001）和STAT3（＜0.05）的mRNA 的相對表達量顯著上調，而JAK2、3 和STAT1、2 的mRNA表達與LPS 組相比無顯著性差異（＞0.05）。該結果表明，WSP 可調控JAK/STAT 信號轉導，其中對JAK1 和STAT3 的影響最為顯著。

圖7 WSP 對LPS 誘導的RAW264.7 細胞JAK/STAT 通路相關基因mRNA 含量表達的影響Fig.7 Effect of WSP on the mRNA expression of the genes related to JAK/STAT pathway in LPS-induced RAW264.7 cells

2.7 可溶性青梅果膠（WSP）對LPS 誘導的RAW264.7細胞JAK1/STAT3 蛋白磷酸化的影響

根據文獻報道，細胞因子IL-6、IL-10 及IFN-會激活JAK/STAT 信號通路，誘導JAK 的磷酸化以及JAK 介導的受體磷酸化，促進非活化狀態的STAT單體變為磷酸化的STAT 二聚體，加劇炎癥反應，抑制JAK 和STAT 磷酸化水平可緩解炎癥。磷酸化JAK 與JAK 表達量的比值（p-JAK1/JAK1）及磷酸化STAT 與STAT 表達量的比值（p-STAT/STAT）分別反映了細胞內JAK 和STAT 由非活化狀態向磷酸化狀態轉化的程度，即磷酸化水平。結合JAK 家族和STAT 家族成員的mRNA 表達量結果，重點考察了WSP 對LPS 誘導的細胞內JAK1和STAT3 磷酸化水平的影響。蛋白印跡法結果如圖8 所示，以-actin 作為內參蛋白，與正常對照組相比，LPS 刺激后細胞內P-JAK1/JAK1 比值顯著升高（＜0.001）（圖8A）；與此同時，P-STAT3/STAT3 比值也顯著升高（＜0.01）（圖8B）。這是因為當LPS作用于細胞膜后，會導致膜上受體傳遞相應的信號給JAK 蛋白，從而活化JAK，使JAK 蛋白磷酸化，導致STAT 蛋白的磷酸化。當WSP 預處理濃度為100 和200 μg/mL 時，與LPS 誘導的細胞內p-JAK1/JAK1 和p-STAT3/STAT3 相比均顯著降低（＜0.05）。該結果進一步表明，WSP 可通過下調巨噬細胞內炎癥信號的JAK1 和STAT3 磷酸化水平而抑制LPS 誘導的炎癥。

圖8 WSP 對LPS 誘導的RAW264.7 細胞中p-JAK1、JAK1、p-STAT3 和STAT3 蛋白表達的影響Fig.8 Effect of WSP on the expression of p-JAK1,JAK1,p-STAT3 and STAT3 protein in LPS-induced RAW264.7 cells

3 結論

本研究從青梅果汁中提取了可溶性青梅果膠（WSP），確定了WSP 是酯化度為18.89%的低酯果膠，其中性糖以半乳糖含量最高（18.36%±0.42%），其次是阿拉伯糖（6.31%±0.17%）和鼠李糖（4.63%±0.01%），結構域HG 和RG-I 的組成分別為65.09%和33.93%。通過構建LPS 誘導的RAW264.7 巨噬細胞炎癥模型，發現WSP 可顯著抑制促炎因子TNF-（＜0.05）、IFN-（＜0.05）和IL-6（＜0.001）的釋放，促進抗炎因子IL-10（＜0.01）的分泌，對LPS誘導的RAW 264.7 巨噬細胞炎癥起到有效的緩解作用。機理研究表明，WSP 是通過上調LPS 誘導的RAW264.7 細胞內炎癥相關的JAK/STAT 信號通路中JAK 和STAT 家族mRNA 的表達，降低JAK 和STAT 家族相關蛋白的磷酸化水平而發揮抗炎作用。本研究可為全面評價青梅的健康促進作用和提高青梅加工產品附加值提供參考。要深入了解WSP的抗炎機制，還需要進一步研究比較WSP 對其它信號通路如NF-B 和MAPK 信號通路的影響。